作者:贾泽艳; 周操; 曾庆会; 石敏; 杨洪; 金道超 期刊:《中国生物防治学报》 2020年第01期
细胞色素P450属于超基因家族,与昆虫对杀虫剂抗药性产生有重要关系。本文在白背飞虱转录组数据的基础上,克隆到了两个P450基因,分别命名为SfCYP4DE1和Sf CYP353D1v2,其分别编码534和471个氨基酸,分子量约为61.567和53.762 kDa,理论等电点为9.18和8.74。结构域分析发现,SfCYP4DE1和SfCYP353D1v2氨基酸序列中均包含5个P450基因共有序列。噻虫嗪、噻嗪酮和阿维菌素的LC10、LC25、LC50和LC904个不同浓度处理白背飞虱3龄若虫48h后,采用R...
作者:刘莉; 裴磊; 卫云宗 期刊:《分子植物育种》 2020年第01期
干旱缺水等自然灾害会导致小麦产量年度间变幅较大,尤其在小麦主产区黄淮地区更为严重。小麦抗旱节水育种是应对干旱的重大措施。本综述对小麦抗旱节水常规育种、抗旱节水分子遗传育种相关性状QTL定位、抗旱相关功能基因克隆鉴定、转基因等方面的研究进展进行了综述。水旱亲本杂交与异地交叉选择是卓有成效的常规育种方法,通过分子标记鉴定了关于根重、根长、胚芽鞘、高水分利用效率等相关性状的大量QTL;42个抗旱相关基因被克隆并...
作者:程慧; 秦垦; 曹有龙; 李彦龙; 段安安; 段淋渊; 周军; 戴国礼 期刊:《分子植物育种》 2019年第24期
本研究通过‘宁杞1号’和‘宁杞3号’S-RNase基因全长序列的克隆和荧光定量表达分析,为分子手段调控宁夏枸杞自交不亲和性状提供了参考,为‘宁杞1号’自交亲和的分子机理研究以及自交亲和品种的选育提供科学依据。以‘宁杞1号’和‘宁杞3号’为试材,利用特异性PCR扩增技术,从花柱基因组DNA中克隆S-RNase基因全长,并进行生物信息学分析;运用实时荧光定量(qRT-PCR)技术分析S-RNase表达量的变化。克隆到S-RNase基因,暂分别命名为S-BAR...
作者:理挪; 林思祖; 张健; 张家君; 吕蒙; 陈宇 期刊:《分子植物育种》 2019年第24期
类固醇5α-还原酶(DET2)是BR生物合成的限速酶,是调控油菜素内酯生物合成的关键基因。为了了解油菜素内酯(BR)生物合成途径中限速酶DET2的作用,本研究以杉木低涩籽率家系L为材料,采用RTPCR法从杉木中克隆获得一个转录因子基因并命名为ClDET2。分析发现,该序列包含一个长度为840 bp的CDS基因序列(开放阅读框),编码215个氨基酸,系统进化树分析显示,ClDET2与NCBI数据库中注释的北美云杉DET2基因亲缘关系最近。通过对ClDET2基因在种子发...
作者:李国明; 宗渊; 席杏媛; 刘明慧; 丁艳慧; 郭李智; 曹东; 毛成志; 李建民; 刘宝龙 期刊:《分子植物育种》 2020年第01期
为了研究蓝粒小黑麦糊粉层中控制花青素合成的关键基因BcMYC1。本研究使用PCR方法克隆小黑麦中MYC转录因子BcMYC1。结果表明,小黑麦BcMYC1基因全长1683 bp,编码的氨基酸560个,分子量61870 Da,等电点4.71,有两个属于bHLH超级因家族的保守区,该蛋白具有亲水性,二级结构以α-螺旋(39.64%)和不规则盘绕(43.93%)为主要的部分,BcMYC1蛋白质不通过跨膜区,在膜外进行作用。蛋白系统进化分析表明,小黑麦的BcMYC1基因与小麦、矮牵牛、水稻等物...
作者:陈莹; 潘王韵; 林思祖 期刊:《分子植物育种》 2019年第24期
为了对金线兰查尔酮合成酶CHS和黄酮醇合成酶FLS进行基因的克隆和生物学信息分析,本研究参照测序得到的金线兰CHS与FLS基因的序列,设计特异性引物进行扩增。利用软件,对金线兰CHS和FLS蛋白的生物信息进行预测分析。结果显示,金线兰CHS基因的CDS总长度1 185 bp,编码394个氨基酸,金线兰FLS基因的CDS总长度1 035 bp,编码344个氨基酸。金线兰CHS蛋白与FLS蛋白皆是酸性、亲水性、无信号肽、非分泌、非跨膜蛋白,亚细胞定位在其他细胞器上...
作者:孟森; 马海宾; 王胜坤; 李振双; 赵忠; 陆俊锟 期刊:《西北植物学报》 2019年第12期
植物Rboh基因家族编码产生活性氧(ROS)的NADPH氧化酶。了解半寄生植物檀香(Santalum album Linn.)基因Rboh相关信息和表达特性,可为研究檀香SaRbohA基因通过活性氧信号(ROS)调控吸器发育的响应提供理论依据。该研究以全长转录组测序为基础,通过序列拼接设计合成基因特异引物,从根中克隆获得了1个檀香respiratory burst oxidase homolog(Rboh)基因cDNA全长,命名为SaRbohA。序列分析表明,该基因cDNA全长2 790 bp,编码929个氨基酸,分...
作者:黄汉唐; 徐玉; 佘文琴; 潘东明; 潘腾飞 期刊:《西北植物学报》 2019年第12期
为了探究CmCAD基因在‘三红蜜柚’果实发育过程中的作用与表达规律,该研究以‘三红蜜柚’果实为材料,利用反转录PCR技术克隆获得3个‘三红蜜柚’CmCAD基因,分别命名为CmCAD1、CmCAD3和CmCAD4。对这3个基因所编码的蛋白进行了生物信息学分析,研究了它们在不同品种蜜柚及‘三红蜜柚’果实生长发育阶段的表达模式。结果表明:克隆得到的3个CmCAD基因cDNA长度分别为1 032 bp、1 080 bp和1 071 bp,编码344、360和357个氨基酸;生物信息分...
作者:吴杰新; 刘小珍; 叶琴霞; 张汉尧 期刊:《食品工业科技》 2020年第01期
目的:克隆CAD1基因,对其结构和功能进行预测,为后期研究利用该基因用于重金属镉的解毒作用及其他有毒物质的抗性研究打下基础。方法:使用PCR技术对酿酒酵母BZL06的CAD1基因序列进行全长克隆,再对其进行染色体定位和亲缘关系分析,使用在线分析工具ExPASy、ProtParam等对其编码蛋白质的一级结构、二级结构、三级结构、结构域和蛋白互作进行预测分析。结果:该CAD1基因位于Ⅳ染色体1318046~1319275;全长1230 bp,可编码409个氨基酸,亲缘...
作者:胡金双; 黄燕燕; 陈思敏; 邝嘉华; 赵珊; 彭鑫; 刘冬梅 期刊:《食品工业科技》 2020年第06期
为研究蜡样芽孢杆菌LJ01(Bacillus cereus LJ01)中亚硝酸盐还原酶(NiR)的酶学性质,获得高表达量的基因工程菌,本文对B.cereus LJ01的NiR序列进行了生物信息学分析,并将NiR基因克隆到表达载体pET-28a(+)和pET-32a(+)中,构建了基因工程菌pET-28a(+)-nir-BL21和pET-32a(+)-nir-BL21,随后探究了不同诱导条件对重组NiR表达量的影响。结果表明NiR编码蛋白的理论分子量约为60 kDa,理论pI为5.47,二级结构主要为α-螺旋和无规则卷曲,是不具有...
作者:吴婷; 李霞; 黄凤林; 胡标林 期刊:《中国稻米》 2020年第01期
锌是人体健康所必需的微量元素之一,水稻是世界上主要的粮食作物,稻米尤其是精米中的锌含量非常低,提高稻米锌含量能有效缓解人体锌缺乏症。本文综述了稻米锌含量的遗传变异,稻米不同部位锌的分布模式、遗传模式、QTL定位、基因克隆及育种进展,为水稻富锌分子育种提供重要参考。
作者:周坤能; 夏加发; 云鹏; 王元垒; 马廷臣; 张彩娟; 李泽福 期刊:《中国农业科学》 2020年第06期
【目的】克隆水稻直立短穗基因Erect and Short Panicle(ESP),分析其参与的基因调控途径,解析ESP控制株型、穗长等农艺性状的分子机理。【方法】以直立短穗突变体esp及其野生型为材料,成熟期进行株高、穗长、粒长等表型测定;构建籼粳杂交F2定位群体,挑选与突变表型一致的F2单株,利用与突变性状连锁的分子标记对目的基因进行定位;对野生型和突变体进行基因组测序,结合定位结果,找到突变位点,克隆ESP;利用生物信息学软件进行进化树和...
作者:浦月霞; 冉艳萍; 杨东英; 龚美霞; 刘龙山; 唐顺明 期刊:《广西蚕业》 2018年第02期
野蚕是重要的吐丝类鳞翅目昆虫,在不同的功能和抗性上表现优势。本文概述了野桑蚕、柞蚕、蓖麻蚕、柳蚕及其他野蚕基因的克隆研究进展,阐明了部分野蚕基因的特性及表达情况,比对野蚕和家蚕的氨基酸序列,分析亲缘关系,以便开展目标明确的分子育种,缩短育种进程,并且对野蚕基因克隆研究发展前景进行分析和展望,作为进一步研究的参考。
作者:康峰; 苏广华; 苏建国; 段彪; 王子东; 李光鹏 期刊:《中国牛业科学》 2011年第05期
[目的]克隆牛的卵泡抑素基因(Follistatin,FSTN)基因,构建真核表达载体。[方法]用Trizol法从牛的卵巢中提取总RNA,反转录成cDNA,用带有酶切位点牛FSTN的特异性引物扩增其完整编码区序列,连接到T载体、测序,序列无误后亚克隆入真核表达载体pIRES2-AcGFP1中,酶切及PCR鉴定载体。[结果]经酶切及PCR鉴定表明成功构建了真核表达载体pIRES2-AcGFP1-FSTN。[结论]成功构建了真核表达载体pIRES2-AcGFP1-FSTN,为促进肌肉生长的转基因优质肉...
作者:唐立刚; 杨东英; 殷宏; 罗建勋; 欧阳五庆 期刊:《中国牛业科学》 2004年第02期
参照牛皮蝇Hypodermin B(HB)基因的核苷酸序列,设计一对引物,以牛皮蝇总RNA为模板利用RT- PCR扩增牛皮蝇HB基因,并对扩增基因进行克隆测序.序列分析表明,克隆的牛皮蝇HA基因与GenBank 中已经登录的核苷酸和氨基酸序列的同源性分别为97.2%和99.3%.同时,将该基因与原核表达载体PGEX-4T-1连接,构建并获得阳性重组表达载体.
作者:郭成栓; 崔堂兵; 郭勇 期刊:《生物资源》 2007年第01期
碱性纤维素酶是重要的洗涤剂添加剂,不仅可以去除衣物上的污渍,还可以软化衣物和增加衣物的鲜艳度。嗜碱芽孢杆菌是生产碱性纤维素酶的主要菌种。本文概述了其编码的碱性纤维素酶的性质,编码酶的基因、基因的克隆、表达以及作为洗涤剂添加剂的去污机理,指出了今后的研究方向。
作者:卢毅弘; 彭彦峰; 周玉玲; 张桂敏 期刊:《生物资源》 2014年第03期
木聚糖酶用于造纸行业可以显著改善纸浆的性能,减少纸张处理过程中有害化学试剂的使用,从而减轻环境污染,提高纸张品质,因此在造纸工业中具有广阔的应用前景。本文从造纸用碱性木聚糖酶基因的克隆、分子改造、高效表达及在造纸行业的应用研究等方面出发,对造纸用碱性木聚糖酶的研究现状进行综述,为开发造纸用木聚糖酶提供了思路。
当全世界在关注着是否能进行人类胚胎的克隆时,克隆的骡子已经悄然来到了我们身边。
作者:王国泽; 方杰; 王志国; 宋洁; 贾晋 期刊:《内蒙古科技大学学报》 2019年第04期
地稍瓜是一种利用价值极高的野生植物,但是地稍瓜采后不易保存,极易腐烂,货架期短,严重限制了其开发利用.细胞壁降解是引起植物果实腐烂的主要原因之一.β-葡萄糖苷酶和多聚半乳糖醛酸酶在细胞壁降解中起关键作用.实验首先从地稍瓜转录组测序结果中筛选出这2个酶的cDNA全长序列并设计特异性引物,然后以地稍瓜的cDNA为模板,进行RT-PCR扩增,扩增产物经测序后,得到它们cDNA序列,长度分别为1311 bp和1434 bp,经Blast分析结果表明:成功克...
作者:李璐; 董诚明; 张梦佳; 朱畇昊 期刊:《广西植物》 2019年第12期
该研究在夏枯草转录组测序的基础上设计特异引物,采用逆转录PCR技术获得该基因的全长核苷酸序列,并进行生物信息学分析,采用qRT-PCR法分析PvDXS在夏枯草不同组织及不同外源性物质诱导下的表达量。结果表明:克隆得到的PvDXS基因开放阅读框2181 bp,编码726个氨基酸,理论分子量为78040.47 D,等电点为6.75,PvDXS蛋白具有Transketolase_C结构域和Transket_pyr结构域,系统进化树结果表明,PvDXS蛋白与丹参、长春花的DXS(SmDXS2、CrDXS2)亲...