作者:张庆彬; 黄宗庆; 路建光; 赵文杰; 冯军 期刊:《中国医药工业》 2020年第01期
本研究采用pET28a载体对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)中的转肽酶A(sortase A,SrtA)截短体SrtA?N25以及突变体m5SrtA?N59、m9SrtA?N59进行了原核发酵表达,并通过镍柱亲和色谱、阳离子交换色谱进行蛋白纯化。随后,通过荧光共振能量转移试验比较了3种酶的催化活性,测定了酶反应动力学常数、筛选了最适反应条件,并进一步探究了不同生化试剂对SrtA酶学活性的影响。结果显示,SrtA?N25、m5SrtA?N59、m9SrtA?N59在大肠埃希菌中均...
作者:蒋黎艳; 罗思玲; 周旭; 蒋琼凤; 邓胜国 期刊:《果树学报》 2020年第01期
近年来,荔枝多酚因其具有抗氧化、抗癌、抗炎、抗真菌、抗糖尿病等药理和生物学作用而受到人们的广泛关注。目前国内外对荔枝多酚的研究主要是从荔枝多酚的资源鉴定、其主要功能活性以及特定的提取分离技术方面进行展开,尚未出现全面概述荔枝多酚的分类、提取和纯化方法的研究。笔者从黄酮类、酚酸类、单宁类以及木脂素类四方面综述荔枝多酚的分类情况,重点阐述荔枝多酚提取纯化技术的最新研究进展,同时针对多种方法的优点以及不足...
作者:张家源; 陈舜胜; 张洪才 期刊:《食品与机械》 2020年第01期
采用葡聚糖凝胶(Sephadex G-50)层析和羧甲基琼脂糖凝胶FF(CM Sepharose Fast Flow)离子交换层析对暗纹东方鲀鱼精蛋白进行纯化,利用精氨酸显色反应鉴定鱼精蛋白,并测定了鱼精蛋白对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和沙门氏菌的最小抑菌浓度、抑菌圈直径和生长曲线的影响。结果表明,暗纹东方鲀鱼精蛋白在217,273nm处各有1个吸收峰且217nm处的吸收峰较高,经SDS-PAGE电泳发现纯化后的鱼精蛋白白条带较纯化前的细且无拖尾现象;暗纹东方鲀鱼...
作者:叶明富; 王苗苗; 夏国威; 胡先运; 宋丰发; 许立信 期刊:《佳木斯大学学报》 2020年第01期
以二氯二乙醚为起始原料,先与邻苯二甲酰亚胺钾在N,N-二甲基甲酰胺溶剂中加热反应生成2,2’-二邻苯二甲酰亚胺基二乙醚,将其纯化后与水合肼在乙醇溶剂中加热回流反应合成粗品2’-氧基二乙胺,通过与盐酸反应生成产物盐酸盐进行纯化,再与氢氧化钠溶液反应,使用异丙醇萃取成功得到高纯度2’-氧基二乙胺,其结构经~1HNMR,LC-MS表征。优化实验得出中间体合成反应的最佳溶剂为N,N-二甲基甲酰胺(DMF),最优反应时间应不低于12 h,异丙醇对2’...
作者:张梦颖; 郭瑞敏; 孙燕妮 期刊:《海南医学》 2020年第02期
目的从新生SD大鼠体内分离提取肺泡Ⅱ型上皮细胞,为肺部相关疾病提供体外模型方法胰蛋白酶、胶原酶Ⅰ消化分离细胞,差速贴壁法和大鼠IgG免疫黏附法纯化。采用倒置显微镜、透射电镜、共聚焦显微镜以及BCIP/NBT碱性磷酸试剂盒对细胞进行观察和鉴定。结果采取胰蛋白酶、胶原酶消化得到细胞,活力为(94.82±1.64)%,纯度为(95.96±0.90)%。倒置显微镜观察细胞内呈立方形,岛状生长,胞浆内有黑色颗粒;透射电镜下观察到特异性板层小体;共聚焦...
作者:陈立功; 张庆芳; 迟乃玉; 王晓辉 期刊:《微生物学报》 2020年第01期
【目的】通过构建假交替单胞菌(Pseudoalteromonassp.DL-6)低温几丁质酶(chitinaseA,chi A;chitinase C,chi C)的重组乳酸克鲁维酵母菌株、纯化重组蛋白并对其进行酶学性质表征,为低温几丁质酶潜在工业化生产几丁寡糖奠定理论基础。【方法】人工合成密码子优化的几丁质酶基因,构建重组乳酸克鲁维酵母表达质粒(p KLAC1-chi A、p KLAC1-chi C)并用电脉冲法转化到乳酸克鲁维酵母中,实现低温几丁质酶的可溶表达。利用镍柱亲和层析纯化...
作者:令利军; 张玺; 郑生岳; 史苗霞; 冯娟娟; 焦正龙; 李子彬 期刊:《生物学通报》 2019年第02期
哈密瓜内生菌分离和纯化周期短,通常为15-20d左右,即可分离出菌种,因此适合作为教学实验内容。为了解哈密瓜的内生菌生物多样性,采用菌悬液涂布法,从冷藏健康哈密瓜的深层、浅层和皮层分离内生菌,并进行分离和统计,经纯化后得到8株内生菌,其中来自哈密瓜皮层的菌株4株,占总菌株数的50%;浅层的有2株,占总菌株数的25%;深层的有2株,占总菌株数的25%。将哈密瓜内生菌的分离与纯化作为中职学校生物技术实验的内容,不仅增进了学生的感性...
作者:马会放; 荆林海 期刊:《生物学通报》 2016年第12期
教材中“探究培养液中酵母菌种群数量的变化”实验计数环节耗时长,操作难度大,全班学生均参与较为困难。改进后的实验方案解决了计数耗时长的问题,且全班学生都能参与构建数学模型的过程。
通过研究双水相萃取系统的各种影响因素:乙醇/(NH4)2SO4的组成比例、pH值、无机盐的加入、粗酶的浓度等,探索以乙醇/(NH4)2SO4组成的双水相萃取体系纯化尿激酶的最佳条件。建立以乙醇/(NH4)2SO4组成的双水相萃取体系分离纯化尿激酶的新途径。结果表明:双水相萃取系统冰乙醇浓度为65%,(NH4)2SO4浓度为10.0%,pH8.0,酶加入量为30%,且不加入任何其他无机盐的条件下,尿激酶的纯化倍数可达到9.2倍,回收率最高...
作者:王晋岳; 刘芳 期刊:《公民与法》 2012年第07期
在我国目前刑法理论和实务当中,刑事责任有三种不同的理解:犯罪行为的不利后果;作为犯罪与刑事制裁措施之中间媒介的应受谴责性;作为犯罪成立前提条件的主观可谴责性。这种理解多元化的现状并没有正向的积极作用,反而带来了反效用。基于从"责任"到"法律责任"再到"刑事责任"这一语言逻辑关系分析路径,应当实现对多元化刑事责任理解的纯化,把刑事责任的意涵限定在"犯罪行为的不利后果"的范围之内。
作者:魏渝伟; 王玉峰; 郭岩峰; 吕志强; 黄少飞 期刊:《气体分离》 2016年第06期
本文介绍了JLOX-300型分子筛卓越的低浓度CO2净化性能及最新研究成果,以及JLOX-300型分子筛在深冷空分系统中的应用实例,从理论和实践共同阐述了JLOX-300型分子筛的巨大性能优势。最后展望了JLOX-300型沸石分子筛的开发制备方向,及其在深冷空分系统中的应用前景。
作者:尹凤琴; 祝艳华; 张忠; 郑红星; 贾志江; 祁姗姗 期刊:《中国牛业科学》 2014年第02期
[目的]为了解天祝白牦牛肠道中是否存在有益菌——枯草芽孢杆茵。[方法]从外表健康的待宰白牦牛直肠中无菌采集粪便,在实验室条件下选用不同的培养基对白牦牛肠道内的细菌进行分离纯化,并挑取可疑的单个茵落进行涂片染色和生化反应试验,根据茵落、菌体特征及生化反应。[结果]表明:白牦牛肠道内存在枯草芽孢杆菌。之后将此茵按不同剂量分别给小鼠腹腔注射,通过对小鼠的临床症状及各器官解剖病理变化的观察。[结论]确定从白牦牛...
作者:周娜磊; 李玥; 高媛; 陈永春; 姚敏 期刊:《生物资源》 2009年第02期
根据过氧化氢酶的催化特性,采用盐析,透析,离心等技术,从大鼠肝脏中分离纯化过氧化氢酶,提纯倍数达到26倍,酶活性回收率为57%。为一般实验室分离纯化大鼠过氧化氢酶提供了一种有效的方法。酶学性质研究表明,该酶最适温度为37℃,最适pH值为7.5,在此条件下,以过氧化氢为底物的Km值为56mmol·L^-1。
作者:金妙仁; 王水英; 朱海良; 陈波 期刊:《生物资源》 2005年第02期
利用双酶酶解工艺制备了中华鳖体内的多糖物质,以乙醇沉淀纯化了鳖多糖.鳖多糖为灰白色粉未状,易溶于水,不溶于丙酮等有机试剂,其中多糖质量分数为82.12%,它的蛋白、硫酸根及已糖醛酸质量分数分别是3.20%、2.16%、10.36%.
作者:景洪江; 薛长勇 期刊:《生物资源》 2005年第03期
对酸奶中的肽类物质进行了提取、纯化和初步分析,认为该肽类成分是一种糖肽复合物.
作者:邓静; 吴华昌; 赵树进 期刊:《生物资源》 2004年第01期
阐述了双水相技术在酶分离纯化中的应用。分析了影响双水相技术分离纯化酶的各种因素,并探讨了双水相技术在酶分离纯化应用中的发展方向。
葛根素是葛根的主要活性成分,因其对许多疾病有良好的治疗作用而日益受到广泛的关注.本文主要论述了从葛根中提取纯化葛根素的工艺方法.
作者:雷湘; 陈刚; 陈科力 期刊:《生物资源》 2010年第01期
目的:为虎杖中大黄素的提取纯化工艺提供实验依据。方法:以乙醇浓度、乙醇用量、提取时间、提取次数等条件为因素,分别设计了三个水平,对大黄素的提取工艺进行正交试验。结果:大黄素的最佳提取工艺为虎杖药材加85%的乙醇回流提取3次,每次8倍量的溶剂提取1.5h。结论:应用该提取工艺得到的大黄素的质量分数不低于10%
用PCR扩增出绿色荧光蛋白(GFP)基因,插入到pGEX-KG表达载体中,并将构建出的重组质粒命名为pKG-GFP. 将重组载体导入大肠杆菌DH10β中,经IPTG诱导产生GST-GFP融合蛋白,同时以可溶蛋白和包涵体两种形式存在.GST-GFP分子量大约为53kDa,与其理论值大小一致,用亲和层析以及凝血酶处理纯化GFP.纯化的产物经证实具有很好的均一性.以GFP免疫新西兰家兔,制备多克隆抗体,Western blotting测定抗血清效价.
作者:樊小英; 朱越雄; 孙海一; 曹广力 期刊:《生物资源》 2011年第01期
以野生糙皮侧耳子实体为材料,用水浸法及乙醇沉淀法提取多糖;用过氧化氢、重蒸酚、不同含量的活性碳进行脱色;然后用氢氧化锌法、三氯醋酸法、sevag法、胰蛋白酶与sevag法相结合的方法进行脱蛋白;再通过透析和柱层析作进一步分离纯化;最后以纸层析法进行组成糖分析。结果表明:野生糙皮侧耳的水溶性多糖以1.5%活性碳脱色效果最佳,胰蛋白酶与sevag法相结合可获得较好的脱蛋白效果;DEAE-纤维素柱层析结果显示粗多糖含两种多糖组分;纸...