杂志简介：《农业生物技术学报》杂志经新闻出版总署批准，自1993年创刊，国内刊号为11-3342/S，是一本综合性较强的科学期刊。该刊是一份月刊，致力于发表科学领域的高质量原创研究成果、综述及快报。主要栏目：研究论文与报告、研究评述与展望、研究资源与技术改进
杂志简介：《农业生物技术学报》杂志经新闻出版总署批准，自1993年创刊，国内刊号为11-3342/S，是一本综合性较强的科学期刊。该刊是一份月刊，致力于发表科学领域的高质量原创研究成果、综述及快报。主要栏目：研究论文与报告、研究评述与展望、研究资源与技术改进
作者：张德福; 戴建军; 吴彩凤; 吴华莉; 刘东; 陈学进; 陈莹; 王凯 刊期：2009年第03期
用体细胞核移植方法生产的克隆猪诞生至今已经8年,虽然同胚胎细胞核移植相比,体细胞核移植技术难度大,成功率低（1%-2%）,但近年来用体细胞核移植技术克隆猪有了较深入的研究,在基本机理和关键技术上取得了一定的进展。结合本实验室近年来的相关研究工作,综述了用核移植方法生产体细胞克隆猪的技术关键和难点及应用情况,并对提高猪体细胞核移植...
作者：童铁钢; 白宇; 王群; 张维军; 刘光亮; 徐树兰; 林燕; 孙庆歌; 杨涛; 吴东来 刊期：2009年第03期
应用实时荧光定量RT-PCR方法评价了大肠杆菌表达的重组马白细胞介素-18（rEIL-18）刺激马外周血单核细胞（PBMCs）产生马IFN-γ（EIFN-γ）的活性。在重组人IL-12（rhIL-12）的协同作用下,rEIL-18在体外刺激马PBMCs产生EIFN-γ的效应是阴性对照的20倍,并且在一定rhIL-12浓度的条件下,rEIL-18在体外诱导马PBMCs产生EIFN-γ的能力呈一定的剂量依赖性。...
作者：张颖; 侯化鹏; 王海瑞; 白莉雅; 杨利国 刊期：2009年第03期
应用噬菌体表面展示技术,从生长抑素免疫的BALB/C小鼠（mus musculus）脾脏中提取总RNA,用RT-PCR技术反转录成cDNA,通过PCR扩增出抗体重链可变区VH基因和轻链可变区VL基因,再用编码（G1y4Ser）3的Linker在体外将VH和VL连接成单链抗体（ScFv）基因,克隆到噬菌粒载体pCANTAB5E中,电转化至感受态的大肠杆菌（Escherichia coli）TG1,经辅助噬菌体M13...
作者：达来宝力格; 金卉; 刘璨颖; 陈焕春; 周锐 刊期：2009年第03期
在筛选胸膜肺炎放线杆菌（Actinobacillus pleuropneumoniae,APP）转座突变体库时,发现hns基因缺失突变可显著增强APP血清1型生物被膜的形成,该基因编码一种DNA结合蛋白（组蛋白样类核结构蛋白,H-NS）。为了进一步研究H-NS对APP生物被膜形成的影响,实验以APP血清1型4074株基因组DNA为模板,PCR扩增了408bp的hns基因编码区,并克隆到原核表达载体pE...
作者：王晓娜; 汪秀星; 赵茹茜; 刘香; 薛春阳; 陈杰 刊期：2009年第03期
在应激敏感品种皮特兰猪和抗应激品种二花脸猪为亲本建立的F2资源群体中选取52头140-150日龄、体重为65±5kg的猪。2h运输应激试验后静脉注射巴比妥钠麻醉屠宰取样。在已知的应激性状QTL座位区域内选择了22个微卫星标记,对各微卫星标记与运输应激后的pH45min、pH24h、嫩度、系水力、蒸煮损失以及肉色评分（1^＊,a^＊,b^＊）6项肉质指标进行了相关...
作者：索永兵; 樊树芳; 邓国华; 温峰琴; 希尼尼根; 陈化兰 刊期：2009年第03期
从含A/duck/FuJian/01/02（W-DKFJ）株病毒的鸡胚尿囊液中提取总RNA,用RT-PCR扩增PB2、PB1、PA、HA、NP、NA、M和NS全基因片段,将其分别克隆至PBD载体中。利用8质粒反向遗传操作系统,将重组的PBD质粒共转染293T细胞,成功拯救了该病毒,并命名为R-DKFJ。106EID50的W-DKFJ和R-DKFJ分别经鼻腔接种BALB/c小鼠后,观察到两组小鼠体重均明显下降,并且在1...
作者：缪明星; 袁玉国; 安礼友; 赵俊辉; 柏亚军; 郭磊; 成勇 刊期：2009年第03期
从人乳铁蛋白cDNA转基因小鼠（Mus musculus）中收集2个品系（PCL25和AP）的乳汁,采用凝胶过滤层析法提取重组人乳铁蛋白（rhLF）,通过SDS-PAGE电泳,Westernblot和ELISA鉴定并检测提取物中rhLF含量,按不同浓度rhLF作琼脂扩散抑制大肠杆菌（Escherichia coli）和沙门氏菌（Salmonella）试验。结果表明,PCL25和AP转基因小鼠乳汁提取物中的rhLF含量...
作者：李彬彬; 邓瑞广; 侯玉泽; 张改平; 赵东; 刘庆堂; 柴书军; 王自良 刊期：2009年第03期
应用分泌抗二氟沙星（DIF）单克隆抗体（DIFmAb）的杂交瘤细胞株建立直接竞争ELISA分析方法。特异性实验结果表明,与达氟沙星的交叉反应率为0.32%,与其它氟喹诺酮类药物和磺胺类药物无交叉反应,该方法对DIF的检测限可达到0.1μg/L,半数抑制浓度IC50为2.2μg/L,线性范围0.1～128.0μg/L,平均批内和批间变异系数小于15%。对牛奶和鸡肉分别添加0.4、2....
作者：张路培; 杨润军; 甘乾福; 许尚忠; 李俊雅; 高雪; 任红艳; 陈金宝 刊期：2009年第03期
以乙肝表面抗原S基因为载体,分别将肌肉生成抑制素（myostatin）N端基因片段（MSTN）和抑制素（inhibin）N端基因片段（INH）分别插入S基因编码的C端和第112~113氨基酸残基密码子之间,构建MSTN-INH融合表达质粒pVAX-SMI。酶切和测序鉴定表明,重组质粒pVAX-SMI构建成功。脂质体法将pVAX-SMI转染HeLa细胞,Westernblot检测重组蛋白的表达,结果表明,...
作者：杨莉; 王鲜忠; 杨孟伯; 张家骅 刊期：2009年第03期
为阐明一氧化氮（NO）对睾丸支持细胞（SC）微管的影响,利用硝普钠（SNP）作为NO供体,通过细胞活性检测、免疫荧光、酶活检测、免疫印迹等方法检测NO对培养仔猪睾丸支持细胞微管结构和分布的影响。结果表明,低浓度NO能维持支持细胞的活力和微管正常的结构;高浓度NO能提高SC内p38丝裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）的活性,降低抗氧化酶的活性、破坏细...
作者：林亚秋; 庄和林; 杨公社 刊期：2009年第03期
采用semi-qRT-PCR、细胞转染、Hoechst33342和吖啶橙（AO）荧光染色、流式细胞术等方法,检测体外培养的猪前体脂肪细胞经维甲酸X受体α（RXRα）的配体9顺式维甲酸（9-cis Retinoicacid,9-cisRA）处理、转染增强型绿色荧光蛋白（pEn-hanced green fluorescent proteinsC2）-RXRα（pEGFPC2-RXRα）重组质粒和化学合成的RXRα-小分子干扰RNA（small in...
作者：刘甲; 何玉龙; 吕品; 孙健红; 张涌 刊期：2009年第03期
应用PCR技术从含有人信号转导及转录活化因子（stat3）基因cDNA的质粒pOTB7中扩增stat3基因片段。将其克隆入真核表达载体pEGFP-C1中,构建重组表达质粒。利用脂质体介导法将重组表达质粒转染原代牛乳腺上皮细胞（bovinemammary epithelial cells）。G418筛选阳性克隆,RT-PCR检测stat3基因在牛乳腺上皮细胞中的表达,并通过流式细胞术（flow cytom...
作者：黄金明; 王长法; 李建斌; 仲跻峰 刊期：2009年第03期
为方便性别鉴定方法在现场应用,利用睾丸特异蛋白基因（TSPY）建立了奶牛早期胚胎的非电泳性别鉴定方法。设计并合成了TSPY雄性特异和雌、雄共有基因引物,并利用已知性别的奶牛血液DNA为模板,初步建立了性别鉴定的PCR反应体系和非电泳的性别鉴定方法。灵敏度试验结果显示,雄性特异引物和共有基因引物对在模板10～60pg时,其性别鉴定的准确率为100...
作者：李晶; 王洪梅; 王长法; 李秋玲; 柳楠; 侯明海; 李建斌; 仲跻峰 刊期：2009年第03期
以中国荷斯坦牛、鲁西黄牛和渤海黑牛为研究材料,利用CRS-PCR、PCR-SSCP及DNA测序技术检测了糖基化依赖细胞黏附分子1基因（GlyCAM1）的遗传多态性。结果表明,在牛GlyCAM1基因外显子3的第2081（A/C）和内含子3的2417（C/T）位点存在突变,两位点在3个牛群中的等位基因频率A/B分别为0.7525/0.2475、0.6112/0.3888和0.3375/0.6625;0.9046/0.0954、0...
作者：刘哲; 吴建平; 马彦男; 朱静; 张利平; 刘晓敏; 张丽 刊期：2009年第03期
采用PCR-SSCP技术,对荷斯坦奶牛及荷斯坦公牛冻精杂交改良的黄牛后代（回交二代）共105头奶牛胰岛素样生长因子结合蛋白3（IGFBP-3）基因内含子2部分序列和外显子3全部序列进行了多态性研究,分析了该基因与奶牛生产性状的相关性。结果表明：IGFBP-3基因第2内含子共存在2个等位基因3种基因型,A、B基因频率为0.7667和0.2333,AA、AB和BB基因型频率...
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