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海岛棉GbRac1基因过量表达提高转基因烟草离体叶片对赤星病的抗性

作者：李为民; 王志兴; 贾士荣 刊期：2004年第04期

利用简并引物PCR和3’RACE，克隆了海岛棉(Gossypium barbadense)GbRac1的编码基因。Northern—blot分析表明，海岛棉GbRac1基因在转录水平上受棉花黄萎病菌(Verticillium dehliae)的诱导，诱导后mRNA表达量显著增加。构建组成型植物表达载体pRac，转化烟草(Nicotiana tabacum)品种NC89，离体叶片抗病性鉴定表明，转GbRac1基因烟草对烟草赤星病(...

大规模RNA阵列验证水稻茎组织特异性高表达基因

作者：于凤池; 董海涛; 谭学林; 王晟; 徐绍忠; 李德葆 刊期：2004年第04期

在前期大规模水稻(Oryza sativa)EST测序和生物信息学分析的工作中，发现一些在茎cDNA文库中高水平表达基因，包括叶绿素a／b结合蛋白(T007D10)、富脯氨酸蛋白(S037D04)、脱落酸和逆境诱导蛋白(S057803)、微管蛋白(S060D11)等基因。为验证这些基因是否为茎特异性表达基因，选择高冗余度的EST克隆制备cDNA探针，与高通量的RNA阵列进行杂交。结果...

高赖氨酸蛋白质基因和bar基因导入水稻及转基因植株的检测

作者：王为民; 赵倩; 朱登云; 于静娟; 敖光明 刊期：2004年第04期

构建了1个含高赖氨酸蛋白质基因和bar基因的植物表达载体，用基因枪法将其分别导入籼稻(Oryza sativa ssp．indica)中优早5号幼胚和龙特甫B成熟胚诱导的愈伤组织中，筛选后得到16株可育的再生植株。PCR和Southern blot检测结果表明，外源基因已整合到水稻的基因组中。T1代植株表现出对PPT的抗性。对部分T1代转基因水稻种子进行分析表明，中优早5...

Ac／Ds双元激活标签体系用于建立水稻突变体材料

作者：陈双燕; 吴运荣; 吴平 刊期：2004年第04期

将含有两个35S启动子和4个串联重复的35S增强子的Ac／Ds双元转座子标签载体转入水稻(O／yza sativa L．)基因组。100个转化植株的分析结果表明，Ds在T0植株的体细胞中切离频率高达60％。20个T1株系的600个T1植株的PCR分析结果表明，14个株系(70％)表现出较高的切离频率(约43％～100％)。Southem杂交发现在同一T1株系的不同植株中Ds转座既有相同...

编码日本梨树（Pyrus pyrifolia）花粉类β-1，3-葡聚糖酶蛋白的cDNA克隆与核苷酸序列

作者：周跃钢; NaokoNorioka; 李绍良; ShigemiNorioka 刊期：2004年第04期

构建了日本梨树(Pyrus pyrifolia)花粉cDNA文库，发现了一个编码花粉管分泌的类β-1，3-葡聚糖酶蛋白(BGN-1)的cDNA(bgm-I)许测定了其序列：bgn-I由1408bp组成，包括47bp的5’-非翻译区，由1194bp组成并编码了397个氨基酸的ORF和167bp的3’-非翻译区。3’-非翻译区含有1个NLTE(AATTAA)和3个似FUE的基序，分别位于1369～1374(AAT—TAA)、1320～132...

棉花DNA遗传转化系的农艺性状变异和SSR标记分析

作者：杜雄明; 潘兆娥; 孙君灵; 周忠丽; 庞保印 刊期：2004年第04期

利用花粉管通道技术，将海岛棉(Gossypium barbadense)DNA导入陆地棉(G.hisutum)栽培品种豫棉17号中，获得了HB1、HB2、HB3和HB44个遗传转化系，其纤维品质、衣分、铃重与供体和受体相比有显著的差异。通过145对SSR引物的筛选和鉴定，检测出4对引物的多态性。BNL786、BNL2449等SSR引物在子代变异系HB1～HB4的扩增产物的带型明显不同于其受体，表...

柿和君迁子SSR分析技术的建立

作者：郭大龙; 罗正荣 刊期：2004年第04期

通过搜寻核酸数据库中柿属植物核苷酸序列，利用Sputnik程序查找微卫星，利用Primer Premier5．0软件设计特异微卫星引物，并对影响PCR扩增的Mg^2+．dNTPs、Taq DNA聚合酶、引物浓度，以及退火温度等因素进行优化。最终确定柿(Diospyros kaki)和君迁子(D．lotus)SSR-PCR最佳反应体系为：模板DNA30ng，Buffer 1×，Mg^2+2．5mmol／L，dNTPs 0．2mm...

低温预处理和高温饥饿胁迫对冬小麦小孢子胚胎发生和植株再生的影响

作者：王宏芝; 杨成民; 魏建华; 杨凤萍 刊期：2004年第04期

以几种不同基因型的冬小麦(Triticum aestivum)为材料，研究了低温预处理(单核早期的离体麦穗，4℃，处理3周)和高温饥饿胁迫(上述处理过的麦穗的花药，置于饥饿培养基B中，33℃处理4d)对几种冬小麦基因型小孢子胚胎发生和植株再生的影响。结果表明：高温饥饿处理后，供试6种基因型都得到了诱导胚，其中F1-2获得的胚最多，为107．2／穗；低温预...

利用Cre／loxp定位重组系统构建雄性不育基因和恢复基因表达载体

作者：宋洪元; 曹必好; 丁建刚; 雷建军; 宋明 刊期：2004年第04期

结合Cre/lox定位重组系统和杂种一代的育种特点，构建了反义肌动蛋白雄性不育基因表达载体pCABARTAAct和相应的恢复基因表达载体pBINPLUSCre。将位于质粒pSTAAct中的反义肌动蛋白雄性不育基因表达盒(含TA29启动子、反向插入TA29启动子下游的Actin基因及Nos终止子)切下插入中间克隆载体pGloxp两个同向lox位点之间，再将上述表达盒连同lox位点切下...

电脉冲激活对体外成熟猪卵母细胞卵裂率和囊胚率的影响

作者：田见晖; 刘国世; 曾申明; 朱士恩; 蔡元; 刘焕营; 张忠诚; 吴常信 刊期：2004年第04期

兔出血症病毒NJ85株衣壳蛋白基因在原核系统中的高效表达

作者：王永山; 陆承平; 周宗安 刊期：2004年第04期

从兔出血症病毒(Rabbit hemorrhagic disease virus，RHDV)中国早期流行株NJ85中成功地克隆出衣壳蛋白(VP60)基因。序列分析表明该基因长度为1740nt，编码579aa，与已报道的另2个RHDV中国毒株WX84和TP的VP60基因的同源性分别为92．7％和97．2％。构建了NJ85株VP60基因原核表达质粒pET—VP60，用SDS—PAGE分析，重组VP60蛋白的表达量占菌体总蛋白...

运送鹅源新城疫病毒DNA疫苗的减毒沙门氏菌及其免疫原性

作者：潘志明; 焦新安; 张小荣; 张晓明; 黄金林; 万洪全; 刘秀梵 刊期：2004年第04期

体外消化过程中低分子量寡肽释放量与饲料品质的关系

作者：王丽娟; 马秋刚; 计成 刊期：2004年第04期

应用胃蛋白酶．胰蛋白酶，模拟鸡胃肠道消化环境，对4种饲料(鱼粉、豆粕、棉粕和菜粕)进行体外消化，研究体外消化过程中不同饲料的寡肽释放特点与其氨基酸组成的关系。4种饲料的体外酶水解产物分别经过截留分子量为3kD和1kD的中空纤维超滤组件处理，制备8种低分子量组分。测定各组分中总氨基酸(TAA)和游离氨基酸(FAA)含量，RP-HPLC法分析各组分...

FAS和HSL mRNA在猪背最长肌的表达及其与肌内脂肪含量的关系

作者：陈杰; 杨晓静; 佟辉; 赵茹茜 刊期：2004年第04期

鸡γ干扰素对H5亚型禽流感疫苗的免疫增强作用

作者：贾立军; 刘秀梵; 张艳梅; 彭大新; 张如宽 刊期：2004年第04期

利用表达鸡γ干扰素的重组鸡痘病毒(rFPV-IFN-γ)与表达H5亚型禽流感病毒血凝素基因的重组鸡痘病毒(rFPV-HA)或灭活疫苗联合应用，接种SPE鸡、无母源抗体商品鸡和含有母源抗体商品鸡，研究鸡γ干扰素的免疫增强作用。结果发现，rFPV-IFN-γ和rFPV-HA联合应用诱导的HI抗体应答水平同rFPV-HA单独免疫相近；rFPV-IFN-γ和灭活疫苗联合应用后HI抗体应答水...