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无选择标记转基因植物的培育

作者：陈松彪; 李旭刚; 王锋; 朱祯 刊期：2005年第02期

植物转基因研究中通常都要使用选择标记基因来筛选转化细胞并获得转基因植珠.但是当转基因植株育成后,选择标记基因就失去了存在的意义.为了消除由选择标记基因引起的安全性隐患,人们发展了一些培育无选择标记转基因植物的策略.这些策略主要包括共转化、位点特异性重组和转座子转座等.去除选择标记基因将促进公众对转基因作物的接受.评述了无选...

《基因Ⅷ》

刊期：2005年第02期

加快微生物油脂研究为生物柴油产业提供廉价原料

作者：赵宗保 刊期：2005年第02期

当前国内外致力于发展生物柴油,因其性能优良,成为化石柴油的替代品.由于以植物油脂生产生物柴油原料成本占总成本的70%～85%,所以亟待开发廉价油脂资源.微生物油脂主要是微生物利用碳水化合物合成的甘油脂,其脂肪酸组成和植物油相近.产油微生物具有资源丰富、油脂含量高、碳源利用谱广等特点,开发潜力大.然而,目前微生物油脂生产成本偏高,研究...

《生物技术与基因工程小百科》

刊期：2005年第02期

口服携带人PF4基因的减毒沙门氏菌对大剂量化疗小鼠的促造血重建作用

作者：闫凤英; 卢士红; 许子亮; 刘斌; 赵丽华; 梁琳慧; 宋忻; 杨发金; 韩忠朝 刊期：2005年第02期

目的:探索口服携带人PF4基因的减毒沙门氏菌对大剂量化疗小鼠造血重建作用.方法:通过在大剂量化疗前/后喂服携带PIRES2-EGFP/PF4减毒沙门氏菌,检测化疗后小鼠的生存率,小鼠在不同时间外周血血常规、骨髓细胞数、骨髓中Sca-1和C-kit细胞含量、不同时间骨髓生成各系细胞的集落数等.结果:在大剂量化疗前、后均口服携带PIRES2-EGFP/PF4减毒沙门氏菌...

《自然疫源性疾病》

刊期：2005年第02期

碱性成纤维细胞生长因子对生长板软骨细胞增殖与分化的影响

作者：宇丽; 吴凤麟; 汪卓赟 刊期：2005年第02期

目的:探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对生长板软骨细胞增殖和分化的作用.方法:分离并在低血清条件下培养兔生长板软骨细胞.采用改良MTT法检测细胞增殖倍数;羟脯氨酸法测定软骨细胞胶原产量;酶动力学方法测定碱性磷酸酶(ALP)活性.结果:bFGF浓度在5～100ng/ml范围内可以促进软骨细胞增殖,并以25ng/ml刺激时效果最为显著.当bFGF浓度高于25ng/ml...

化学工业出版社新书推荐

刊期：2005年第02期

改善蛋白质药物PELA控释微球释放性能的研究

作者：李玲玲; 孟凡涛; 夏新; 马光辉; 苏志国 刊期：2005年第02期

开展了以乙酸乙酯(EA)与二氯甲烷(MC)的混合溶液为有机溶剂、以单甲氧基聚乙二醇-聚-DL-乳酸(PELA)为膜材的W/O/W复乳-分步固化法制备蛋白质药物控释微球的研究.为解决微球突释率高、且突释后的释药速度缓慢的问题,实现后期快速释放,以溶菌酶为模型蛋白,重点考察了膜材组成、内水相体积以及外水相盐浓度对微球释药速率的影响.结果表明,当外水相...

一种新阿片肽的分离纯化

作者：韩飞; 施用晖; 刘勇; 陈蕴; 乐国伟 刊期：2005年第02期

报道了一种新阿片肽OP1的分离纯化.将重组毕赤酵母经适宜的生长和表达培养后,所得的发酵液经离心得无细胞上清液,上清液经超滤后过Sephadex G-10柱.将经Sephadex G-10柱所得具有阿片活性的粗组分用HPLC-MS分析,根据阿片肽N-端均有一个酪氨酸残基,且在肽链的第三或第四位上有一个芳香族氨基酸残基这一性质,依据分子量确定活性组分中可能存在的所...

表达NM23-H1／NDPK-A工程菌的遗传稳定性研究

作者：钱垂文; 黄立; 王一飞; 熊盛; 张美英; 李雪玲 刊期：2005年第02期

目的:研究重组工程菌的遗传稳定性.方法:利用重组表达质粒pBVNM-H1转化宿主菌E.coli DH5α,筛选重组工程菌DH5α-pBVNM-H1.将新构建好的重组工程菌在无选择压力的条件下进行连续传代培养,比较菌落在LB(-)和LB(+)培养基上的生长状况,并对传代菌株目标蛋白的表达情况以及质粒数量和目的基因DNA进行电泳鉴定.结果:重组工程菌连续传代50次中,在LB(-)和...

重组人红细胞生成素二聚体不同真核表达载体的构建及表达

作者：张春莉; 李景利; 杜柏榕; 李秋生; 有红霞; 李金凤; 朱迅 刊期：2005年第02期

为构建重组人红细胞生成素(recombinant human erythropoietin,rhEPO)二聚体真核表达载体,应用PCR方法扩增EPO cDNA,PCR产物克隆入T载体后,经酶切、连接、转化等过程分别构建了3个EPO二聚体的真核表达载体pBT-1c、pBT-2s及pBT-3c,经测序序列完全正确.然后将3个真核表达载体分别转染于COS-7细胞及CHO-dhfr细胞中,用ELISA方法检测,它们在COS-7的瞬...

蜂毒素分子的改造及其基因在毕赤酵母中的表达

作者：赵亚华; 董竟南; 崔红; 白云; 金科华; 蒋智勇 刊期：2005年第02期

为获得保留有抗菌活性而降低溶血作用的蜂毒素，对蜂毒素的分子结构进行了改造。将第5位的Val变为Arg，第15位Ala变为Arg，删除了第16位的Leu。用PCR技术获得了改造后的蜂毒素基因，将其克隆入酵母表达载体pPICZa—A，获得重组表达质粒pPICZa—A—MEA。该质粒转化毕赤酵母菌GS115，甲醇诱导下表达，发酵上清液经抑菌活性、溶血活性测定及亲和层...

一种促分裂活性降低的hbFGF突变体的表达及纯化

作者：吴晓萍; 李校堃; 苏志坚; 郑青; 吴思娴; 许华; 曲红艳 刊期：2005年第02期

为了降低由人碱性成纤维细胞生长因子(hbFGF)的广谱促分裂活性引起的潜在副作用,用中性氨基酸丙氨酸取代了hbFGF第108位的丝氨酸,构建了促分裂活性降低的hbFGF突变体(mhbFGF).IPTG诱导突变体在大肠杆菌BL21(DE3)中高效表达.mhbFGF的表达量约为全菌体蛋白的30%.通过离子交换和肝素亲和层析从菌体上清中纯化目标蛋白.MTT法检测促分裂活性表明,mhbF...

重组抗血红素ScFv包涵体蛋白的复性及纯化研究

作者：徐寒梅; 汤雅岚; 戴俊; 姚震声; 华子春 刊期：2005年第02期

抗血红素多二硫键ScFv在大肠杆菌中绝大多数表达产物为包涵体,为了获得可溶性的具有生物活性的ScFv,摸索了不同的复性条件,包括透析法、稀释和层析相结合的方法.研究发现,先对溶解的变性ScFv溶液稀释,进行初步的蛋白质复性,再利用Sephadex G-25凝胶层析进一步复性、降低变性剂浓度和纯化,至少可以得到95%纯度,产率为150mg/L的目标蛋白,通过一次...