作者:李婷; 吴永平 期刊:《徐州医科大学学报》 2004年第04期
目的设计一个抗缺氧诱导因子1α(HIF-1α)mRNA的锤头状核酶,并构建它的基因表达载体,以便用于肿瘤的基因治疗.方法用RNA结构分析软件预测HIF-1α mRNA的二级结构并选择合适的核酶作用靶点,以选定的靶点设计相应的锤头状核酶,合成编码核酶的DNA并克隆到载体pSP72上,酶切及DNA测序鉴定核酶序列.结果HIF-1α mRNA的72位含有GUC三联体,可以作为核酶的切割靶点,设计的核酶包括22nt的催化活性中心和16 nt的侧翼序列.计算机辅助预测证明此位点...
作者:张守纯; 王太一; 于业辉; 李华 期刊:《中国实验动物学报》 2005年第01期
目的构建Pcr(R)3.1/p16真核表达质粒,并建立其稳定表达的NIH3T3细胞株.方法将人的p16cDNA亚克隆至Pcr(R)3.1,将该重组质粒转化DH5α感受态大肠埃希菌,筛选阳性克隆,进行EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切鉴定及DNA测序,将已鉴定的pCR(R)3.1/p16经脂质体介导转染至NIH3T3细胞中.结果重组质粒双酶切后,出现约800 bp片段,提示p16cDN断已插入pCR(R)3.1多克隆位点内,DNA测序显示p16 cDNA按照正确方向和阅读框插入表达载体pCR(R)3.1.通过pCR(R)3.1/p16...
作者:宋洪元; 曹必好; 丁建刚; 雷建军; 宋明 期刊:《农业生物技术学报》 2004年第04期
结合Cre/lox定位重组系统和杂种一代的育种特点,构建了反义肌动蛋白雄性不育基因表达载体pCABARTAAct和相应的恢复基因表达载体pBINPLUSCre。将位于质粒pSTAAct中的反义肌动蛋白雄性不育基因表达盒(含TA29启动子、反向插入TA29启动子下游的Actin基因及Nos终止子)切下插入中间克隆载体pGloxp两个同向lox位点之间,再将上述表达盒连同lox位点切下插入pcAMBar,获得以除草剂Basta为筛选剂的反义肌动蛋白雄性不育基因表达载体pcABARTA...
作者:刘辉; 朱平; 林宁晶; 张英; 卜定方; 王奕嘉; 王逸群; 杨英 期刊:《中华医学》 2004年第01期
作者:蒋卫民; 卢洪洲; 潘孝彰; 康来仪; 尹春煜; 胡越凯; 翁心华 期刊:《中华传染病》 2005年第03期
目的用基因重组技术将HIV-1 p24基因以及gp41基因具有抗原线性中和表位的部分重组连接,构建重组质粒,并在大肠埃希菌中高效表达融合蛋白.方法设计带有酶切位点的引物,分别PCR扩增p24和gp41两个基因,将它们分别连接到pMD18-T载体中,测序验证后,挑选出含有目的基因的正确克隆.将p24片段酶切后连接到gp41基因所在的pMD18-T载体中,再将连接后的两个基因酶切,重新连接到pET21a表达载体中.将表达载体转染大肠埃希菌诱导表达,经Western-bl...
作者:白桂芹; 成军; 刘妍; 刘蔚; 张树林 期刊:《世界华人消化》 2005年第15期
目的:研究乙型肝炎病毒(HBV)X蛋白(HBxAg)对前-X基因启动子的调节作用,研究HBxAg在HBV致病的分子生物学机制中的作用.方法:应用聚合酶链反应(PCR)扩增HBV前X基因启动子,以T—A克隆法,将前-X基因启动子(promoter)的基因片段连入栽体pGEM—T.将获得的质粒pGEMT-前-X—promoter与报告质粒pCAT3-basic分别用KpnI和Bgl Ⅱ双酶切后构建前-X启动子报告基因表达载体pCAT3-前-X—promoter,以重组表达质粒pCAT3-前-X-promote...
作者:张微微; 车代弟; 张兴; 王金刚; 樊金萍 期刊:《分子植物育种》 2005年第04期
CBF1转录激活因子能调控一组抗干旱、抗低温基因的表达,更有效地提高植物抗干旱、抗低温的能力.现在国内外许多研究机构已经利用导入该转录因子来提高植物的抗寒性、抗旱性,并且获得一定的成功,但在园林植物上的应用还有待探讨.因此,本研究以拟南芥叶片为材料,通过PCR方法对其基因组DNA扩增,成功地克隆了逆境诱导型启动子和CBF1转录因子并分别构建了花椰菜花叶病毒CaMV35s启动子和rd29a启动子调控下的CBF1融合基因表达载体,为下一...
作者:张达矜; 王琰; 化冰; 刘晓琳 期刊:《中华微生物学和免疫学》 2004年第01期
目的用丝状噬菌体外壳蛋白Ⅸ(pⅨ)展示抗体Fab段,并与外壳蛋白Ⅲ(pⅢ)展示效果进行比较. 方法采用PCR方法钓取噬菌体蛋白Ⅸ基因,构建pⅨ展示抗乙肝表面抗原Fab的表达载体,制备噬菌体抗体,鉴定其抗原结合活性和Fab呈现水平,观察了噬菌体洗脱回收效率,并与pⅢ展示进行比较. 结果噬菌体pⅨ可以展示有功能活性的抗体Fab段,但对Fab的展示率低于pⅢ,展示率的高低可能与pⅨ展示的外源蛋白分子量大小有关."结合-洗脱-回收"实验显示,酸洗脱...
作者:贾启恒; 仲飞; 李秀锦; 王幸兴; 张峰; 韩冬梅 期刊:《畜牧与兽医》 2012年第S1期
<正>犬细小病毒编码的VP2蛋白是该病毒重要的结构蛋白和抗原蛋白。利用VP2基因制备的DNA疫苗能够刺激机体产生免疫应答反应。为进一步提高VP2 DNA疫苗的免疫活性,本实验利用犬粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)基因作为生物佐剂研究其对犬细小病毒VP2 DNA疫苗的免疫增强作用。首先通过RT-PCR方法从犬淋巴细胞中扩增GM-CSF基因,并将其插入到
一、真题再现及命题分析38【.生物——选修3:现代生物科技专题】(15分)真核生物基因中通常有内含子,而原核生物基因中没有,原核生物没有真核生物所具有的切除内含子对应的RNA序列的机制。已知在人体中基因A(有内含子)可以表达出某种特定蛋白(简称蛋白A)。回答下列问题:(1)某同学从人的基因组文库中获得了基因A,
作者:谢龙旭; 徐培林; 田颖川; 刘正德 期刊:《科学观察》 2004年第06期
2015年高考理综新课标Ⅰ卷40题是选修三涉及基因工程的一道选做题,考查了选修3中目的基因的制备和必修三中HIV的作用机理、T细胞的作用、免疫系统的功能及免疫学的应用。下面结合试题的解析及考生答题中出现的问题,谈谈选修内容教学中应注意的问题及备考复习策略。一、试题解析40.HIV属于逆转录病毒,是艾滋病的病原体。
作者: 期刊:《中国组织工程研究》 2010年第50期
组织工程技术的发展给医学的很多领域提供了全新的治疗方法,然而在组织缺损的修复过程中,不仅依赖于生物活性因子的大量纯化和合成,还需要相关因子在靶区持续发挥作用。由于因
作者:韩国胜; 刘建民; 盛伟华; 汪小华; 单云波; 杨吉成 期刊:《中华实验外科》 2010年第06期
脑胶质瘤是中枢神经系统最常见的恶性肿瘤,约占所有脑肿瘤的50%,目前多采用手术、放疗及化疗等常规疗法,但大部分患者预后不佳。我们利用已构建的腺病毒介导白细胞介素-24(IL-24)基因表达载体(Ad-IL-24),观察其对U87-MG人脑胶质瘤细胞的生长抑制和凋亡作用,并探讨其分子机制。
作者:楚宗艳 王坤波 宋国立 刘方 黎绍惠 期刊:《中国棉花》 2008年第06期
草甘膦是一种内吸传导式广谱灭生性除草剂,具有高效、低毒、无残留等特点,是目前应用最为广泛的除草剂品种之一。而因其所具有的非选择性,使其在应用中消除杂草的同时也使农作物同样受害,这就大大地限制了草甘膦的应用范围和时间。发展抗草甘膦转基因作物可以很好地解决这个难题,将为草甘膦的广泛应用带来新的机遇。
作者:李群 王学英 刘野 阮成江 期刊:《华北农学报》 2009年第05期
利用PCR技术从甘蓝型油菜(Brassica napus L.)和酵母INVSc1(Saccharomyces cerevisiae)的基因组DNA中分别扩增获得种子特异启动子napin和3-磷酸甘油脱氢酶(GPD1)基因片段,并将它们分别克隆到pMD18-T载体中。利用中间载体pBluescriptKS将两目的片段插入到植物表达载体pCAMBIA1390的多克隆位点处,构建了种子特异启动子napin驱动的GPD1基因植物表达载体p1390NG,并用冻融法将其导入根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)LBA44...
高中生物知识点繁琐、零散,高考试题千变万化,逐年加深。但是考纲、考点的变化并不大,即试题的考查点没有变。教师怎样才能透过试题找出考点,寻求答案呢?怎样才能在教学中,融入高考试题的考查呢?下面通过2015年几道基因工程高考试题的分析,尝试让生物试题"回归"考点、"回归"教材、"回归"课堂。
作者:帖步霞 章青 期刊:《生物学教学》 2015年第01期
以设计转基因抗虫棉研制过程为主线,将基因表达载体构建的内容作为重点进行基因工程专题(1)的复习。教学中通过引入图片、视频等新的情景资料突破难点,由浅入深加强思维训练。通过新情景下的师生互动形成生物学概念,从而实现高效课堂。