杂志简介：《农业生物技术学报》杂志经新闻出版总署批准，自1993年创刊，国内刊号为11-3342/S，是一本综合性较强的科学期刊。该刊是一份月刊，致力于发表科学领域的高质量原创研究成果、综述及快报。主要栏目：研究论文与报告、研究评述与展望、研究资源与技术改进
杂志简介：《农业生物技术学报》杂志经新闻出版总署批准，自1993年创刊，国内刊号为11-3342/S，是一本综合性较强的科学期刊。该刊是一份月刊，致力于发表科学领域的高质量原创研究成果、综述及快报。主要栏目：研究论文与报告、研究评述与展望、研究资源与技术改进
作者：沈小燕; 丛国正; 常惠芸; 刘湘涛; 谢庆阁 刊期：2008年第05期
为明确口蹄疫病毒（Foot-and-mouth disease virus, FMDV ）持续感染与病毒基因变异潜在关系，研究FMDV持续感染分离株结构蛋白VPI和非结构蛋白3ABC基因在牛体内的动态变化。实验用O／Akesu／58毒株以10^4ID50/mL剂量舌面穿刺接种5头黄牛，出现临床或亚临床症状后痊愈动物会成为可能的FMDV带毒牛。用探杯定期采集实验牛咽喉部黏性液体（O／P液）...
作者：贾松涛; 闫若潜; 崔保安; 吴志明; 张志凌; 张健; 赵雪丽 刊期：2008年第05期
为了研究猪圆环病毒2型（ Porcine circovirus type 2 ,PCV2 ）核酸疫苗，采用重叠延伸PCR（splicing by overlap extension-PCR, SOE-PCR） 方法通过一基因柔性接头（linker）（G4S）3，将PCV2的ORF2全长基因和猪白介素2成熟肽基因（PoIL-2）构建成PCV2-linker-PoIL-2嵌合基因并克隆人pcDNA3．1（＋）真核表达载体中；筛选阳性重组表达质粒（rp...
作者：潘华奇; 曹瑞兵; 王楠; 刘丽; 刘磊; 胡江春; 陈溥言; 王书锦 刊期：2008年第05期
在分析鸭瘟病毒（Duck plague virus, DPV ）gB蛋白抗原性的基础上，设计1对引物克隆gB蛋白N端抗原性较好的抗原域编码基因，克隆到表达载体pET32a中，构建了原核表达质粒pET-gB1。将pET-gB1转化到感受态大肠杆菌（ Escherichia coli ） BL21（DE3）中，经IPTG诱导和SDS-PAGE分析，可见约42．4kD的目的蛋白以包涵体形式表达。Western blot分析发...
作者：史利军; 吕茂民; 孙卫华; 尹惠琼; 黎诚耀; 章金刚 刊期：2008年第05期
建立了一种实时荧光定量PCR快速检测西尼罗病毒（ West nile virus, WNV）的方法。通过序列比对和blast分析，确定WNV Caspid蛋白保守区基因为检测的目的基因，引物采用Primer Premier5．0软件设计。利用成本相对较低的SYBR Green Ⅰ染料法建立WNV核酸检测方法。通过对标准品的扩增、测序及对标准扩增曲线的绘制，建立WNV核酸检测体系。同时对建...
作者：吴成龙; 史成银; 黄倢; 孔晓瑜 刊期：2008年第05期
大菱鲆红体病虹彩病毒（Turbot reddish body iridovirus, TRBIV）可引起大菱鲆病毒性红体病（viral reddish body syndrome, VRBS）并导致养殖大菱鲆（ Scophthalmus maximus） 大量死亡。研究利用TRBIV主要衣壳蛋白基因序列设计的1对引物，结合内嵌式核酸染料SYBR Green Ⅰ，建立了TRBIV特异的Real-time PCR检测方法。以10倍梯度稀释的含有TRB...
作者：彭秀丽; 高俊伟; 胡思顺; 胡福利; 毕丁仁 刊期：2008年第05期
利用pGEX融合蛋白表达系统，将鸡毒霉形体（Mycoplasma gallisepticum）黏附蛋白（pMGA）在大肠杆菌（Escherichia coil ）BL21中表达，经GST·Bind Resin纯化，用蛋白酶Thrombin切掉glutathione-S-transferase（GST）标签，获得纯度为96％的pMGA，Western blot鉴定具有良好的免疫学活性。通过间接免疫荧光组织化学法（IFA）检测pMGA与SPF鸡胚的...
作者：王军; 邓昌彦; 熊远著; 左波; 李凤娥; 雷明刚; 郑嵘 刊期：2008年第05期
快肌肌浆球蛋白轻链2（fast skeletal myosin light chain 2,HUMMLC2B 或 MYLPF）是一种钙结合蛋白，参与多种生命活动。实验获得克隆猪HUMMLC2B基因（GenBank登录号：DQ533994），并采用PCR．RFLP技术，分析了HUMMLC2B基因第1内含子中的MspⅠ酶切多态（T613C）在7个品种猪中的多态性分布；分析了多态性与36头长白猪、5个群体104头猪以及长自和5...
作者：郑喜邦; 云彦; 胡勇策; 王华岩; 窦忠英 刊期：2008年第05期
从6周龄的胎牛（Bos taurus）原始生殖嵴中提取总RNA，通过RT-PCR扩增nanog基因，将其克隆到PMD-18T载体，然后再亚克隆到pGEX-KG表达载体上，获得原核表达质粒pGEX-KG-nanog，限制性内切酶分析和DNA测序证明所插入片段为牛nanDg基因编码序列。重组质粒转化大肠杆菌JM109（Escherichia coli），在不同的培养温度（25、30和37℃）和不同浓度的IPT...
作者：陈丽颖; 范沛; 杨国宇; 韩立强; 赵瑞丽; 乔新安; 林茂旺; 李海霞; 王艳玲 刊期：2008年第05期
根据GenBank公布的猪新生儿Fc受体（FcRn）重链（α链）mRNA基因保守序列，设计并合成带地高辛标记的原位杂交试验用cDNA探针。经仔猪小肠冰冻组织切片最佳厚度选择、小肠组织中内源性辣根过氧化物酶祛除等试验条件优化，建立了利用地高辛标记探针检测仔猪小肠FcRn mRNA表达的原位杂交方法。结果显示，在仔猪十二指肠、空肠和回肠组织的小肠腺和...
作者：徐芊; 孙晓红; 赵勇; 潘迎捷 刊期：2008年第05期
副溶血弧菌（ Vibtio parahavmolyticus）是一种重要的食源性致病菌。首次将环介导等温扩增技术（loop-mediated isothermal amplification, LAMP）应用于副溶血弧菌的快速检测。针对副溶血弧菌不耐热溶血毒素基因（t1h）设计4条特异性引物，建立了副溶血弧菌LAMP检测方法，1h即可完成。对12种细菌共28株菌进行LAMP扩增，仅副溶血弧菌得到阳性结...
作者：李旦; 王加启; 卜登攀; 谷峻; 魏宏阳; 周凌云 刊期：2008年第05期
采用Real-time PCR技术对瘤胃液中3种功能菌即脂解厌氧弧杆菌 （ Anaerovibrio lipolytica, AL ），产琥珀酸丝状杆菌（ Fibrobacter succinogene, FS）和黄色瘤胃球菌（ Ruminococcus flavefaciens, RF）的16SrDNA基因拷贝数进行测定，并建立起反映瘤胃液中3种功能菌的数量的方法。结果表明，不同个体动物间的3种功能菌的数量在相同时间点的差...
作者：王公金; 谭晓东; 周晓龙; 徐小波; 于建宁; 范必勤 刊期：2008年第05期
通过对屠宰场废弃的猪卵巢卵母细胞进行体外成熟培养（IVM）获得成熟卵母细胞，对体外培养成熟卵母细胞第1极体（Pb1）排出、活性及其形态学进行了统计分析；分别采用酶消化和显微操作两种方法进行了Pb1分离与采集，继而进一步结合台盼蓝细胞染色法，探讨了不同温度保存条件下Pb1存活情况。结果表明：卵泡卵母细胞IVM 40h后发现大量高活性Pb1；...
作者：贾淑玲; 刘利杰; 彭树英; 何玉龙; 何小宁; 张涌 刊期：2008年第05期
为了为核移植法制作转人溶菌酶基因克隆牛提供供体细胞，研究体外分离培养牛皮肤成纤维细胞并进行了人溶菌酶基因转染。首先采用组织块贴壁法分离培养牛耳成纤维细胞，经传代纯化后，脂质法将含有双重筛选标记的人溶菌酶乳腺特异性表达载体转人体外培养的第4代牛皮肤成纤维细胞，500μg/mL G418筛选2周，G418减半继续培养2～3代，然后对转染筛选...
作者：王晗; 窦忠英; 王华岩 刊期：2008年第05期
取人羊水标本进行羊水干细胞原代，分离培养，并探讨人羊水标本性状等因素对原代分离培养的影响。结果表明，分离的羊水干细胞表达Oct-4等胚胎干细胞和CD29等成体干细胞的特异基因，细胞生长迅速，增殖能力较强，并可分化为Nestin阳性的神经细胞和α-actin阳性的心肌细胞。同时，在羊水干细胞原代培养时，羊水标本性状在一定程度上影响细胞的贴壁...
作者：彭银辉; 刘楚吾; 郭昱嵩; 刘丽; 王中铎 刊期：2008年第05期
利用微卫星标记技术，采用10对微卫星引物对南海海域红鳍笛鲷（Lutjanus erythopters）、星点笛鲷（L．stcllatus）和紫红笛鲷（L．argentimaculatus）3种笛鲷鱼的野生种群（HYE、XYE和ZYE）和养殖种群（HYA、XYA和ZYA）进行了遗传多样性分析。10对微卫星引物在6个群体中共检测到78个等位基因，每个位点的等位基因数目在1～8个之间。6个群体的观...
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