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转录后基因沉默（PTGS）及其在作物遗传改良中的应用

作者：黄冰艳; 吉万全; 郭蔼光; Sadequr; R; 李忠宜 刊期：2005年第05期

转录后基因沉默(PTGS)或RNA干扰(RNAi)技术的发展为创造植物遗传变异体提供了新途径.PTGS于1998年被明确为双链RNA(dsRNA)诱导的序列特异性基因沉默,短短几年内有关研究取得了突破性进展.结合利用PTGS技术进行的淀粉合成关键酶基因沉默研究,概述了PTGS的作用机理和特点、dsRNA表达载体设计、沉默效应的遗传稳定性及在作物改良应用方面的研究进展...

代谢物组学及其在微生物研究中的应用

作者：郑卉; 李良智; 葛志强; 元英进 刊期：2005年第05期

代谢物组学(metabolomics)是继基因组学(genomics)、蛋白质组学(proteomics)后发展起来的一门新学科.对代谢物组学的含义,研究方法及流程,特别是其在微生物中的应用进行了介绍,包括使用代谢物组学中的NMR技术研究微生物在降解环境污染物中的作用;使用代谢物组学技术研究微生物代谢通量,从而在分析代谢通量的基础上通过代谢工程改变代谢通量,提高...

珊瑚和海葵来源红荧光蛋白的研究和应用

作者：钟卫鸿; 陈建孟; 陈伟; 路争; 宋艳绒 刊期：2005年第05期

绿色荧光蛋白作为标记蛋白和报告蛋白在生物学研究中应用越来越广.但在荧光共振能量转移(fluorescence resonance energy transfer,FRET)等技术中存在一些缺陷,需要更大波长范围的荧光蛋白.最近研究发现了多种来源于珊瑚和海葵的红荧光蛋白,这些长波长的荧光蛋白对绿色荧光蛋白是一种很好的代替和补充,可以实现细胞内多荧光标记,提供更理想的FRE...

实时PCR技术在植物研究上的应用

作者：童汉华; 邬亚文; 章善庆; 曹一平; 罗利军 刊期：2005年第05期

实时PCR是在常规PCR基础上运用荧光共振能量转移现象,加入荧光标记探针,巧妙地把核酸扩增、杂交、光谱分析和实时检测技术结合在一起的一项新技术,具有快速、灵敏、特异性强、定量准确等特点,广泛应用于医学、检验检疫、军事、农业、基础研究等领域.着重就实时PCR技术的特性及在植物上的应用进行了讨论,并与目前常用的相关技术进行了比较.

2005年全国生化与生物技术药物学术年会

刊期：2005年第05期

用基因工程方法研制廿二碳六烯酸

作者：许友卿; 丁兆坤 刊期：2005年第05期

廿二碳六烯酸(DHA)能促进脑细胞的生长发育,改善大脑机能和行为学习,防治中枢神经疾病,是人及其它动物重要的必需多不饱和脂肪酸.目前,DHA主要来自深海鱼油的分离制备.利用微生物发酵生产DHA仍处于实验室阶段.破囊壶菌(Thraustochytrium roseum)是合成DHA的优良海洋真菌.研究与筛选破囊壶菌DHA合成突变株,克隆破囊壶菌DHA合成关键酶基因,进而在...

科学出版社新书推荐

刊期：2005年第05期

颌突外胚间充质干细胞（EMSCs）的体外分离及鉴定

作者：张建平; 段晓燕; 周泽渊; 赵文明; 金岩 刊期：2005年第05期

外胚间充质(ectomesenchyme)是一种胚胎发育早期颅面部出现的多能性结构(multipotentstructure),大多数颅面部结构和组织均由其衍生而来,这提示外胚间充质中存在一种干细胞,即外胚间充质干细胞(ectomesenchymal stem cells,EMSCs).为了分离和鉴定EMSCs,对E12.5的SD大鼠颌突组织细胞进行了流式细胞学分析,发现其中的外胚间充质细胞表达多种神经谱...

人碱性成纤维细胞生长因子突变体的高效表达

作者：吴晓萍; 李校堃; 苏志坚; 郑青; 吴思娴 刊期：2005年第05期

用PCR法将人碱性成纤维细胞生长因子(hbFGF)基因中编码第25、69和92位的半胱氨酸(Cys)密码子突变为丝氨酸(Ser)密码子,将突变的hbFGF cDN断与表达质粒pET3c连接,构建重组质粒pET3c-hbFGFSer25,69,92.hbFGFSer25,69,92在大肠杆菌BL21(DE3)中的表达量大于30%.通过阳离子交换和肝素亲和层析两步纯化,得到纯度大于95%的hbFGFSer25,69,92.MTT法测定纯...

癌基因iASPP的克隆、表达与纯化

作者：刁世勇; 张新伟; 饶青; 邢海燕; 陈森; 王建祥; 王敏 刊期：2005年第05期

iASPP是新近发现的高度保守的p53相关基因,其蛋白产物定位于细胞核内,具有结合NF-κB p65亚基和p53功能,进而抑制NF-κB的转录调节和p53对凋亡的调节功能.利用RT-PCR方法从人白血病细胞系U-937中克隆出癌基因iASPP,将其克隆至原核表达载体pET28a(+)中,成功构建iASPP表达载体PIAF,重组质粒读码框和序列与预期一致.在IPTG诱导下,重组载体大肠杆菌Ros...

化学工业出版社新书推荐

刊期：2005年第05期

Bcr3／abl2和VEGF基因反义寡核苷酸联用增强对K562细胞的生长抑制作用

作者：丛秀丽; 杨晨; 冯四洲; 李彬; 杨仁池; 韩忠朝 刊期：2005年第05期

目的:研究BCR-ABL和VEGF反义寡核苷酸联用对K562细胞株的作用及其相互作用的影响.方法:设计针对bcr3/abl2和VEGF的反义寡核苷酸(AS-ODNs),应用脂质体Oligofectamine作为转染载体.在转染后72h进行台盼蓝染色细胞计数;建立裸鼠K562移植瘤动物模型,瘤内注射AS-ODNs,观察肿瘤体积生长变化,组织学检测肿瘤血管密度和肿瘤细胞凋亡情况.结果:转染后72h,...

分泌表达bFGF的中国仓鼠卵巢（CHO）细胞的构建及其特性分析

作者：杨小柯; 陈小佳; 孙奋勇; 戴云; 李志英; 洪岸 刊期：2005年第05期

CHO细胞在无血清或无蛋白培养条件下培养通常会遇到贴壁能力差,细胞活力差等问题.通过构建分泌型bFGF基因,克隆到pIRESneo3表达载体上,转染CHO细胞,通过MTT法间接检测细胞培养上清中bFGF表达,并在无蛋白培养基中观察细胞的生长.结果显示转染的CHO细胞表达bFGF,且分泌的bFGF有生物活性;转染的CHO细胞在无蛋白培养基中较未转染的CHO细胞的贴壁能力...

口蹄疫重组鸡痘病毒诱导猪特异性细胞毒性T淋巴细胞（CTL）杀伤活性检测

作者：郑敏; 金宁一; 秦晓冰; 田明尧; 费东亮; 李萍; 何敏 刊期：2005年第05期

目的:评价口蹄疫重组鸡痘病毒vUTAL3CP1诱导猪产生特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)杀伤活性的能力.方法:用PCR方法亚克隆O型FMDV VP1基因C末端部分片段(第130～213AA).将其插入真核表达载体pDisplay中,构建质粒pDisplay-mVP1.将pDisplay-mVP1转染PK-15细胞,经3次G418加压筛选,并用RT-PCR和IFA鉴定,证明获得表达目的基因的PK-15/pDisplay-mVP1细胞....

EIAV弱毒疫苗免疫马外周血单核细胞IL-2表达水平的研究

作者：王盈; 魏丽丽; 张晓燕; 吴东来; 相文华; 王晓钧; 吕晓玲; 沈荣显; 邵一鸣 刊期：2005年第05期

目的:通过定量监测马传染性贫血病毒(EIAV)弱毒疫苗免疫马外周血单核细胞(PBMC)IL-2表达水平的变化特征,探讨EIAV弱毒疫苗的免疫保护机制.方法:用实时定量RT-PCR技术建立了马外周血PBMC IL-2表达水平的定量检测方法.在不同的时间点定期对4组(疫苗免疫组、健康对照组、强毒攻毒组和EIAV自然感染组)12匹马的外周血PBMC IL-2表达水平进行了检测,同...