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打造精品学术活动，发挥学术交流主渠道作用

作者：孟广震 刊期：2004年第09期

学术交流应该是学会的头号使命,一个学会如果不搞学术活动,就不能称之为学会.如果只满足于搞一些应景式的学术活动,缺乏学术亮点,这些活动的社会影响和学术价值也必然微乎其微.日前在山东日照召开的代谢工程和工业生物技术学术研讨会,是中国生物工程学会努力打造精品学术活动的又一次尝试.

核基质附着区与转基因表达

作者：黄慧珍; 陈士云; 吉万全; 王瑶 刊期：2004年第09期

核基质附着区(matrix attachment regions,MARs)是与核基质(或核骨架)特异结合的DNA序列,属于非编码序列,富含AT.通过与核基质的结合,它能使染色质形成独立的环状结构,调控基因的转录和表达,减少由于位置效应引起的转基因沉默.MARs在提高转基因表达水平、消除转基因个体间表达水平的差异、抑制转基因沉默等方面起着重要的作用.就MAR的一些结构功...

血管紧张素转化酶抑制肽的研究进展

作者：何海伦; 陈秀兰; 孙彩云; 张玉忠 刊期：2004年第09期

血管紧张素转化酶(angiotensin-I-converting enzyme,ACE)在血压调节方面起着重要的作用,当其受到抑制时血压就会降低.许多合成的ACE抑制剂被广泛地应用于临床,但会造成多种副作用.近年来,对天然ACE抑制肽的研究表明,一些来源于蛋白酶解产生的活性肽可以对ACE起到有效的抑制作用.综述了血管紧张素转化酶的抑制肽的降压原理,种类和来源以及结构特...

植物性口服疫苗研究进展

作者：张娅; 曾君祉; 周志勇; 陈毓荃; 黄华樑 刊期：2004年第09期

利用转基因植物作为生物反应器生产疫苗是近几年发展起来的一个崭新的领域,并取得了许多成就.就植物性口服疫苗的最新研究进展进行了综述,并展望了这一领域的发展前景与存在问题.

用慢病毒载体制备转基因动物的研究进展

作者：邓继先; 沈伟 刊期：2004年第09期

慢病毒是逆转录病毒的一种,具有逆转录病毒的基本结构,但也有不同于逆转录病毒的组份和特性,作为基因治疗载体发展起来,最近已用于转基因动物制备.慢病毒像其它逆转录病毒一样,其基因组经逆转录后能整合在宿主DNA上;由于病毒载体经改构后,不在宿主细胞增殖,不会导致寄主细胞的死亡,被它感染的或转化的动物细胞能够连续传代;这种载体的最大优势是...

体细胞克隆猪的研究进展

作者：胡军和; 杨春荣; 雷安民; 敬晓棋; 窦忠英 刊期：2004年第09期

哺乳动物克隆不仅可以保护濒危动物,而且与干细胞工程技术相结合能应用于克隆性治疗,是目前生物技术领域研究的热点之一,具有重大的科学意义和应用价值.由于体细胞克隆猪在人类器官移植方面具有巨大的应用潜力,已成为当今体细胞克隆研究的热点.从2000年开始,在不同国家相继诞生了体细胞克隆猪及转基因猪,但是其成功效率很低(1%～2%).主要综述了...

抑制差减杂交（SSH）技术及其在植物基因分离上的应用

作者：李广存; 金黎平; 谢开云; 屈冬玉 刊期：2004年第09期

SSH是一种基于抑制PCR和差减杂交技术建立的,在转录水平上研究基因表达的技术,具有稳定、高效、可靠的特点,可对生物的生长、发育、衰老、死亡等生命过程及生物或非生物逆境胁迫对生物所造成的影响等进行全面、系统的分析.简单介绍了SSH的基本原理、技术要点,并对技术本身的改进和提高及在转录水平上与其它技术方法的比较及其在植物基因分离上的...

长三角工业与环境生物技术产业发展研讨会暨项目洽谈会

刊期：2004年第09期

滚环DNA扩增的原理、应用和展望

作者：肖乐义; 祁自柏; 姜俊; 张子宽 刊期：2004年第09期

滚环DNA扩增(rolling circle DNA amplification,RCA)是一种等温信号扩增方法,其线性扩增倍数为105,指数化扩增能力大于109,产生的扩增产物连接在固相支持物(如玻片、微孔板等)表面的DNA引物或抗体上.RCA是一种适合在芯片上(on-chip)进行信号扩增的新技术,它既能提供研究分析的敏感性和特异性,又能保持立体分析的多元性.RCA亦是一种痕量的分子检...

人内皮抑素基因的克隆以及在大肠杆菌中的可溶性表达研究

作者：冯怡; 张艳红; 朱旭东; 冯玉梅; 马清钧 刊期：2004年第09期

用PCR的方法从人胎肝cDNA文库中得到人内皮抑素基因,克隆测序正确后连接到硫氧还蛋白融合表达载体上,转化大肠杆菌BL21(DE3)得到表达人内皮抑素的工程菌.用IPTG诱导表达,表达量达到全菌蛋白的64%.经分析硫氧还蛋白可以辅助内皮抑素可溶性表达,表达的融合蛋白保持了天然蛋白的免疫学特性.而且表面带有多聚组氨酸的突变的硫氧还蛋白还简化了蛋白纯...

大连蛇岛蝮蛇类凝血酶在大肠杆菌中的表达与纯化

作者：雷旭宇; 杨青; 包永明; 许建强; 栾雨时; 安利佳 刊期：2004年第09期

将编码大连蛇岛蝮蛇类凝血酶(Gloshedobin)的基因克隆于表达载体pET-32a(+)中,以融合蛋白形式在大肠杆菌中获得表达.在25℃下经1mmol/L IPTG诱导6h,SDS-PAGE和蛋白质印迹分析表明,部分融合蛋白以可溶形式存在于大肠杆菌的细胞质中.针对金属螯合亲和层析分离某些含His-标签重组蛋白质时专一性不高,并且存在配基泄漏的缺陷,设计合成了以抗重组类凝...

蚓激酶基因的人工合成及山羊乳腺表达

作者：张守峰; 扈荣良; 范志强; 姚汝强; 梁慧颖; 涂长春 刊期：2004年第09期

为了实现蚓激酶在真核细胞的高效稳定表达,人工合成了全长849bp,不含罕用密码子的蚓激酶F-Ⅲ-1 cDNA序列,并以其为目的基因,构建以山羊β-酪蛋白启动子为上游调控序列的乳腺组织特异性表达载体pBLK和重组逆转录病毒表达载体pLN-bCP-LK.质粒pBLK 400μg直接注入稳定泌乳期奶山羊乳腺,以纤维蛋白平板溶圈法(FAPA)检测奶样纤溶活性.结果显示,注射后3...

猪瘟病毒E2蛋白B／C抗原区基因在毕赤酵母中的表达与鉴定

作者：徐学清; 郑其升; 曹瑞兵; 苏小运; 陈溥言 刊期：2004年第09期

基于猪瘟病毒主要保护性抗原--E2囊膜糖蛋白有两个相对独立的抗原结构单位--B/C抗原区和A/D抗原区,设计引物扩增编码猪瘟病毒E2蛋白B/C抗原区的基因,将大小为261bp的PCR产物插入含有强启动子PAOX1和α-MF信号肽序列的巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)表达载体pPICZαC中,构建成重组质粒pPICZα-BC,酶切线性化后电穿孔导入巴斯德毕赤酵母菌X33中,经Z...

诱导人参发根的rolC基因植物表达载体构建及其在人参中的表达

作者：赵寿经; 李昌禹; 骆晓佩; 钱延春; 战文宗; 孙琳 刊期：2004年第09期

根据Slightom等RiA4TL-DNA序列分析结果,设计了一对引物,以Ri质粒DNA为模板,利用PCR方法对rolC基因进行了扩增.利用pGEM-T载体对rolC基因进行了克隆和测序.结果,克隆的DN段序列与报道的ORF12阅读框内的rolC序列一致.将pGEM-T-rolC用限制性内切酶SacⅠ酶切,与经SmaⅠ酶切CIAP去磷酸化的pUC19质粒重组,经蓝白斑筛选得到正向重组的pUC19-rolC.再用X...

紫杉醇产生菌Nodulisporium sylviforme原生质体诱变研究

作者：赵凯; 周东坡; 平文祥; 邹积宏; 马玺 刊期：2004年第09期

对酶系组成、pH、酶解温度和酶解时间等影响树状多节孢原生质体制备和再生的因素和原生质体诱变进行了研究.结果表明,原生质体制备和再生的最佳条件为:用pH5.5～6.0的0.7mol/L NaCl配制由3%溶壁酶+3%蜗牛酶+1%的溶菌酶+3%纤维素酶组成的复合酶系(1ml酶液/250mg湿菌体),在30℃恒温水浴条件下酶解6h;然后,将获得的原生质体过滤洗涤后,在含0.7mol/L...