医学分子生物学杂志 统计源期刊

重组纤溶酶原Kringle 5区基因杆状病毒载体的构建及表达研究

作者：尹桂芝; 李彪; 尤蓓; 陆林; 张一帆; 赵龙; 于金德 刊期：2004年第01期

目的 克隆人源性纤溶酶原Kringle5 (K5)基因，构建K5分泌型杆状病毒载体，并检测其在肌细胞中的表达。方法 引物中加入前胰岛素原信号肽基因序列，PCR产物经Age Ⅰ和Ace Ⅰ双酶切后装入pFB载体中构建为pFBK5，将其转染肌细胞C2C12，经Western印迹检测重组蛋白的表达并用MTT试验进行初步活性鉴定。结果 成功扩增出了K5基因序列，测序正确，转染了...

脱唾液酸糖蛋白受体介导的vp3基因靶向性治疗肝癌的实验研究

作者：孙军; 王宇哲; 屈伸; 彭冬君; 宗义强 刊期：2004年第01期

目的 利用肝细胞表面存在特异的脱唾液酸糖蛋白受体(asialoglycoprotein receptor，ASGPR)探索ASGPR介导的vp3基因肝细胞靶向性治疗肝癌的方法。方法 将携带vp3基因的质粒通过多聚左旋赖氨酸(poly-L-lysine,PLL)与该受体的天然配体脱唾液酸粘蛋白(asialoorosomucoid，Asor)结合，获得Asor-PLL-vp3复合物；通过体外转染、放射性同位素标记检测和...

乳头瘤病毒表位融合蛋白的基因定点诱变

作者：田亚萍; 张培因; 王艳姝; 王燕媚; 许艳; 胡晓平; 吴秀丽; 王丽颖 刊期：2004年第01期

目的 定点诱变热休范蛋白一乳头瘤病毒表位融合蛋白的基因中编码半胱氨酸的密码子，解决下游纯化工作中产生多聚体蛋白的问题。方法 在对蛋白质序列进行计算机表位预测及生物学特性分析的基础上，利用PCR的定点诱变技术，使原始基因序列中编码半胱氨酸的TGC突变为编码甘氨酸的GGC，克隆并表达了该基因编码的蛋白质。结果 经克隆、测序后证实已成...

重构型人caspase-7基因对肿瘤细胞的促凋亡作用

作者：于翠娟; 孟艳玲; 贾林涛; 裘秀春; 王智; 刘湘丽; 王成济; 苏成芝; 杨安钢 刊期：2004年第01期

目的 观察重构型caspase-7的表达对肿瘤细胞的凋亡诱导作用。方法 用反转录PCR方法获取野生型人caspase-7基因，用重组PCR构建了两种重构型caspase-7基因，即大、小亚基序列次序颠倒的revca2spase-7以及N-端带有绿脓杆菌外毒素转膜结构域部分肽段的融合蛋白(PEⅡ-rev-caspase-7)的基因。将两种重构型caspase-7基因克隆入表达载体pIRES2-EGFP，脂...

大鼠肾胆绿素还原酶cDNA克隆、表达及鉴定

作者：吕昌莲; 孙建平; 刘明; 王秀宏; 周虹 刊期：2004年第01期

目的 克隆大鼠。肾胆绿素还原酶(BVR)的cDNA序列后在大肠杆菌中表达、纯化并进行鉴定。方法 采用RT-PCR方法利用设计合成的一对特异性引物从大鼠。肾组织扩增BVR的cDNA序列，构建pMW172a-BVR重组质粒，转化扩增后进行序列测定，证实同GenBank[053850]公布的大鼠。肾BVR的cDNA序列相同后，阳性重组质粒转化到E．coli BL21(DE3)中表达并进行纯化。...

外源性ApoE3对U937细胞摄取VLDL两亚组分的影响

作者：周洁; 冯友梅; 陈娟 刊期：2004年第01期

DMBA诱导的肝脏特异性IGF-1基因缺失鼠原发性乳腺癌的组织学特征

作者：吴毅平; DerekLeRoith; ShoshanaYakar 刊期：2004年第01期

目的 探讨血清中胰岛素样生长因子-1(IGF-1)水平与乳腺肿瘤发生过程中组织学改变的关系。方法 实验中所用的肝脏特异性IGF-1基因缺失(LID)小鼠，其循环中IGF-1水平仅为正常小鼠(对照组小鼠)的25％。管饲化学致癌剂7，12-二甲基苯蒽(DMBA)诱导产生原发性乳腺癌。结果 对照组肿瘤晚期可见广泛的鳞状上皮化生，而LID鼠肿瘤晚期出现广泛增生，极少出...

CSF1PO、TH01和TPOX复合扩增系统的研究

作者：范晶; 熊勇华; 胡娜; 杨辉; 许杨 刊期：2004年第01期

目的 研究CSF1PO、THO1和TPOX复合扩增最佳体系。方法 设计正交实验进行聚合酶链式反应(PCR)，应用聚丙烯酰胺凝胶电泳分离显带技术检测扩增片段。结果 最佳反应体系组成为：10×PCR buffer2．5μ1、0．72mmol／L dNTP、2．5mmol／L MgCl2、2．0 U Taq酶，各基因座引物终浓度(μmol／L)CSFIPO：0．4，THO1：0．4，TPOX：0．6.结论 获得复合扩增条件...

EMBO（欧洲分子生物学会）举办蛋白质组学与分子生物学学习班通知

刊期：2004年第01期

内质网应激

作者：方欢; 申宗候 刊期：2004年第01期

内质网应激(ER stress)是真核细胞的一种保护性应激反应，通过ER stress细胞降低胞内未折叠蛋白的浓度，阻碍未折叠蛋白发生凝集，哺乳动物细胞ER stress过程比原生动物和酵母细胞要复杂，但都具有一些共同的特点。

脆性X智力低下蛋白与mRNAs的相互作用

作者：梁琦; 邹柯; 沈岩 刊期：2004年第01期

脆性X智力低下蛋白(fragile mental retardation protein，FMRP)的表达缺失引起一种遗传性智力低下疾病——脆性X综合征。此蛋白是一种RNA结合蛋白，与mRNAs转运及多聚核糖体和突触的功能有关。因此，要了解脆性X综合征的发病机理，关键在于找到与FMRP蛋白结合的mRNAs，以及FMRP与这些靶mRNAs的结合对它们的代谢和翻译有何影响。

蛋白质组学研究方法学进展

作者：侯彦强; 仲人前; 孔宪涛 刊期：2004年第01期

蛋白质组学是针对蛋白质组研究的一门新兴学科，近年来发展迅速，其相应方法学也取得很大进展。文章介绍了近年来差异表丛蛋白质研究的方法学进眨，包括双向凝胶电泳技术、凝胶内差别电泳、同位素亲和标签技术、蛋白质芯片和蛋白质组的多维液相分离-质谱分析等方法。

泛素-蛋白酶体途径研究进展

作者：尹会男; 柴家科 刊期：2004年第01期

泛素-蛋白酶体途径是一种高效蛋白降解途径，主要负责真核细胞内蛋白的选择性降解。此途径参与体内许多重要的生理功能，包括细胞周期的调控、抗原提呈、转录调控、凋亡等，许多疾病的发生都由于该途径的异常引起，本文对其组成、作用机制及功能与当前的研究进展、未来的研究方向等进行综述。

肠产毒性大肠埃希菌定植因子研究进展

作者：钟贞; 马永平; 邱宗荫; 宋方洲 刊期：2004年第01期

肠产毒性大肠埃希菌定植因子为近几年发现的一种重要的细菌致病菌毛，它能使大肠杆菌粘附于宿主肠粘膜而不被肠蠕动和肠分泌液所清除，再通过其分泌肠毒素导致婴幼儿和旅行者腹泻。菌毛亚单位的保守区域、抗原决定簇组成、定植因子质粒与毒力编码基因的联系，对研制广谱重组菌毛疫苗具有重要指导意义。本文综述了近几年来有关定植因子菌毛的研究...

减毒的沙门氏菌在肿瘤基因治疗中的研究进展

作者：赵丽华; 李妍涵; 韩忠朝 刊期：2004年第01期

减毒的沙门氏菌是一种非病原性细菌，能靶向肿瘤并产生局部抗肿瘤的效应。减毒的沙门氏菌能选择性地在肿瘤组织中复制，表达编码治疗性蛋白的效应基因是肿瘤基因治疗有应用前景的一种途径，这种方式也将成为目前实体瘤放疗、化疗的一种辅助的治疗方法。