摘要：ppk1材基因编码的多聚磷酸盐激酶主要负责多聚磷酸盐的合成，其表达量的高低直接决定聚磷菌的聚P能力的强弱。Pseudomonas putida GM6是从EBPR好氧池活性污泥中分离获得的一株具有聚P能力的菌株，该菌株含有两个编码多聚磷酸盐激酶的基因（ppk1和ppk2）。通过PCR从高效聚磷菌株总DNA中扩增得到了ppk1及其启动子，并定向克隆到pBBRMCS-5载体上，构建了重组质粒pMEPE-PPK，在辅助质粒pRK2013的帮助下，通过三亲接合将pMEPE-PPK转移到原始菌株GM6中，获得的工程菌P.putida GM6-PPK1。GM6-PPK1除P能力较原始菌株GM6和对照菌株GM6-P5提高了54％，生长能力较原始菌株也有一定增强。通过模拟EBPR工艺，发现GM6-PPK1在厌氧／好氧交替的环境条件下强化表达不但提高了菌体好氧段的吸P能力，而且厌氧段P的释放和PHA的合成较之原始菌株也有显著增加。

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