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宿主基因TBL1XR1沉默对水疱性口炎病毒复制的影响

作者：孙诗惠; 王仁铃; 宋德光; 贺文琦; 高丰; 关继羽 刊期：2019年第12期

为揭示转导蛋白(β)样1X连接受体1(TBL1XR1)对水疱性口炎病毒(VSV)复制的影响,首先设计并构建沉默TBL1XR1的shRNA表达载体,并以其作为包装慢病毒的穿梭质粒,同骨架质粒共转染239T细胞后,成功包装出表达shTBL1XR1的慢病毒颗粒。以慢病毒感染小鼠巨噬细胞RAW264.7并建立TBL1XR1表达沉默的细胞系,同时构建不靶向任何基因的对照细胞系。最后,用VSV感...

猪伪狂犬病病毒变异毒株gE和gB蛋白单克隆抗体的制备与鉴定

作者：李艳华; 王寅彪; 李青梅; 解伟涛; 郭成留; 郭军庆; 邓瑞广; 张改平 刊期：2019年第12期

为建立猪伪狂犬病病毒(PRV)疫苗免疫抗体与病毒感染抗体鉴别诊断方法,分别以PRV变异毒株的gE或gB重组蛋白免疫BALB/c小鼠,将免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,经免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)筛选所需单克隆抗体,获得6株抗PRV gE蛋白的单抗(3E6、7E1、7C5、10C3、15C1、14C1)和6株抗PRV gB蛋白的单抗(1C1...

猪德尔塔冠状病毒荧光定量PCR检测方法的建立与应用

作者：张世亨; 黄海鑫; 尹彦文; 施开创; 郑敏; 汪伟; 曹亮; 赵翠青; 刘立明; 鲁会军; 孙文超; 金宁一 刊期：2019年第12期

猪德尔塔冠状病毒(porcine delta coronavirus,PDCoV)是2012年中国香港首次发现的冠状病毒,能引起感染仔猪水样腹泻,最终脱水死亡。研究根据PDCoV保守的衣壳蛋白基因(N)序列设计特异性引物,建立荧光定量PCR检测方法。结果表明,该方法在6.31×10^6~6.31×10^1copies/μL,Ct与模板浓度之间具有良好的线性关系,斜率为-4.90,相关系数为0.999。所有标准...

塞内卡病毒Taqman实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用

作者：陈鑫; 莫红芳; 刘文强; 李祥敏; 陈焕春; 金梅林; 钱平 刊期：2019年第12期

根据对GenBank中2015-2017年登录的18株国内塞内卡病毒(SVV)基因组序列比对分析结果,设计合成1对针对SVV 5’UTR区域的特异性引物和Taqman探针,通过优化荧光定量PCR反应条件,建立一种定量检测SVV的Taqman实时荧光定量PCR检测方法。该方法定量检测范围在10~109 copies/μL,检测下限为10copies/μL,比常规PCR检测灵敏度高约1000倍,同时检测口蹄疫病...

塞内卡病毒和口蹄疫病毒二重实时荧光RT-PCR鉴别检测方法的建立

作者：谢彩华; 闫若潜; 班付国; 王东方; 赵雪丽; 赵兴绪; 闫志玲; 王翠; 刘影; 王淑娟; 马震原; 王华俊 刊期：2019年第12期

为了建立一种快速、敏感、特异的能够鉴别诊断口蹄疫病毒(FMDV)和塞内卡病毒(SVV)二重实时荧光RTPCR方法,根据FMDV及SVV的保守基因序列,设计了2套特异性引物和不同荧光素标记的MGB探针。通过对PCR反应体系和反应条件的优化筛选,建立了FMDV和SVV二重实时荧光RT-PCR检测方法,并对二重实时荧光RT-PCR检测方法进行了特异性、敏感性、重复性试验;利用...

牛环曲病毒RT-PCR检测方法的建立及应用

作者：师志海; 徐照学; 兰亚莉; 王文佳; 孟红丽; 王亚州 刊期：2019年第12期

为建立牛环曲病毒快速检测方法,针对牛环曲病毒的保守区域S基因设计合成1对特异性引物,建立了检测牛环曲病毒的RT-PCR方法,并对其进行了敏感性、特异性和重复性检测。结果显示,仅牛环曲病毒阳性模板扩增得到698bp大小的目的条带,测序结果与GenBank中牛环曲病毒S基因序列(登录号:MG957145.1)的同源性为97%。敏感性试验显示,该方法能检测到的最低...

鸭呼肠孤病毒感染雏鸭后炎症因子与脾脏损伤之间的动态关系

作者：刘波; 朱旭; 赵赫; 谷长勤; 张万坡; 程国富; 胡薛英 刊期：2019年第12期

分析鸭呼肠孤病毒(DRV)人工感染雏鸭后病毒的复制、NF-κB、TNF-α、IL-6与脾脏损伤之间的动态关系,初步探讨DRV感染机制和病毒与宿主之间的作用关系,为DRV致病机制的研究提供一定理论基础。运用HE染色对脾脏损伤程度进行分级,免疫组化定位病毒所在位置,并运用qRT-PCR检测分析DRV、NF-κB、TNF-α及IL-6的相对表达量。HE染色结果显示,DRV感染后1d脾...

表达鹅细小病毒VP3基因的重组新城疫病毒安全性及免疫效果评价

作者：钦琪; 肖跃强; 王建忠; 徐小洪; 丁佳欣; 李金斗; 王玮琦; 丁壮 刊期：2019年第12期

新城疫(Newcastle disease,ND)和鹅细小病毒病(goose parvovirus infection,GP)对养鹅业产生了严重危害,为了防控这2种疾病,利用反向遗传操作系统构建表达鹅细小病毒VP3基因的重组新城疫病毒rmNA-VP3,通过超剂量接种试验及攻毒保护试验对重组病毒rmNA-VP3进行安全性检测及免疫效果评价。结果可见,rmNA-VP3超剂量接种雏鹅后,未引起雏鹅胃及肠组织...

鸭疫里默氏杆菌类似crp基因的鉴定及其突变株对雏鸭免疫

作者：刘青; 卞晓萍; 唐一波; 王豪举 刊期：2019年第12期

CpxR对鼠伤寒沙门菌连接蛋白基因pmrD的调控作用

作者：翟亚军; 魏单单; 梁军; 刘营营; 贺丹丹; 吴华; 苑丽; 胡功政 刊期：2019年第12期

前期发现黏菌素对鼠伤寒沙门菌acrB和cpxR双缺失后的cpxR回补株JS△acrB△cpxR::kan/pcpxR(JS△△/pR)的MIC值较标准株JS显著下降了16倍,且JS△△/pR中PhoPQ和PmrAB之间的连接蛋白基因pmrD的表达量显著降低。为探索cpxR对pmrD的调控作用,本研究构建了pmrD的单基因过表达菌株JS△acrB△cpxR::kan/ppmrD(JS△△/pD),并用overlapping PCR扩增得到cp...

新西兰兔产气荚膜梭菌性腹泻引起的脏器损伤和肠道菌群分析

作者：陈端端; 刘伟; 孟德志; 许文萍; 杨玲玲; 柴同杰; 王海荣 刊期：2019年第12期

为了解新西兰兔细菌性腹泻引起的脏器损伤和肠道菌群变化,从山东省莒南县某兔场,45~50日龄腹泻兔肝、脾中分离鉴定其病原菌,并对病兔肠道菌群(主要是盲肠内容物)进行宏基因组高通量16SrRNA检测,分析肠道菌群变化;免疫组化分析病兔肝、脾、胃以及肠道α毒素分布。结果显示,兔腹泻病例的主要病原为A型产气荚膜梭菌;感染动物的肝、胃和肾中有明显的α...

捻转血矛线虫Hc-TTR-51蛋白的定位及功能

作者：黄晓翠; 时恒枝; 陈学秋; 黄艳; 周静茹; 吴飞; 杨怡; 杜爱芳 刊期：2019年第12期

捻转血矛线虫(Haemonchus contortus)是最重要的家畜寄生虫之一。已报道秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans)转甲状腺素蛋白(transthyretin,TTR)参与虫体细胞间的相互作用。目前捻转血矛线虫转甲状腺素蛋白(Hc-TTR-51)的定位及功能尚未见报道。研究首先克隆捻转血矛线虫Hc-ttr-51基因,然后分析其蛋白在捻转血矛线虫、HEK 293T细胞内的定位情况...

基于马梨形虫地方虫株EMA和Bc48基因蛋白抗原的间接ELISA检测方法建立及其应用

作者：王莉君; 宋瑞其; 呼尔查; 吾力江·卡马力; 樊新丽; 党娜娜; 巴音查汗 刊期：2019年第12期

新疆伊犁地区包虫病流行病学调查及重点县家畜感染包虫的基因型

作者：玛依拉·艾尼瓦; 马力克; 王冰洁; 钟旗; 闫昊; 马站; 李威; 吕丽丽; 张壮志 刊期：2019年第12期

X射线照射后对细粒棘球绦虫原头蚴体外培养成囊率的观察

作者：吴戈; 毛睿; 张文宝; 李军; 路鹏霏; 齐洪志; 姜涛; 李海涛; 尚革; 许林; 张华 刊期：2019年第12期