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炭疽毒素受体ATR cDNA的合成和克隆及ATR—Fc融合蛋白的真核表达载体的构建

作者：胡显文; 高丽华; 陈薇; 徐俊杰; 赵剑; 陈惠鹏 刊期：2005年第12期

可溶性炭疽毒素受体(sATR)可以特异性结合炭疽毒素保护抗原(PA),为获得用于中和炭疽毒素以防治炭疽感染的候选抗毒素药物,构建了表达ATR-Fc抗体样分子融合蛋白的真核表达载体.将全长为681bp的编码炭疽毒素受体N端1～227氨基酸的基因分成长约50～60碱基的18个寡核苷酸片段,相邻片段重叠部分为20～22个碱基,利用重叠延伸PCR和引物PCR法,将合成的片...

重组人TGF-β3的表达纯化及复性研究

作者：宋江南; 李校堃; 苏志坚; 吴志玲; 黄亚东 刊期：2005年第12期

利用大肠杆菌表达重组人转化生长因子β3(human transform growth factor,hTGF-β3),目的蛋白以包涵体形式表达.用8mol/L尿素溶解的包涵体蛋白,经CM Sepharosel Fast Flow柱和Sphacryl S-100分子筛可获得纯度达90%以上的rhTGF-β3单体.将单体蛋白加到复性缓冲液(1mol/L NaCl,0.5mol/L L-Arg,0.5mmol/L GSSG,30mmol/L CHAPS,20%(v/v)DMSO)进行复性后...

免疫球蛋白缓释微囊的制备、结构表征与性能研究

作者：龚平; 吴锦霞; 谭天伟 刊期：2005年第12期

微囊化是实现生物药物制剂缓控释放的最重要方法之一.以乙基纤维素(EC)为囊材,采用物理化学方法制备了免疫球蛋白乙基纤维素微囊.用扫描电镜(SEM)考察了微囊的孔结构和形貌特征,并通过体外溶出实验考察了微囊的缓释效果.结果表明,在给定制备条件下制得的微囊圆整度好,孔径分布范围较窄,在模拟条件下具有良好的缓释性能.微囊最佳制备工艺条件如下...

重组人卵透明带蛋白（rhZP3）的生物活性研究

作者：谢琪璇; 李文星; 潘善培; 张春雪; 肖銮娟; 马丽; 史卫卫 刊期：2005年第12期

为了研究毕赤酵母表达的重组人卵透明带蛋白(rhZP3)的生物活性,分别用空白培养液,含孕酮或rhZP3的培养液对人精子进行顶体诱发实验,用考马斯亮蓝染色法对顶体状态进行评价;用不同浓度的rhZP3以及空白培养液分别处理精子,然后再与卵子进行结合实验,观察经过不同处理的精子在精卵结合中的情况;用抗rhZP3抗血清与阴性血清分别处理卵子,再与精子进行...

转拟南芥AtKup1基因高含钾量烟草获得

作者：郭兆奎; 杨谦; 姚泉洪; 万秀清; 颜培强 刊期：2005年第12期

提取拟南芥幼根总RNA,进行RT-PCR逆转录,产物测序,将其构建到含Km(带内含子)筛选标记的植物双元表达载体上,根癌农杆菌介导法将AtKup1基因导入烟草,对转化子进行PCR扩增、GUS染色、Southern杂交和AtKup1基因mRNA荧光定量PCR分析,并进行烟叶内在成分化验分析.PCR获得2100bp左右扩增产物,测序结果证实扩增产物序列与拟南芥AtKup1基因(Genbank No:A...

牛传染性鼻气管炎病毒重组gE蛋白间接ELISA诊断方法的建立

作者：王海燕; 朱远茂; 薛飞; 童光志; 赵立平; 相文华; 韩文瑜 刊期：2005年第12期

以重组牛传染性鼻气管炎病毒gE蛋白,经纯化后作为诊断抗原建立了检测牛血清特异性gE抗体的间接酶联免疫吸附试验,确定其最佳包被量为每孔1.075μg.样品稀释度为1:40,兔抗牛IgG辣根过氧化物酶标记抗体稀释度为1:5 000.判定标准为样品OD值大于0.582为阳性,小于0.472为阴性,在0.472与0.582之间为可疑.经抗特异性试验和重复性试验证明该方法特异性高...

醛脱氢酶基因敲除的K.pneumoniae重组菌的构建

作者：张延平; 刘铭; 曹竹安 刊期：2005年第12期

在利用Klebsiella pneumoniae M5aL厌氧发酵甘油生产1,3-丙二醇的过程中,一部分甘油通过氧化代谢途径经醛脱氢酶(ALDH)催化合成大量副产物乙醇,降低了1,3-丙二醇的产量和得率.首次以醛脱氢酶ALDH为改造目标,利用同源重组技术获得了ALDH基因敲除的K.pneumoniae重组菌.首先,采用PCR的方法分别从K. pneumoniae M5aL基因组DNA及质粒pBR322上扩增得到...

广谱碳源产油酵母菌的筛选

作者：李永红; 刘波; 孙艳; 赵宗保; 白凤武 刊期：2005年第12期

对10株酵母菌利用不同单糖为碳源条件下菌体内积累油脂的能力进行了初步考察,并对菌油进行了分离和脂肪酸组成分析.实验发现,以葡萄糖为唯一碳源时有9株菌油脂含量超过自身细胞干重的20%,可以界定为产油微生物.其中6#菌(T. cutaneum AS 2.571)利用葡萄糖发酵菌体油脂含量达到65%(W/W).所有实验菌株都能同化多种单糖,其中1#菌(L.starkeyi AS 2.13...

化学工业出版社新书

刊期：2005年第12期

白蛋白融合α-2b干扰素在毕赤酵母中的表达

作者：张伍魁; 范清林; 邹文艺; 仲皙; 宋礼华 刊期：2005年第12期

α-2b干扰素的重组表达质粒pPIC9K-HSA-IFNα-2b经限制性内切酶SalI酶切线性化后电转化巴斯德毕赤酵母菌(P.Pastoris)SMD1168,将阳性转化子进行PCR鉴定和Mut表型鉴定并用甲醇诱导表达,Western-Blot结果表明白蛋白融合IFNα蛋白与IFNα抗体具有结合能力,Wish细胞-VSV病毒系统鉴定表达蛋白具有抗病毒生物活性.在摇瓶培养条件下,甲醇在0.5%～4.0%的范围...

更正启事

刊期：2005年第12期

Oenococcus oeni苹果酸-乳酸酶基因克隆及其在酿酒酵母中的表达

作者：刘延琳; 蒋思欣; 何秀萍; 李华; 张博润 刊期：2005年第12期

苹果酸-乳酸酶是苹果酸-乳酸发酵过程中负责苹果酸转化为乳酸的功能酶.在进行酒酒球菌SD-2a的苹果酸-乳酸酶基因(mleA)克隆测序基础上,以PGK1强启动子和ADH1终止子为调控元件,以大肠杆菌-酵母菌穿梭质粒YEp352为载体,构建了重组表达质粒并转化酿酒酵母YS58.酵母转化子用SD/-Ura平板筛选鉴定.斑点杂交检测表明目的基因mleA转化到受体菌中,SDS-PAG...

科学出版社新书

刊期：2005年第12期

定量蛋白质组学中的同位素标记技术

作者：叶雯; 刘凯于; 洪华珠; 刘丽君 刊期：2005年第12期

定量蛋白质组学的目的是对复杂的混合体系中所有的蛋白质进行鉴定,并对蛋白质的量及量的变化进行准确的测定,是当前系统生物科学研究的重要内容.近年来,由于质谱技术和生物信息学的进步,定量蛋白质组学在分析蛋白质组或亚蛋白质组方面已取得了令人瞩目的成就,但其最显著的成就应该归功于稳定同位素标记技术的应用.该技术使用针对某一类蛋白具有...

γ-聚谷氨酸高产菌株筛选及发酵条件优化

作者：胡荣章; 叶海峰; 金丽; 吴昌琳; 吴自荣 刊期：2005年第12期

γ-聚谷氨酸是一种生物可降解的高分子材料,可应用于多种领域,因此受到普遍重视.报道了以11株枯草芽孢杆菌菌株为培养菌株,用3种谷氨酸钠含量不同的培养基进行筛选获得l株γ-聚谷氨酸高产菌株;再以该菌株为研究对象进行碳源、氮源、谷氨酸钠浓度、初始pH、接种量、通气量等发酵条件的优化实验,结果表明最佳发酵条件为:250ml三角烧瓶装液40ml,接种...