医学争鸣杂志 部级期刊

结核分枝杆菌esat6-cfp10融合基因疫苗的构建及表达

作者：张海; 师长宏; 薛莹; 姜泓; 高雪; 柏银兰; 王丽梅; 徐志凯 刊期：2005年第03期

目的:构建结核分枝杆菌esat6-cfp10融合基因疫苗并对其在体外进行表达. 方法:用PCR技术从MTB毒株H37Rv基因组DNA中扩增cfp10基因,以HindⅢ和EcoRⅠ双酶切后克隆入含esat6基因的pGEM-7zf(+)载体中,将测序正确的esat6-cfp10融合基因按照BamHⅠ和EcoRⅠ酶切位点亚克隆入真核表达载体pcDNA3.1(+),重组质粒酶切鉴定正确后以脂质体转染CHO细胞,分别以R...

人骨形成蛋白4成熟肽cDNA的克隆及其在大肠杆菌中的表达

作者：秦云; 陈苏民; 关路媛; 陈南春; 张立藩 刊期：2005年第03期

目的:克隆编码人骨形成蛋白4(hBMP4)成熟肽的cDNA基因,并在大肠杆菌中表达. 方法:从人胎盘组织中提取总RNA,以其为模板,采用RT-PCR方法得到编码hBMP4的成熟肽段(hBMP4m) cDNA,克隆入表达载体pDH2中,转化大肠杆菌DH5α,温度诱导表达. 结果:获得hBMP4m cDNA基因,成功克隆入温度诱导表达载体pDH2,DNA序列分析证实所插入的hBMP4m cDNA序列与设计预期...

HMGB1 B盒编码序列的克隆和大肠杆菌表达

作者：姜南艳; 于文彬; 苏明权; 李斌; 郝晓柯; 李立文 刊期：2005年第03期

目的:克隆小鼠高迁移率族蛋白1(high mobility group box 1,HMGB1)B盒编码序列并在大肠杆菌中表达GST-B盒融合蛋白. 方法:从新生小鼠肺组织提取总RNA,经RT-PCR获得HMGB1 B盒编码序列. 将酶切后PCR产物克隆到pGEX-4T-2载体的BamHI和EcoRI位点之间,经双酶切鉴定后测序证实. 用pGEX-4T-2-B转化BL21(DE3)感受态细胞,在30℃经IPTG诱导表达5 h后进行SD...

凋亡诱导配体TRAIL与细胞膜脂筏形成的关系

作者：贾卫; 庄然; 李琦; 曹云新; 刘雪松; 宋朝君; 金伯泉 刊期：2005年第03期

目的:探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)与细胞膜微结构域脂筏的关系.方法:采用间接免疫荧光流式细胞 术,分析K562细胞表面TRAIL分子的表达.用FITC标记的霍乱毒素B亚单位(CTx)对K562细胞的脂筏进行染色;用抗FITC 单克隆抗体(mAb)交联脂筏后,以兔抗TRAIL分子抗体及Cy3标记的羊抗兔抗体进行间接免疫荧光染色,激光共聚焦显微镜 分析TRAIL分...

Osteopontin特异性siRNA真核表达载体的构建及其在GC9811胃癌细胞中沉默效应的鉴定

作者：唐红卫; 潘阳林; 聂勇战; 孟凡平; 谢华红; 王均; 吴开春 刊期：2005年第03期

目的:构建骨桥蛋白(OPN)特异性siRNA(small interfere RNA)真核表达载体,体外观察对OPN基因的沉默作用. 方法:采用基因克隆技术,将合成的特异性OPN RNA干扰寡核苷酸序列插入真核表达载体mU6pro, 构建OPN siRNA真核表达载体. 以脂质体法将mU6pro空载体和2个(mU6pro/OPN-siRNA1和mU6pro/OPN-siRNA2)重组质粒分别导入具有高转移特性的GC9811胃癌细...

SARS冠状病毒核衣壳蛋白的重组表达及其单克隆抗体的制备

作者：王平; 黄庆生; 薛小平; 雷迎峰; 王海涛; 任君萍; 丁天兵; 徐志凯 刊期：2005年第03期

目的:表达SARS冠状病毒核衣壳蛋白(N蛋白),并以表达产物为免疫原制备特异性单克隆抗体(mAb).方法:采用RT PCR方法,从灭活的病毒抗原标本中扩增编码N蛋白的基因.测序确认后,再亚克隆至原核表达载体中.从SDS PAGE凝胶中 回收原核表达产物后免疫BALB/c小鼠,经融合、筛选制备特异性mAb.结果:从标本中扩增出1269bp的DNA,测序结果证实 为N蛋白基因.将...

克隆人膀胱癌UROC28基因及其原核表达

作者：杨力军; 吴元明; 王禾; 袁建林; 刘丽文; 刘淑娟; 邵国兴; 陈苏民 刊期：2005年第03期

目的: 克隆人膀胱癌UROC28基因并在原核细胞中表达. 方法: 用RT-PCR从人膀胱癌患者组织中扩增UROC28基因cDNA,并克隆到载体pUC-19中. 经测序证实后,用HindⅢ/EcoR I双酶切,亚克隆到原核表达载体pGEX-4T-1,并转化E.coli DH5α菌株. 取工程菌,用IPTG诱导表达,对表达产物进行SDS-PAGE鉴定. 结果: ①经RT-PCR、测序和酶切鉴定,成功地克隆了人膀胱癌UR...

宫内节育器取出109例原因分析

作者：崔雅苓; 朱晓云 刊期：2005年第03期

0 引言安置宫内节育器(IUD)是我国目前最为普遍的避孕方法,以其安全有效、方法简便、避孕时间长、不影响生育等特点,被广大孕龄妇女所接受,但有部分妇女因某些情况而取之. 为了能够更好地应用IUD,减少副反应,提高避孕效果和继续使用率,我们对我院109例IUD取出原因进行了分析,报道如下.

人微管蛋白失稳剂Oncoprotein18原核表达载体的构建及表达

作者：姚庆君; 胡大海; 陈璧; 徐明达; 董茂龙; 贾赤宇; 王树森 刊期：2005年第03期

目的: 原核表达人Oncoprotein18 (Op18)蛋白,为制备抗Op18的mAb作准备. 方法: 从人皮肤组织中用RT-PCR扩增Op18 cDNA的全长编码序列,克隆入表达载体pRSET A中,构建Op18的高表达工程菌,并以IPTG诱导表达目的蛋白,通过亲和层析法纯化表达的Op18融合蛋白. 结果: 酶切及测序鉴定证明,获得含有目的基因片段的重组质粒,表达的Op18融合蛋白以可溶性的形...

脂肪肝与血脂、转氨酶关系的调查

作者：黄芳; 刘军; 展淑芹; 王世捷 刊期：2005年第03期

1 对象和方法西安地区某设计院2003年体检者1285例(排除各种肝炎患者及携带者),男性785例,女性500例,年龄20～70岁. 采血前停止饮酒,低脂饮食,空腹12 h以上,采取清晨静脉血3 mL,分离血清,用日本7170全自动生化分析仪和日本第一化学试剂检查AST, ALT, TC和TG. 转氨酶采用速率比浊法,血脂采用氧化酶法,用美国Cicuson公司生产的XP10高档彩色超声诊...

全身亚低温对大鼠全脑缺血再灌注后海马CA1区bcl-2，bax基因表达的影响

作者：王军; 熊利泽; 王警卫; 蔡莉萍; 曹艳; 杜文涛; 常江 刊期：2005年第03期

雌激素对去卵巢大鼠中脑黑质多巴胺神经元的保护作用

作者：田学文; 章翔; 张剑宁 刊期：2005年第03期

不同免疫方案制备抗HAb18G／CD147胞外区多克隆抗血清的比较

作者：张思河; 杨向民; 邢金良; 陈志南 刊期：2005年第03期

目的:制备针对肝癌相关抗原HAb18G/CD147胞外区不同表位的抗血清,比较不同免疫方案的免疫效果.方法:以原核表 达的GST HAb18GEF融合蛋白、重组真核表达质粒pcDNA3/HAb18G及HCC细胞为免疫原,分别采用蛋白常规免疫、DNA肌 肉免疫及pcDNA3/HAb18G HCCbooster(DNA cellbooster)免疫接种BALB/c小鼠.采用间接ELISA和细胞ELISA,同时测定免 疫血清中抗变...

蛋白酶抑制剂乌司他丁对血管内源性活性物质的影响

作者：陈婷婷; 王刚; 高长青 刊期：2005年第03期

双侧股动-静脉体外膜肺氧合对犬电解质和酸碱平衡的影响

作者：王京玉; 耿希刚; 李勇新; 任沪平 刊期：2005年第03期

目的: 探讨无泵驱动体外膜肺氧合(ECMO)转流对犬电解质和酸碱平衡的影响. 方法: 应用家犬为试验动物,观察ECMO转流期间血中K+, Na+, Ca2+及pH值的变化. 结果: ECMO转流过程中血K+, Na+, Ca2+及pH值均有一定的波动,但均在正常范围. 右心房和主动脉血所测参数无显著性差异(P>0.05). 结论:在转流中,电解质及酸碱平衡基本稳定. 但随着ECMO转流时间的...