摘要：目的设计一个抗缺氧诱导因子1α(HIF-1α)mRNA的锤头状核酶,并构建它的基因表达载体,以便用于肿瘤的基因治疗.方法用RNA结构分析软件预测HIF-1α mRNA的二级结构并选择合适的核酶作用靶点,以选定的靶点设计相应的锤头状核酶,合成编码核酶的DNA并克隆到载体pSP72上,酶切及DNA测序鉴定核酶序列.结果HIF-1α mRNA的72位含有GUC三联体,可以作为核酶的切割靶点,设计的核酶包括22nt的催化活性中心和16 nt的侧翼序列.计算机辅助预测证明此位点为合适的靶点,限制性内切酶和DNA测序证实核酶基因正确插入载体pSP72上.结论成功设计并构建抗HIF-1α mRNA锤头状核酶基因表达载体,为进一步运用核酶切割HIF-1αmRNA基因,从而抑制肿瘤生长提供了必要条件.

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