杂志简介：《中国生物工程》杂志经新闻出版总署批准，自1976年创刊，国内刊号为11-4816/Q，是一本综合性较强的生物期刊。该刊是一份月刊，致力于发表生物领域的高质量原创研究成果、综述及快报。主要栏目：研究报告、技术与方法、综述、行业分析、发展战略
杂志简介：《中国生物工程》杂志经新闻出版总署批准，自1976年创刊，国内刊号为11-4816/Q，是一本综合性较强的生物期刊。该刊是一份月刊，致力于发表生物领域的高质量原创研究成果、综述及快报。主要栏目：研究报告、技术与方法、综述、行业分析、发展战略
作者：徐良; 顾玉超; 时瀚; 宓文义; 于文功 刊期：2010年第06期
信号转导子与转录活化子3（STAT3）是一个具有信号转导和转录调控双重功能的转录因子,有文献报道STAT3在乳腺癌中的表达显著升高,并能促进乳腺癌的转移。为了深入探索STAT3在肿瘤发生发展中的作用和影响乳腺癌转移的分子机制,采用RNA干扰技术在小鼠乳腺癌细胞株4T1中沉默STAT3的表达。MTT实验结果显示STAT3沉默对4T1细胞的增殖能力没有影响;细胞...
作者：王正茂; 李琳; 管文燕; 李越希 刊期：2010年第06期
为在真核细胞中表达并纯化I型单纯疱疹病毒（HSV I）包膜糖蛋白gB,并分析其抗原性和免疫原性,化学合成了包膜糖蛋白gB1胞外区基因片段,构建真核表达载体,并转染至HEK293细胞,表达的蛋白用羊抗HSV1＋HSV2血清作为一抗,用ELISA检测其抗原性;用纯化的gB1蛋白免疫昆明小鼠,观察诱发抗体产生的时间及其效价,并用ELISA和Western blot检测小鼠抗gB1多克...
作者：高旭东; 胡明明; 朱运峰 刊期：2010年第06期
目的：探索逆转座子LINE-1编码的ORF-1p在肺癌发病过程中的分子机制。方法：利用RNAi技术,在肺癌细胞A549中下调LINE-1编码蛋白ORF-1p,随后对下调后的A549细胞的生物学特征进行细胞增殖（MTT方法）、细胞周期（流式细胞技术）以及集落形成（软琼脂克隆形成试验）等分析,观察细胞生物学特征的改变。并利用报告基因,进一步对细胞周期相关蛋白进行...
作者：李平法; 刘辉; 詹合琴 刊期：2010年第06期
PCAF（P300/CBP associated factor,P300/CBP相关因子）是一种重要的组蛋白乙酰转移酶,主要通过使核小体组蛋白发生乙酰化而参与基因转录的调控。P300/CBP是一种能够与PCAF相互作用的宿主细胞蛋白,定位于细胞核ND10结构（nuclear dot10）。ND10是由70余种蛋白质分子组成的、以分散的斑点或团块样方式存在于细胞核内的大分子复合物,与基因转录调...
作者：戴毅; 黄晓玲; 孟敏; 李敬东; 时德 刊期：2010年第06期
目的：观察凝血酶调节蛋白（Thrombomodulin,TM）基因转染兔髂动脉损伤模型后,对动脉血管内膜增生狭窄的防治作用。方法：用注射式加压转染的方式对兔动脉壁转染pcDNA3.1/hTM质粒,再制造动脉损伤-阻滞模型,于术后3天、7天、14天、28天用免疫组化的方法观察TM蛋白在各组血管腔内的表达,术后14天、28天用彩色多普勒观察活体吻合口内径和血流流速;...
作者：田硕; 姚文兵; 周敏毅; 李洁; 宋文进; 徐晨 刊期：2010年第06期
将含编码HSA天然信号肽、HSA和新型集成干扰素（NIFN）的融合基因,插入毕赤酵母表达载体pPIC3.5,转染毕赤酵母GS115,用于分泌表达融合蛋白HSA-NIFN的酵母工程菌。诱导表达后,产物经SDS-PAGE、Western blot和MALDI-TOF-MS分析表明该蛋白分子量为86369Da,且能被抗HSA单抗特异性结合;表达的HSA-NIFN经超滤、Blue亲和层析和CM阳离子交换层析纯化后,H...
作者：宋文程; 金明飞; 李冬青; 赵丽芬; 张洪丹; 黄静; 吴自荣 刊期：2010年第06期
葡萄糖依赖性促胰岛素释放肽（glucose-dependent insulinotropic polypeptide,GIP）具有促胰岛素分泌的作用,但因体内半衰期短而限制了其应用。对二肽酶4（dipeptidase IV,DPP IV）识别位点等氨基酸进行改造可有效延长其半衰期。通过人工合成基因或PCR定点突变的方法合成GIP不同突变体基因,将其克隆到大肠杆菌表达载体pET32a（＋）中进行诱导表...
作者：张璟; 莫桂玲; 张庆友; 苏志坚; 许华; 黄亚东; 郑青 刊期：2010年第06期
将编码人可溶性晚期糖基化终产物受体-免疫球蛋白G Fc段（hsRAGE-IgG Fc）融合蛋白的DN段克隆到大肠杆菌表达载体pET-20b中,构建重组表达质粒,转化大肠杆菌Rosetta（DE3）并表达。SDS-PAGE分析表明其表达形式为包涵体,相对分子质量约为66kDa,表达量占菌体总蛋白的38.4%。经复性后,获得纯度为96.6%的融合蛋白,得率约为29.5mg/L。经Western印迹法...
作者：王忠; 谢超; 决登伟; 黄乐平; 黄全生; 杨清 刊期：2010年第06期
采用RACE和同源序列克隆技术,从野生茄子托鲁巴姆（Solanum torvum）中克隆得到一个DAHP同源基因,命名为StDAHP基因,提交至GenBank,登录号为GU479467。生物信息学分析表明：StDAHPcDNA含有一个1683bp的开放阅读框,编码一个由560个氨基酸残基组成的蛋白,该蛋白分子量为62.53kDa,等电点为9.1。采用DNAMAN软件对StDAHP和其他同源蛋白的氨基酸序列比...
作者：殷亮; 杨文竹; 王新宇; 周蕴芝; 姚斌; 陈茹梅; 范云六 刊期：2010年第06期
为研究N-糖基化对黑曲霉Aspergillus niger963植酸酶蛋白酶学性质的影响,利用Megaprimer PCR介导基因定点突变的技术,构建了植酸酶phyA2基因两个N-糖基化突变体,即将该基因编码蛋白质N87位和N102位的天冬酰胺密码子置换为编码与其具有相似结构的谷氨酰胺密码子,两个突变体分别命名为N87Q、N102Q,经测序结果比对和图谱分析,表明在核酸水平上成功...
作者：黄俊丽; 邹寒艳; 王贵学; 方芳; 郭劲松 刊期：2010年第06期
对具有厌氧氨氧化作用的细菌进行更深入的分析有助于了解该菌在生物脱氮过程的应用。对稳定运行、氨氮转化率及总氮去除率分别达到90%及80%左右的单级自养脱氮系统的底部取活性污泥,采用分子生物学方法提取活性污泥细菌总DNA,利用特异引物Pla46rc/Amx820对单级自养脱氮系统中的厌氧氨氧化菌16S rDNA基因进行PCR扩增。扩增产物经克隆、测序及BLAS...
作者：李艳; 龙柱; 江华; 李海峰; 冯菲 刊期：2010年第06期
采用反相悬浮法制备改性壳聚糖磁性微粒絮凝剂,并探讨了该絮凝剂对造纸废水的絮凝作用,着重考察了絮凝剂的投入量、体系pH值、搅拌速度、搅拌时间、沉降时间对造纸废水中COD去除率的影响。结果表明在最佳条件下该絮凝剂对造纸废水的COD去除率可达56.52%,且具有投入量少、pH应用范围广、絮凝时间和沉降时间短的优点,说明改性壳聚糖磁性微粒作为絮...
作者：司美茹; 苏涛; 杨革 刊期：2010年第06期
通过梯度驯化,从印染废水长期污染土壤中分离筛选出能以4种不同结构类型的染料（刚果红、美蓝、孔雀绿和活性艳蓝KN-R）为唯一碳源的菌株XSMR,根据其形态学特征和生理生化鉴定及16S rDNA序列分析,初步鉴定为无色杆菌属（Achromobacter sp.）的菌株。菌株XSMR对4种染料均具有强的脱色降解能力,且对染料脱色的同时,自身能够生长繁殖,培养24h菌体干...
作者：马可; 王琴; 仉红刚; 张秋菊; 修瑞娟 刊期：2010年第06期
目的：探讨以SELDI芯片技术进行细胞标本蛋白分析的最适方法及条件,筛选细胞标本蛋白表达差异。方法：对细胞标本分别用超声裂解法,U9细胞裂解缓冲液配方和自配细胞裂解液提取蛋白,以BCA法测定蛋白浓度;分别以磁珠活化后点样和生物芯片处理器点样使蛋白样品与芯片结合;并对提取蛋白进行检测,比较不同蛋白浓度梯度点样及WCX2,SAX2,IMAC-Cu,H50芯...
作者：陈宏林; 王玺; 何振艳 刊期：2010年第06期
为了从富含单宁和多糖的红树植物中获得高质量的RNA,在总结及改良前人工作的基础上,优化了提取缓冲液的条件,采用碱性条件、PVP及β-巯基乙醇抑制单宁的氧化;利用RNA与单宁、多糖在不同浓度的2-丁氧乙醇中溶解度不同的特性来去除单宁和多糖;同时利用LiCl来选择性沉淀RNA,获纯度较高的RNA可以直接用于cDNA合成、cDNA文库的构建以及RACE等分子生物...
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