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生物信息学预测与实验验证相结合策略筛选鉴定新的人分泌蛋白基因

作者：周宇波; 刘锋; 朱智东; 朱弘; 张新; 王志勤; 刘建华; 韩泽广 刊期：2004年第12期

使用生物信息学预测结合实验验证的策略筛选鉴定人新的分泌蛋白基因.用SignalP、SOSUI、PSORT和BLAST等程序对UniProt蛋白数据库进行生物信息学分析,筛选出用于实验验证的14个功能未知基因.采用RT-PCR方法,克隆得到14个基因的全长编码序列,并构建到真核表达载体pcDNA3.1(-)/Myc-His质粒.采用蛋白质印迹与免疫荧光分析,检测到其中7个基因的表达....

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刊期：2004年第12期

siRNA作用效果的靶点依赖性

作者：韩慧明; 毛建平 刊期：2004年第12期

小分子双链RNA(siRNA)可以高效、特异地沉默目的基因表达,为基因功能研究及基因治疗提供了新工具.近年来研究表明针对基因mRNA不同位点随机设计的siRNA在作用效果上存在差异,siRNA作用效果有序列依赖性,而且与其在基因mRNA上的结合部位的高级结构有关,与反义核酸发挥作用的靶点依赖性类似.这一性质对设计高效siRNA为基因功能和基因治疗研究提供...

《中国生物技术产业发展报告（2004）》

刊期：2004年第12期

马传染性贫血病毒Gag p9蛋白功能研究进展

作者：魏丽丽; 王晓钧; 王盈; 李景鹏; 相文华; 沈荣显 刊期：2004年第12期

对病毒复制机制研究的一个重要方面是病毒的组装和从细胞表面出芽.过去的20年大量研究证实反转录病毒Gag蛋白对病毒的组装和出芽起着决定性作用.Gag蛋白的多个功能域已经被证明在病毒组装的不同时期发挥作用.马传染性贫血病毒(equine infectious anemia virus,EIAV)p9是Gag蛋白C端的一个小蛋白,在其之上的L域是与病毒释放直接相关的蛋白功能区域...

植物启动子的诱导模序

作者：吴雪峰; 赵开军; 陈毓荃 刊期：2004年第12期

启动子是位于基因5′端并负责该基因转录的DNA序列.诱导性启动子中有一些对伤害、真菌侵染、紫外线照射、激素等做出应答反应的顺式作用元件,被称为模序.已在植物启动子中鉴定出许多与诱导表达相关的模序,如伤害诱导模序,真菌诱导模序,植物激素诱导模序和光诱导模序等.这些模序作为启动子的顺式元件对各种诱导因子做出反应、调控基因的表达.

玉米细菌性枯萎病及其病原菌的检测技术

作者：吴琼; 陈枝楠; 范怀忠; 金显忠 刊期：2004年第12期

玉米细菌性枯萎病是影响玉米生产的重要病害,该病害通过带菌的种子进行远距离传播,对该病菌的检测成为防止和控制该病害的重要手段.介绍现有的检测该病菌的各种方法,即黑色素选择培养法、double-sandwich ELISA以及RAPD-PCR,LCR-PCR,Nested-PCR,multiple PCR和荧光实时PCR等分子生物学检测方法,并对这些方法的特性进行比较和探讨.

赤霉素信号转导与植物的矮化

作者：李晓波; 徐吉臣; 朱立煌 刊期：2004年第12期

论述近年来在拟南芥、水稻等模式植物中赤霉素信号转导的研究进展.通过对赤霉素相关突变体的生理研究,鉴定出几个介入赤霉素信号转导过程的重要基因,并对这些基因的产物进行分析,根据相应的蛋白特征结构域,推导了它们可能具有的功能.利用双突变体,分析了这些基因的上下游关系,确定了在植物中,GA信号转导的几个途径.在此基础上提出了赤霉素信号转...

核黄素基因工程研究进展

作者：张会图; 姚斌; 范云六 刊期：2004年第12期

核黄素(维生素B2)为天然水溶性的B族维生素,是维持机体正常代谢所必须的物质,具有重要的生理功能.目前核黄素的生产方法主要有化学合成法和微生物发酵法.其中微生物发酵法是后来发展起来的一种十分经济有效的方法,并在核黄素主产中开始占据主导地位.为进一步获得核黄素高产菌株,人们对核黄素合成基因及其表达调控的机制做了深入细致的研究,并以...

链霉菌次级代谢调控机制进展

作者：张艳娟; 洪斌 刊期：2004年第12期

链霉菌除具有复杂的形态分化特征外,还可以产生多种具有重要应用价值的次级代谢产物,这两个过程密切相关.因此,链霉菌存在着原核生物中罕见的庞大而复杂的调控网络.链霉菌在遗传水平有三个层次的调控,分别是:途径特异性调控、多效调控和全局调控.阐明这些调控网络将为利用代谢工程手段提高次级代谢产物的产量并对其进行结构改造奠定理论基础,还...

反义技术研究进展

作者：王波; 陈梅红 刊期：2004年第12期

反义技术利用DNA或RNA分子通过Watson-Crick碱基配对原则与目的基因的mRNA互补结合,通过各种机制使其降解或抑制其编码蛋白的翻译,从而抑制目的基因的表达.与基因敲除(gene knockout)等功能缺失性研究方法相比,反义技术具有投入少,周期短,操作简单等优点,因此受到了广泛的关注.对几种常用反义技术的研究进展及存在的问题进行概述.

蛋白质芯片技术进展

作者：刘康栋; 赵建龙 刊期：2004年第12期

人类基因组测序工作的完成,引起人们对蛋白质组研究的热忱.蛋白质作为生命活动的执行者,种类繁多,结构复杂,并且其活性与空间结构密切相关,需要更为先进的技术去研究和探索.近来出现的蛋白质芯片以并行、高通量检测、分析和处理蛋白质样品,发展迅速,应用前景广泛.介绍蛋白质芯片的种类、蛋白质固定的表面化学以及不同的检测方法,简述蛋白质芯片...

肝素促进脐血巨核祖细胞体外扩增

作者：冯义; 冯四州; 张磊; 刘斌; 范存刚; 任贺; 韩忠朝 刊期：2004年第12期

目的:探索肝素在脐带血CD34+细胞定向扩增巨核祖细胞中的作用.方法采用免疫磁珠法(MACS)分选CD34+细胞,在TPO,IL-11的扩增体系中加入肝素,巨核祖细胞集落分析(CFU-MK)测定巨核祖细胞扩增倍数,流式细胞仪检测巨核祖细胞分化过程中的特异性标记(CD34+,CD41a+,CD61+,CD34+CD41a+,CD41a+CD61+),巨核细胞特异性抗体(CD41a)免疫组化染色和透射电镜观察...

人精子蛋白SP22的cDNA克隆、表达及纯化分析

作者：宛传丹; 黄宇烽; 许晓风 刊期：2004年第12期

精子蛋白SP22与生殖功能密切相关.睾丸附睾毒物氯醇硝唑作用于大鼠生殖系统时,精子表面SP22大量脱落至附睾液中,导致生育力降低.深入研究发现SP22与生育力存在量的关系.从人睾丸组织中提取总RNA,通过RT-PCR克隆出人睾丸组织中的SP22基因,连入pGEM-Teasy vector进行cDNA克隆测序.再亚克隆到pET-28a-c(+)vectors成功构建pET-28a-c(+)vectors/SP22...

产生志贺样毒素的噬菌体φ297整合酶基因（int）的克隆和序列分析

作者：翟静; 张凤珍; 蒋汉明; 曹奇志 刊期：2004年第12期

目的:克隆并分析细菌性噬菌体ψ297的整合酶基因(int).方法:采用加接头的基因DN断为模板进行步移PCR,根据溶源性噬菌体ψ297的染色体DNA上类似于噬菌体933W的整合酶基因的一个40个核苷酸设计引物,进行扩增、克隆、亚克隆、测序和序列分析.结果:得到了噬菌体ψ297编码的整合酶基因(int)的完整序列,它的长度是1287bp,编码了428个氨基酸的Int蛋白质.将...