中国生物化学与分子生物学报杂志 北大期刊 CSCD期刊 统计源期刊

快速发展的亚细胞蛋白质组学

作者：郭立海; 姜颖; 贺福初 刊期：2005年第02期

亚细胞蛋白质组是蛋白质组学领域中的一支新生力量,已成为蛋白质组学新的主流方向,通过多种策略和技术方法,一些重要的亚细胞结构的蛋白质组不断的得到分析,到目前为止,几乎所有亚细胞结构的蛋白质组学研究都有报道,而且已经深入到亚细胞器和复合体水平;另外,不仅局限于对亚细胞结构的蛋白组成进行简单分析,而且更注重功能性分析,将定量技术和差...

一种新发现的基因表达调控机制——核糖开关

作者：赵谨; 杨克恭; 张学 刊期：2005年第02期

最近发现,某些依赖代谢物调节的基因转录产物的5'UTR存在特征性结构--核糖开关(riboswitch).核糖开关可以特异性结合代谢物,通过构象变化,在转录或翻译水平上调节基因表达.核糖开关广泛存在于G+及G-细菌的代谢相关基因中,在真菌、植物中也有发现.核糖开关调节维生素、氨基酸、核苷酸等基础代谢过程,其调节基因表达不需要任何蛋白因子作为中介,在...

防卫基因PAL，LOX和PBZ1在水稻白叶枯病成株抗性中的作用

作者：沙爱华; 林兴华; 黄俊斌; 张端品 刊期：2005年第02期

为了探讨水稻白叶枯病成株抗性是否与防卫基因相关,通过RT-PCR研究了几种防卫基因PAL、LOX、PBZ1、Cht-1和PR1a的表达,同时也分析了PAL和LOX的酶活性变化.结果表明,苗期PAL受病原菌诱导上调表达,而成株期病原菌和伤害均可诱导PAL上调表达,且成株期诱导表达强于苗期.LOX在苗期和成株期都可受病原菌诱导表达,但成株期表达强于苗期且更持久.PBZ1在...

人类新基因ACBP5 cDNA的克隆及其同源物在小鼠／鸡胚发育过程中的表达

作者：王峦; 薛鹏; 程睿; 付佳琪; 陈微; 慈宏亮; 李亦平 刊期：2005年第02期

利用电子克隆的方法寻找具有重要结构域的人类新基因ACBP5,根据得到的序列信息用RT-PCR的方法获得全长基因.通过生物信息学方法预测其结构,采用整体原位杂交和组织RT-PCR的实验方法,在小鼠和鸡胚胎实验模型中研究该基因在发育过程中的表达情况,并对其功能进行初步的预测,获得一个含有乙酰辅酶A结合蛋白(acyl-CoA binding protein,ACBP)结构域的...

著名生物化学家蔡良琬教授逝世

刊期：2005年第02期

著名生物化学家，中国医学科学院基础医学研究所、中国协和医科大学基础医学研究院教授蔡良琬因病医治无效，于2004年12月28日在北京逝世，享年83岁．

植酸酶基因中稀有密码子的改造提高其在毕赤酵母中的表达量

作者：陈惠; 赵海霞; 王红宁; 杨婉身; 吴琦; 倪燕 刊期：2005年第02期

对来源于黑曲霉N25(Aspergillus niger China Strain)的植酸酶基因phyA进行PCR介导的定点突变,不改变其所编码氨基酸,选用毕赤酵母偏爱的密码子对该基因保守序列中第81位和第85位的Arg密码子进行同义突变.构建了含正确突变的克隆载体pUC18-phyAm和酵母表达载体pPIC9kphyAm,电击转化毕赤酵母,经MM、MD平板筛选和产物的酶活性测定,筛选出突变与未...

小花棘豆（Oxytripis glabra DC）毒素基因的cDNA克隆及序列测定

作者：张桦; 王希东; 石庆华; 张强; 许健; 喻梅辉 刊期：2005年第02期

在完成小花棘豆毒素95%氨基酸序列的基础上,根椐已知的氨基酸序列,设计合成了特异简并引物.以小花棘豆总RNA为模板,逆转录合成cDNA第一链,用置换法合成双链cDNA.用特异引物对此双链cDNA进行PCR扩增,将扩增后的目的基因与用SmaⅠ酶切的质粒pUC 18连接,转化大肠杆菌JM107.筛选阳性克隆进行序列分析,获得了OXY基因的全部序列.经测序后测得基因序列...

应用酵母双杂交系统筛选新基因Collectrin相关蛋白

作者：张宏; 张艳玲; 梁秀彬; 侯平; 王海燕 刊期：2005年第02期

Collectrin是在小鼠5/6肾切除后,在肾小球的高滤过、高增生期分离克隆的一个新基因.通过酵母双杂交系统从人肾脏cDNA文库中筛选与collectrin相互作用的蛋白,可以为该基因的功能研究提供线索.构建collectrin的真核表达载体collectrin-pGBKT7/c-myc,转化酵母菌AH109.Western印迹证实,collectrin蛋白能够在酵母中正常表达,对酵母细胞无毒性,不存在...

胸苷激酶基因在人二倍体成纤维细胞衰老过程中的表达调控

作者：张凌凌; 张婷婷; 毛泽斌 刊期：2005年第02期

为研究人胸苷激酶(human thymidine kinase,hTK)基因在复制衰老细胞及早衰细胞中表达下调的分子机制,构建了含hTK启动子的荧光素酶报告基因载体.转染结果显示,复制衰老细胞与早衰细胞中hTK启动子的转录活性比年轻细胞中下降了近3倍,表明转录水平的调控是hTK在衰老细胞中表达下降的主要调控机制.定点突变的结果显示,转录因子Sp1、NF-Y结合位点的...

Hus1（Hus 1f）基因可溶性表达、蛋白纯化及抗体制备

作者：刘爽; 田媛; 胡宝成; 黎舒佳 刊期：2005年第02期

为进一步了解Hus1蛋白在细胞周期检查点信号传导通路中的功能,用RT-PCR技术从NIH3T3细胞的总RNA中扩增出Hus1基因片段Hus1f(606～846 bp),使其在大肠杆菌中呈可溶性表达.用镍离子螯合柱(Ni-NTA)纯化Hus1f蛋白,获得纯度较高的蛋白.用纯蛋白免疫小鼠制备多克隆抗体.ELISA结果显示效价达到1:6400.Western印迹结果表明,该抗体可以与Hus1蛋白特异结合...

谭琛等论文荣获第二届中国科协期刊优秀学术论文奖

刊期：2005年第02期

hSef基因在不同人组织和细胞系的表达分布

作者：黄冠榕; 熊世勤; 赵秋辉; 王银银; 任芳丽; 叶雄俊; 常智杰 刊期：2005年第02期

将人源Sef蛋白胞内区编码序列与GST融合构建原核表达质粒进行重组蛋白的表达与纯化并制备多抗.在COS-7细胞中转染表达hSef显示,其分子量分别为80 kD,100kD,比体外翻译的分子量偏大,提示可能有糖基化存在.Northern印迹的结果表明,hSef mRNA主要分布在人肾和睾丸组织.RT-PCR检测到hSef mRNA在众多细胞系有广泛存在.免疫组化的结果显示,hSef蛋白在...

人源孤儿G蛋白偶联受体hGPCRc的分子克隆及其初步鉴定

作者：袁广胜; 余少平; 潘光堂; 刘永学 刊期：2005年第02期

孤儿G蛋白偶联受体(orphan G protein-coupled receptors,oGPCRs)是最重要的潜在药物靶点,对于创新药物研究意义重大.根据已有文献及相关基因数据库提供的信息,利用RT-PCR从人结肠组织获得oGPCR某一成员的氨基酸编码序列,大小为1014 bp,而且与GenBank已登录序列(AB083598)完全一致,称之为hGPCRc;又用相同的引物以健康志愿者血液基因组DNA作为模...

丙型肝炎病毒NS3蛋白酶在酵母系统中的可溶性表达

作者：胡巍; 凌世淦; 宋晓国; 刘文; 何竞; 朱翠侠; 陈坤 刊期：2005年第02期

利用毕赤酵母系统表达具有催化活性的丙型肝炎病毒(HCV)NS3蛋白酶.将PCR直接扩增的病毒NS3丝氨酸蛋白酶基因和重组的带有辅酶的单链NS3/NS4A蛋白酶基因,分别插入表达载体pPICZαA的EcoRⅠ和XbaⅠ克隆位点,转化毕赤酵母GS115,可溶性表达NS3蛋白酶和单链NS3/4A蛋白酶;ELISA法测定表达蛋白酶的抗原性;原核高效表达载体pBVIL1表达酶切底物NS5A-B片段,...

垃圾基因对卵和早期胚胎发育的影响

作者：李潇 刊期：2005年第02期

哺乳动物的基因组很可能有充分理由来坚持大量收集科学家称谓的垃圾基因．根据2004年10月的Developmental Cell上一篇报道，在这些垃圾基因中有某些可以调控卵子及早期胚胎的基因表达．哺乳类基因组中总共约有1／3是由长的、重复的DNA序列组成的，其称为逆转录转座子．研究者假定逆转录转座子是由病毒衍生而来的，这些病毒在动物进化的早期感染...