首页 期刊 中华传染病 HIV-1 p24和gp41融合基因表达载体的构建及融合蛋白的表达纯化 【正文】

HIV-1 p24和gp41融合基因表达载体的构建及融合蛋白的表达纯化

作者:蒋卫民; 卢洪洲; 潘孝彰; 康来仪; 尹春煜; 胡越凯; 翁心华 200040; 上海; 复旦大学上海医学院附属华山医院传染科
hiv核心蛋白质p24   hiv包膜蛋白质gp41   基因表达   重组融合蛋白质类   基因表达载体  

摘要:目的用基因重组技术将HIV-1 p24基因以及gp41基因具有抗原线性中和表位的部分重组连接,构建重组质粒,并在大肠埃希菌中高效表达融合蛋白.方法设计带有酶切位点的引物,分别PCR扩增p24和gp41两个基因,将它们分别连接到pMD18-T载体中,测序验证后,挑选出含有目的基因的正确克隆.将p24片段酶切后连接到gp41基因所在的pMD18-T载体中,再将连接后的两个基因酶切,重新连接到pET21a表达载体中.将表达载体转染大肠埃希菌诱导表达,经Western-blot验证表达正确.结果融合蛋白p24-gp41在大肠埃希菌中高效表达.结论融合蛋白p24-gp41可以在pET21a表达载体中高效表达.

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