杂志简介：《中国生物工程》杂志经新闻出版总署批准，自1976年创刊，国内刊号为11-4816/Q，是一本综合性较强的生物期刊。该刊是一份月刊，致力于发表生物领域的高质量原创研究成果、综述及快报。主要栏目：研究报告、技术与方法、综述、行业分析、发展战略
杂志简介：《中国生物工程》杂志经新闻出版总署批准，自1976年创刊，国内刊号为11-4816/Q，是一本综合性较强的生物期刊。该刊是一份月刊，致力于发表生物领域的高质量原创研究成果、综述及快报。主要栏目：研究报告、技术与方法、综述、行业分析、发展战略
作者：潘勇昭; 陈虹; 王欣; 马晓骊; 黄秉仁 刊期：2011年第01期
目的：研究重组融合蛋白红细胞生成素AB肽-神经生长因子模拟肽（EpoAB-NGF9和EpoAB-NGF/12）的神经营养作用。方法：构建pET-42a-EpoAB-NGF9/12原核表达质粒,转化大肠杆菌BL21（DE3）,以IPTG诱导表达,亲和层析纯化重组蛋白,显微镜观察PC12细胞诱导分化,流式细胞仪检测凋亡细胞。结果：大肠杆菌表达的重组融合蛋白GST-EpoAB-NGF9/12分子量约为30k...
作者：何琳琳; 兰飞; 薛小平 刊期：2011年第01期
目的：探讨肿瘤坏死因子-α（Tumor Necrosis Factor alpha,TNF-α）对小鼠骨髓间充质干细胞（Bone Marrow-derived Mesenchymal Stem Cells,BM-MSCs）成骨分化的影响。方法：以在促成骨分化培养基（Osteogenic media,OS）中培养的小鼠BM-MSCs作为对照,用含有TNF-α的OS处理小鼠BM-MSCs。第7天进行碱性磷酸酶染色,或培养第21天进行茜素红染色和定量...
作者：孙云霄; 鲁勇; 李祝方; 徐强; 刘晓明; 李泰明; 刘景晶 刊期：2011年第01期
选取了HSP65上对自身免疫性炎症疾病有防治作用的两段功能表位P1（179-190）、P2（31-46）,分别以HSP65和CTB为载体蛋白构建高效表达载体pET28a-HSP65-P1P2P1与pET28a-CTB-P1P2P1,以硫酸铵分级沉淀和包涵体洗涤、经DEAE阴离子交换柱层析分离纯化得到HSP65-P1P2P1与CTB-P1P2P1融合蛋白,并用戊二醛一步偶联法将两者偶联形成HpCp复合物。以小剂量滴...
作者：吕懿; 郑金平 刊期：2011年第01期
目的：研究原核表达的Arresten蛋白纯化品对血管内皮细胞及血管生成的抑制作用。方法：MTT法检测Arresten蛋白对人脐静脉内皮细胞（HUVEC）增殖的影响;流式细胞仪分析Arresten蛋白作用下HUVEC凋亡的情况;细胞迁移实验观察Arresten蛋白对HUVEC迁移能力的影响;鸡胚绒毛尿囊膜（CAM）实验观察Arresten蛋白对新生血管的抑制情况。结果：原核表达的Ar...
作者：李壮林; 姚雪静; 原桂勇 刊期：2011年第01期
人血管抑素包含了4个环饼状结构域（Kringle）,是一个有效的血管生成抑制因子。采用PCR方法从人胚肝cDNA文库中扩增了人血管抑素Kringles1-3的基因,重组于pPIC9K载体中,获得重组载体pPIC9K-K1-3,然后转化毕赤酵母细胞GS115,获得重组菌株。K1-3蛋白在5 L发酵罐的表达量达41.2 mg/L,发酵液上清经过浓缩、透析,然后用Lysine Sepharose 4B层析柱纯化...
作者：金雪霞; 张晓梅; 窦文芳; 许泓瑜; 许正宏 刊期：2011年第01期
以谷氨酸棒杆菌（Corynebacterium glutamicum）SYPS-062基因组DNA为模板,扩增得到L-丝氨酸脱水酶（L-SerDH）的编码基因sdaA。将其克隆到表达载体pET-28a（＋）,并在E.coli BL21（DE3）中诱导表达,对纯化的L-SerDH进行了酶活测定,并与来自C.glutamicum ATCC13032的重组L-SerDH进行了比较,结果显示,两种不同菌株来源的重组L-SerDH降解L-丝氨酸的...
作者：张博; 李铁民; 杨智勇; 胡永飞; 李玉 刊期：2011年第01期
为了证实在谷氨酸棒杆菌中，利用H^＋-ATPase基因失活构建高产谷氨酸基因工程菌的应用可行性，通过重组PCR技术部分缺失H^＋-ATPaseγ亚基基因序列，采用插入失活方法构建H^＋-ATPase失活的谷氨酸棒杆菌。考察了其谷氨酸产生能力及对生长速率的影响。实验结果表明，H^＋-ATPase失活的谷氨酸棒杆菌在含有100g／L的葡萄糖培养基中摇瓶发酵，其谷氨...
刊期：2011年第01期
赛默飞世尔科技有限公司与戴安公司近日宣布，赛默飞世尔以现金每股118．50美元的价格购买戴安所有已发行普通股，该价格比戴安在信息公布前最后一个交易日的股票收盘价溢价约21％，比之前60个交易日平均股票收盘价溢价约32％。赛默飞世尔希望通过节约成本、增加收入，在第三年产出6000万美元协同运营效益。
作者：何彰华; 王洋; 赵珺; 刘晓杰; 张丽华; 王东; 师明磊; 黄芬; 尤平; 赵志虎 刊期：2011年第01期
为了构建一种可用于串联共表达多个基因的原核表达载体,通过PCR引入点突变,对商业载体pET-22b的酶切位点进行定向改造,设计独特的XbaⅠ/SpeⅠ模块。获得改造成功的载体pET-m22b,测序结果显示启动子、核糖体结合位点、多克隆位点及终止子均位于XbaⅠ和SpeⅠ两酶切位点间。选取不同来源的基因进行串联组合及表达鉴定,四个基因成功组合于同一载体中...
刊期：2011年第01期
蛋白质研讨班学员问： 姜老师，您好!我想向您请教关于怎样利用双水相萃取重组蛋白的问题。我查了些资料，但对以下问题还不是很清楚：
作者：王雪; 权春善; 王建华; 范圣第 刊期：2011年第01期
无细胞蛋白表达系统由于能够有效表达膜蛋白等有毒性蛋白,因此近二十年受到了关注,其蛋白表达产率有了显著的提高。细胞抽提物活性的高低是无细胞蛋白表达系统高效运行的关键,若找到简单易行的活性评估方法,将大大降低成本及时间。葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（glucose-6-phosphate dehydrogenase,G-6-PDH）是糖代谢的戊糖磷酸途径中的关键调控酶,该酶...
作者：周露; 刘进元 刊期：2011年第01期
提取植物组织质外体蛋白质的主要困难是提取效率低且易被细胞质蛋白污染。为解决上述问题,以12天93-11水稻幼苗为试验材料,使用3种含不同浓度钾和钙离子的缓冲液作为提取液进行提取效果比较。3种提取液的相同成分都是0.1mol/L Tris-HCl pH7.6,1mmol/L PMSF,区别点在于：Buffer A含0.2mol/L KCl;Buffer B含0.2mol/L CaCl2;Buffer C含0.1mol/L KCl...
作者：刘晓志; 赵会景; 陈伟斌; 常彦忠; 段相林 刊期：2011年第01期
铁是生命必需的微量元素,ferroportin（Fpn）是小肠吸收细胞铁释放的重要蛋白。新近发现肝脏分泌的抗菌多肽hepcidin具有调节肠铁吸收的重要作用,但目前尚缺少Fpn和hepcidin发生作用的实验依据。应用荧光共振能量转移技术（fluorescence resonance energy transfer,FRET）对hepcidin和Fpn之间的作用关系进行了深入研究。首先进行了hepcidin-CF P...
作者：邵娟; 曹际娟; 刘洋; 王长文; 赵彤彤; 李晶泉 刊期：2011年第01期
对植物原料产品和植物源性食品中芥末成分的快速鉴定是避免过敏性疾病发生的重要措施。依据芥末Sin A1管家基因的核酸序列设计特异性引物和探针,对3种芥末样品和21种非芥末植物样品进行实时荧光PCR检测,结果显示,过敏原芥末管家基因的样品FAM通道有荧光信号检出,非芥末样品FAM通道均无荧光信号检出。灵敏度实验表明,植物原料产品中对芥末的检测...
作者：冯飞; 谢振文; 曾慕衡 刊期：2011年第01期
分别根据沙门氏菌16S rRNA、质粒毒力基因spvC、致病基因invB、fimA序列设计4对引物,对沙门氏菌株及非沙门氏株菌基因组DNA进行多重PCR检测。结果该方法能检测出6.3×102个cfu/ml纯培养的沙门氏菌,人工染菌食品模拟检测结果显示,熟鸡肉初始含菌量为17cfu/g、全脂奶粉为11cfu/g、生牛肉为13.6cfu/g,经过8h增菌,PCR检测为阳性。该体系能鉴定产生多...
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