摘要：目的：建立高效阴离子交换色谱-脉冲安培检测法（HPAEC-PAD）测定b型流感嗜血杆菌（Hib）结合疫苗的多糖及游离多糖含量。方法：将疫苗中的有效抗原成分—Hib多糖,其结构为多聚磷酸核糖基核糖醇（polyribosylribitol phosphate,PRP）,用6 mol·L-1盐酸进行水解,得到其核糖醇（ribitol）单体;使用Carbo Pac？MA1阴离子交换柱（4 mm×250 mm）,以580 mmol·L-1氢氧化钠溶液为流动相,流速为0.4 m L·min-1,柱温35℃,进样体积100μL,脉冲安培检测器收集信号,核糖醇的含量以峰面积计算得到,再根据核糖醇占PRP干重的质量分数（41.3%）,计算出Hib结合疫苗中PRP及游离多糖（Free PRP）的含量,并评估该方法的重复性和再现性。结果：核糖醇质量浓度在0.0751.05μg·mL-1范围内,与峰面积响应值呈良好的线性关系（r=0.999 9）,最低检测限为2.5 ng·mL-1;标准品供试溶液连续进样6次,峰面积及保留时间的RSD均小于5%;核糖醇加标回收率在80%120%之间;对来自5个企业的4个不同批次的Hib结合疫苗的PRP及Free PRP含量进行测定,结果均符合规定。结论：本方法在测定Hib结合疫苗的PRP及Free PRP含量时,样品前处理简单,分离效果好,且灵敏度高,结果稳定,可靠,对控制该疫苗的质量具有重要意义。

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