中国生物化学与分子生物学报杂志 北大期刊 CSCD期刊 统计源期刊

重组水蛭素相关肽Hi-lys的表达与纯化

作者：吴洁; 胡卓逸; 刘景晶 刊期：2005年第03期

为开发一种新的有临床应用价值的抗血栓药物,根据水蛭素保持抗凝活性的20肽片段,设计并构建了水蛭素相关肽(Hi-lys)与天冬酰胺酶C端的融合表达系统.为方便目的肽与融合伙伴的分离,增加了富含带电序列的8肽(KRKRKKSR)及酸敏感的天冬氨酰-脯氨酸(Asp-Pro)位点,获得了表达质粒pED-P8-Hi-lys.将其转化E.coli BL-21,玉米浆培养基(kanr)培养,乳糖诱导...

一种新型丝氨酸苏氨酸激酶CPK的初步克隆及功能

作者：汪思应; 陈兵; 许望翔; 詹轶群; 崔玉芳; 李长燕; 杨晓明 刊期：2005年第03期

从人胎肝cDNA文库中分离到一种cDNA,推测的蛋白氨基酸序列具有明显的丝氨酸苏氨酸激酶结构域,可能编码一种新的丝氨酸苏氨酸激酶(命名为CPK,cell prolliferation association kinase).CPK mRNA全长约3.0kb.RT-PCR检测表明CPK mRNA在增殖活跃组织或细胞如人胚胎组织、肿瘤细胞株中呈高丰度表达,在成人组织则呈低丰度或不表达.利用PCR技术扩增大鼠...

翻译起始区二级结构对荧光素酶基因在COS-7细胞中表达效率的影响

作者：孙奋勇; 潘秋辉; 洪岸 刊期：2005年第03期

在荧光素酶基因起始密码子ATG下游插入4种串连重复的密码子(6×ATT,3×ATT,6×GCC与3×GCC),得到具有不同二级结构的翻译起始区(translation initiation region,TIR),以研究TIR二级结构对该基因在COS-7细胞中表达的影响.Northern印迹结果显示,4种重组子mRNA的转录水平没有显著差异,而Western印迹与酶活性检测表明,与野生型结构相比,6×ATT与3×ATT能显...

人肿瘤抑素（Tumstatin）在E．coli中的克隆、表达及活性分析

作者：罗以勤; 王梁华; 球谊; 焦炳华 刊期：2005年第03期

从人胚肾293细胞中扩增肿瘤抑素(tumstatin)基因,进行原核表达,纯化和生物活性检测.利用原核表达载体pMAL-c2在大肠杆菌BL21中表达肿瘤抑素,经Amylose Resin亲和层析柱和QSepharose Fast Flow柱纯化,通过体外内皮细胞增殖、内皮细胞凋亡和鸡尿囊绒膜新生血管生成试验检测其抑制活性.MBP/tumstatin在BL21中表达率约20%,肿瘤抑素纯度可达95%.肿瘤...

人CNTF突变体（CNTFM）基因的克隆、表达和产物纯化及活性鉴定

作者：李鸿钧; 马雁冰; 张鸣; 张林虹; 张光明; 戴长柏; 孙茂盛 刊期：2005年第03期

采用PCR的方法对睫状神经营养因子(CNTF)基因进行改造,获得CNTF突变体基因(CNTFM),将CNTFM基因克隆入表达载体pBV220,在大肠杆菌BL-21(Gold)中进行了表达.目的蛋白占细胞总蛋白55%左右,以包涵体形式存在,经Superdex-75凝胶过滤柱一步纯化和复性,获得纯度达90%目的蛋白.纯化的重组CNTFM蛋白能促进培养的鸡胚背根神经节长出神经突起,能明显减轻实...

p38MAPK介导的胶质细胞iNOS的转录激活机制

作者：沈勤; 张然; 吴扬; 施建华 刊期：2005年第03期

丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)酶级联反应系统参与胶质细胞中iNOS的合成.通过瞬时转染p38MAPK途径中上游激酶,MAPK激酶3(MKK3)和MAPK激酶6(MKK6)表达质粒,进一步了解p38MAPK级联传导信号系统调节iNOS基因在胶质细胞中的转录激活机制.MKK3或MKK6表达质粒与接有荧光素酶(luciferase,Luc)的大鼠iNOS启动基因质粒(iNOS-Luc)联合转染C6星形胶质细胞株引起...

《现代分子生物学进展讲习班》通知

刊期：2005年第03期

肿瘤抑素抗肿瘤相关肽的克隆及生物活性

作者：王淑静; 刘岩; 林雪松; 付雪; 徐建永; 刘兴汉 刊期：2005年第03期

为得到肿瘤抑素中具有直接抗肿瘤活性肽并检测其生物学活性,人工合成肿瘤抑素中185～203位氨基酸(19肽)所对应的核苷酸序列,将其连接到融合蛋白表达载体pTYB2中,酶切和测序鉴定后,转化到大肠杆菌BL-21(DE3)中诱导表达.表达的融合蛋白经几丁质亲和层析、二硫苏糖醇(DTT)的柱内还原,直接获得可溶性19肽.利用MTT法,细胞生长曲线,小鼠H22腹水型转移...

第五届金属硫蛋白（Metallothionein，MT）国际会议将于2005年10月8～12日在北京召开

刊期：2005年第03期

ω-6脂肪酸脱氢酶基因在乳腺癌细胞内的表达和作用

作者：葛银林; 耿芳宋; 张金玉; 张峥; 李馨; 田润华; 徐文华 刊期：2005年第03期

为探讨ω-6脂肪酸脱氢酶基因fat-1在人类乳腺癌细胞MCF-7中表达和对其生长的作用,将fat-1基因插入到腺病毒载体中,构建腺病毒重组载体(Ad·GFP·fat1).通过包装细胞系(293)产生重组腺病毒,感染MCF-7细胞.用核糖核酸酶保护性分析技术,检测fat-1基因在MCF-7细胞内的表达,细胞增殖试剂盒(MTT)和凋亡染色试剂盒染色分析fat-1基因对MCF-7细胞增殖和凋亡...

棉纤维蔗糖合酶基因SS3上游调控序列的克隆及其表达分析

作者：罗小英; 肖月华; 李德谋; 罗明; 侯磊; 李先碧; 杨霞; 裴炎 刊期：2005年第03期

棉纤维蔗糖合酶基因SS3在棉纤维发育过程中起着重要作用.采用YADE技术克隆了该基因5'上游1717 bp的调控区,该调控区含有典型的启动子核心元件TATA-box,以及TATC-box、G-box、GCN4_motif、Prolamin-box、Skn-1-like motif、TCA-element、HSE和O2-site等各种顺式调控元件和其他一些反应元件.将此序列和报告基因GUS融合在烟草、棉花中表达.组织化学...

HSF1中的半胱氨酸残基氧化还原状态对其功能的调节

作者：林正; 黄帆; 罗兰; 张式鸿; 马中富; 吴兴刚; 徐康 刊期：2005年第03期

人热休克转录因子1(heat shock transcription factor l,HSF1)的结构和功能与其半胱氨酸残基的氧化还原化学性能相关.为了鉴别在氧化还原状态改变时参与分子内双硫键交联的HSF1半胱氨酸残基,了解其氧化还原化学性改变在生物学调节中的重要性,通过建立和应用重组人HSF1中的5个半胱氨酸突变体和1个双重突变体,并用已知的巯基氧化介导剂联氨(diamid...

肝细胞生成素——一种非经典分泌蛋白

作者：刘刚; 王清明; 陈吉中; 范国才; 陈惠鹏 刊期：2005年第03期

肝细胞生成素(hepatopoietin,HPO)是一种分泌蛋白.为了研究肝细胞生成素的分泌途径,利用Signal P软件分析了HPO的氨基酸序列,但HPO序列中没有经典分泌蛋白的信号肽.Western印迹实验证明,HPO能以双体形式从细胞中分泌出来.特异性体外阻断实验表明,布雷菲尔德菌素A(brefeldin A)和莫能菌素(monensin)都不能阻断HPO的分泌,说明HPO并不通过经典的内...

从噬菌体表面展示肽库中筛选葡萄球菌B型肠毒素抑制剂

作者：李韩平; 郑玉玲; 邓小红; 马茹; 姜永强 刊期：2005年第03期

通过生物淘选,从噬菌体表面展示12肽肽库中筛选能与葡萄球菌B型肠毒素(staphylococcal enterotoxin B,SEB)结合且能抑制其肠毒活性的特异性短肽.采用Phage-ELISA和MTT鉴定所得目的肽的亲和性;根据优势噬菌体阳性克隆序列合成相应多肽.利用竞争ELISA研究合成肽与SEB单克隆抗体竞争结合SEB的情况;通过动物实验考察其抑制SEB的超抗原特性和肠毒活性...

第4期《医学分子生物学技术研修班》通知

刊期：2005年第03期