杂志简介：《中国生物工程》杂志经新闻出版总署批准，自1976年创刊，国内刊号为11-4816/Q，是一本综合性较强的生物期刊。该刊是一份月刊，致力于发表生物领域的高质量原创研究成果、综述及快报。主要栏目：研究报告、技术与方法、综述、行业分析、发展战略
杂志简介：《中国生物工程》杂志经新闻出版总署批准，自1976年创刊，国内刊号为11-4816/Q，是一本综合性较强的生物期刊。该刊是一份月刊，致力于发表生物领域的高质量原创研究成果、综述及快报。主要栏目：研究报告、技术与方法、综述、行业分析、发展战略
作者：郭允倩; 陈默; 马天骅; 裴端卿 刊期：2009年第10期
胚胎干细胞（ES细胞）能够不断地进行自我更新来维持其多能性,很多转录因子共同调控着ES细胞的自我更新和多能性,Nanog就是其中之一,然而Nanog维持ES细胞多能性的机制并不清楚。p300是真核生物中普遍存在的转录辅助因子,与许多转录因子共同作用调控下游基因的表达。为探索p300是不是能够影响Nanog的转录活性,我们在细胞中共转Nanog（或突变体）...
作者：杨慧宇; 边云飞; 杨志明; 张娜娜; 肖传实 刊期：2009年第10期
目的：靶向血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体-1（LOX-1）基因的发卡样siRNA（shRNA）表达载体的构建及其对巨噬细胞源性泡沫细胞形成的影响。方法：（1）采用DNA重组技术，将LOX-1 shRNA双链与线性化pGenesil-1质粒表达载体连接，构建LOX-1特异性小发夹RNA表达载体pLOX-1-shRNAl及pLOX-1-shRNA2，用脂质体法转染小鼠单核巨噬细胞（RAW264．7），...
作者：王晚霞; 兰喜; 徐向红; 居军; 柳纪省 刊期：2009年第10期
目的：克隆人颗粒溶素和穿孔素基因并构建真核表达载体pGNLY-2A-PFP,观察其在人肺癌A549细胞中的表达情况。方法：体外分离培养外周血单个核细胞并抽提总RNA,RT-PCR扩增人颗粒溶素和穿孔素的基因片段,并将其分别插入pMD18-T进行测序,鉴定正确后构建pIRES-GNLY、pIRES-PFP及pGNLY-2A-PFP并转染人肺癌A549细胞,RT-PCR和间接免疫荧光检测目的蛋白表...
作者：陈武; 莫炜; 张艳玲; 宋钢; 宋后燕 刊期：2009年第10期
目的：研究重组人纤溶酶原丝氨酸蛋白酶结构域（rhPLG-SP）的酵母表达、纯化及理化性质。方法：采用7.5 L发酵罐对巴斯德毕赤酵母（Pichia pastoris）工程菌rhPLG-SP/GS115进行高密度培养、甲醇诱导表达rhPLG-SP,培养液经三步纯化：超滤、Sephacryl S-100、SP-Sepharose FF,将活性组分透析后冷冻干燥。等点聚焦电泳、HPLC、质谱分别检测rhPLG-SP...
作者：白彩明; 毕研伟; 杨旭; 李智华; 李健峰; 徐维明 刊期：2009年第10期
实验目的是在乳酸菌中表达小肠三叶因子（ITF）,并建立兔子胃溃疡模型,口服观察ITF对胃黏膜损伤的再生作用。在实验中利用了分子克隆技术构建携带ITF基因的重组原核表达质粒pNICE：sec-ITF,将重组质粒转化乳酸菌NZ9000株,筛选鉴定阳性菌落,用nisin诱导表达,表达ITF蛋白通过Tricine SDS-PAGE和Western blot进行鉴定。将重约2？的新西兰成年兔分为...
作者：杨磊; 张春明; 王德芝 刊期：2009年第10期
为优化已构建表达人心肌肌钙蛋白I（cTnI）基因工程菌的表达条件,获得纯度较高的cTnI作为抗原用于研制临床上检测心肌梗塞的试剂盒;通过PBD（Plackett Burman Design）设计,考察各因素对目的蛋白cTnI表达的影响,证明诱导时间、pH、KCl浓度是影响最大的三个因素,通过响应曲面法（RSM）优化对cTnI表达影响最大的三个因素,构建回归方程预测cTnI的表...
作者：罗建平; 滑世轩; 赵行; 岑东; 吕建新; 涂植光; 裴仁治 刊期：2009年第10期
NK4蛋白是近年来发现的肝细胞生长因子的最佳拮抗剂。为规模化生产NK4蛋白,将NK4基因插入载体pET-26b（＋）,构建重组原核表达载体pET-26b（＋）-NK4,并转化大肠杆菌Rosseta（DE3）。转化菌经IPTG诱导后以包涵体形式大量表达重组蛋白,占菌体总蛋白的42%。包涵体用盐酸胍溶解后经Ni-NTA树脂亲和层析纯化,蛋白纯度约为95%,经Western blot证实为NK4...
作者：刘春国; 刘明; 李洪涛; 杜金玲; 张新涛; 石薇琳 刊期：2009年第10期
以A／swine／Guangdong／LM／2004（H1N1）猪流感病毒HA基因为模板，通过RT-PCR技术扩增出HA基因，并将其克隆到pCI—neo真核表达载体中，成功构建重组表达质粒pCI-HA，瞬时转染vero E6和293T细胞，通过免疫过氧化物酶单层细胞试验（Immunoperoxidase monolayer assay，IPMA）、间接免疫荧光试验（indirect immunofluorescence assay，iIFA）和...
作者：张姝; 王敏; 韩梅琳; 马荣才; 陈强; 高俊莲 刊期：2009年第10期
对已构建好的表达HrpNEcc蛋白的工程菌BL21（DE3）/pET30a（＋）hrpNEcc的摇瓶发酵条件及乳糖诱导进行优化,通过在7L发酵罐中放大发酵实验,以期提高蛋白产量并降低生产成本。在摇瓶中优化的发酵及诱导条件是：5%的接种量,TB培养基,菌体培养至对数生长前期,添加3g/L外源诱导剂乳糖时,HrpNEcc蛋白产量可达417.60mg/L,比不添加乳糖时提高了36.73%,...
刊期：2009年第10期
梅特勒-托利多XS分析天平自问世以来，受到了众多专家及用户的一致好评，并在2004年荣获了由美国著名科技杂志《R＆D》颁发的R＆D100大奖，以此表彰梅特勒-托利多为称量技术的创新做出的卓越贡献!
作者：康海岐; 申国安 刊期：2009年第10期
取粳稻（Oryza sativaL.japonica）品种中花11号开花授粉后15天的幼胚诱导愈伤组织,在N6D、N6B5D、MsD和B5D 4种培养基上比较愈伤组织生长情况,证明3种培养基均可以用于水稻愈伤组织的培养,但B5D的效果不如另3种培养基,N6D和N6B5D的培养效果优于Ms培养基,N6B5D的效果略好于N6D。后续实验主要采用N6D培养基。进一步对愈伤组织的HygB敏感性试验,发...
作者：朱艳飞; 杨博 刊期：2009年第10期
根据南极假丝酵母脂肪酶calb的成熟多肽序列,人工合成了由毕赤酵母（Pichia pastoris）偏爱密码子组成的calb基因序列（仅成熟肽）。将该基因克隆至穿梭质粒pGAPZαΑ中,获得的重组质粒pGAPZαA-calb经线性化后转入毕赤氏酵母GS115菌株,构建成组成型表达CALB的酵母工程菌株。酵母转化子在YPD培养基上传代10次后,其外源基因未丢失。经摇瓶发酵4天后,...
作者：凌敏; 梁纲; 覃拥灵; 李楠; 梁智群 刊期：2009年第10期
ACEI、ACEII和Xyr1是康氏木霉中调控纤维素酶基因表达的转录因子。体外实验已证实ACEI和Xyr1可与cbh1启动子上的287bp序列（-304bp--18bp）结合从而调控cbh1基因转录,但ACEII是否可与此序列结合仍未清楚。为进一步研究ACEII调控纤维素酶基因表达的机制,利用PCR技术扩增康氏木霉ACEII DNA结合区的基因序列,并使其在大肠杆菌中表达。凝胶迁移率移...
作者：黄雪年; 许杨; 李燕萍 刊期：2009年第10期
链球菌G蛋白的IgG结合域能够特异性地结合IgG的Fc区,是制备免疫微阵列的一种理想的IgG固定材料。克隆表达了具有IgG结合活性的3种IgG结合域的GST融合蛋白（GST-GBx）,该3种蛋白分别含有1个、2个和3个IgG结合域。采用ELISA对三蛋白IgG结合能力进行了比较分析。结果表明在含B-Domain的量相同的情况下,GST-GB3蛋白固定IgG的量最多,其次为GST-GB2,GS...
作者：杨登峰; 潘丽霞; 关妮; 米慧芝; 左文朴; 黄日波 刊期：2009年第10期
建立筛选利用木糖为碳源产乙醇酵母模型,获得一株适合利用木质纤维素为原料产乙醇的酵母菌株。样品经麦芽汁培养基培养后,以木糖为唯一碳源的筛选培养基初筛,再以重铬酸钾显色法复筛。通过生理生化和26D1/D2区对筛选得到的菌株进行分析和鉴定,该菌初步鉴定为Pichia caribbica。经过筛选得到的菌株Y2-3以木糖（40g/L）为唯一碳源发酵时：生物量为...
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