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猪细小病毒7型SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测方法的建立及临床样品的检测

作者：赵冠宇; 解长占; 孙文超; 张赫; 那少龙; 李卓昕; 张涵; 李成辉; 哈卓; 李金凤; 韩继成; 南福龙; 庄忻雨; 张英; 金宁一 刊期：2019年第10期

采用PCR方法扩增猪细小病毒7型(PPV7)衣壳蛋白基因保守区域493 bp,将其克隆到pMD18-T载体,构建重组质粒作为标准阳性质粒,以其为模板建立用于检测PPV7的SYBR GreenⅠ实时PCR检测方法,并验证其灵敏性、特异性和重复性。结果表明,本试验建立的SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法在2.85×10^1~2.85×10^8拷贝/μL呈良好的线性关系,相关系数为0.995,斜率...

浙江金华地区PCV2分子流行病学调查及遗传变异分析

作者：吴明臻; 江云波; 敖超杰; 于学祥; 库旭钢; 陈芳洲; 孙琪; 吴昊; 何启盖; 赵青 刊期：2019年第10期

猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2,PCV2)主要引起猪的多系统功能障碍性疾病,同时,还可侵害猪的免疫系统,造成猪免疫抑制,容易继发细菌及其他病毒感染,大大增加猪群的死亡率。为了解PCV2在浙江金华猪群中的分布与流行状况以及PCV2变异规律,对从浙江省金华猪场收集的3 433份血清进行PCR检测,结果显示,2012-2018年PCV2阳性率分别为10.16%,1...

广西3株牛源PCV2全基因组克隆与序列分析

作者：孙文超; 汪伟; 辛佳亮; 张世亨; 黄海鑫; 曹亮; 郑敏; 张红云; 韦显凯; 鲁会军; 金宁一 刊期：2019年第10期

为研究广西地区牛源PCV2流行毒株基因组特性和遗传进化情况,运用PCR技术对广西地区采集的210份牛血清进行检测,结果其中35份样品为PCV2阳性。将3份阳性样品进行全基因组克隆与序列分析,分别命名为PCV2/GX-B2(1 769 nt)、PCV2/GX-B131(1 768 nt)、PCV2/GX-B132(1 767 nt)。同源性显示与猪DK1980PMWS-free株同源性最低(94%),与牛源的Buffalo2株同...

Tubacin对蓝舌病毒感染的抑制作用

作者：陈新; 曹雨; 薄宗义; 陈欢; 孙雯; 张志芳; 印春生; 钱莺娟; JUNG; Yong-sam; 戴建君 刊期：2019年第10期

蓝舌病(bluetongue,BT)是由蓝舌病毒(bluetongue virus,BTV)感染反刍动物,包括山羊、绵羊、水牛和骆驼等,引起的非接触性传染病,以口腔、鼻腔及胃黏膜发生溃疡性炎症病变为主要特征,库蠓是其主要传播媒介。BTV传播相当广泛,除了南极洲外的所有洲都有发现,近20年间在欧洲肆虐传播,造成了巨大的经济损失。目前发现的BTV包含26个血清型,型间没有交...

塞内卡病毒A(SVA)VP1间接ELISA抗体检测方法的建立及应用

作者：范慧; 曾洁; 李亮; 李仕海; 张盼盼; 延君芳; 姜平; 白娟 刊期：2019年第10期

为建立快速检测塞内卡病毒A (Senecavirus A,SVA)血清学方法,以纯化的重组VP1蛋白作为包被抗原,建立了SVA VP1间接ELISA抗体检测方法。结果表明,VP1蛋白以包涵体形式表达,纯化后的蛋白经Western blot鉴定具有较好的反应原性。该ELISA检测方法阴、阳性临界值为0.278,与口蹄疫病毒(FMDV)、脑心肌炎病毒(EMCV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪瘟病毒(CSFV...

鸡源SUMO标签蛋白的鉴定及在IBDV VP2原核表达中的促溶功能

作者：辛波; 徐琼; 李思洁; 任东兴; 吕传忠; 孙阳阳; 付旭彬; 黄灿平; 鲍恩东 刊期：2019年第10期

VP2蛋白是传染性法氏囊病病毒(infectious bursal disease virus,IBDV)的保护性抗原。原核表达中能否获得具有天然构象的可溶性VP2蛋白是研发IBD亚单位疫苗的关键问题。为了解是否存在鸡自体促溶标签蛋白以及外源促溶标签能否在一定程度上促进蛋白的正确折叠,试验对不同物种来源的类泛素蛋白修饰分子(small ubiquitin-like modifier,SUMO)进行比...

mTERT和mTyr双启动子联合调控HN基因重组腺病毒对B16动物模型的抑瘤作用

作者：孟佳丽; 龙雨清; 林静; 李昕; 尚翠玲; 王小月; 蓝肇煜; 李丹; 金天明 刊期：2019年第10期

为探讨双启动子调控HN基因重组腺病毒Ad-mTERTp-mTyrp-HN对小鼠黑色素瘤动物模型的抑瘤作用,试验构建B16裸鼠皮下移植瘤模型,采用HEK293细胞扩增重组腺病毒,进行纯化和滴度检测。将重组腺病毒Ad-HN、Ad-mTERTp-HN、Ad-mTyrp-HN、Ad-mTERTp-mTyrp-HN、Ad-GFP和PBS通过尾静脉注射裸鼠,冰冻切片观察裸鼠肿瘤内GFP绿色荧光表达情况,通过肿瘤生长和裸...

247株猪源沙门菌对四环素类药物耐药性和耐药基因的检测分析

作者：李帆; 魏单单; 刘建华; 吴宁鹏; 贺丹丹; 潘玉善; 苑丽; 胡功政 刊期：2019年第10期

为探究猪源沙门菌分离株对四环素类抗菌药物耐药性及四环素耐药基因(tet)的流行与分布情况,从7省的合作猪场采集病死猪肝脏、肺脏、肠道作细菌分离,利用沙门菌属特异性侵袭基因(invA)和16S rDNA扩增、测序等方法进行鉴定,并用微量肉汤稀释法测定沙门菌分离株对四环素类抗菌药物的敏感性,PCR方法测定tet基因,以及ERIC-PCR方法分析猪源沙门菌之间...

养殖场中动物源大肠杆菌blaCTX-M-27基因的传播特征探究

作者：张岩; 龙薇; 林晓玲; 孙银焕; 蔡润茂; 蒋红霞 刊期：2019年第10期

从2014年和2016年保存的来自河南、广东、山东和湖北4个省1 100株食品动物肠道大肠杆菌中筛选出58株blaCTX-M-27阳性菌株,采用药敏试验测定产blaCTX-M-27的大肠杆菌对20种抗生素的敏感性,并用PCR的方法检测其所携带的其他耐药基因;通过脉冲场凝胶电泳分析各菌株之间的亲缘关系,通过接合或转化试验、复制子分型和Southern blot对携带blaCTX-M-27...

副猪嗜血杆菌流行优势菌株调查和耐药性分析

作者：王治方; 徐引弟; 朱文豪; 张青娴; 焦文强; 李海利; 许峰; 王克领 刊期：2019年第10期

为调查研究河南规模化猪场副猪嗜血杆菌(HPS)流行优势菌株及其耐药性情况,2017-2018年从河南规模化猪场分离到30株HPS,根据菌株分离部位统计,肺脏、气管是HPS分离的首要组织部位,肺脏分离14株,占46.67%;气管分离11株,占36.67%。通过PCR分子血清型鉴定,河南流行的优势菌株为血清5,7,4型,其中血清型5型有9株,占30%;血清型7型有5株,占16.67%;血清型...

金黄色葡萄球菌对奶牛乳腺上皮细胞Wnt/β-catenin信号通路和相关修复因子的影响

作者：王亨; 祝启成; 毕崇亮; 周钰奇; 王建强; 崔璐莹; 孟霞; 朱国强; 李建基 刊期：2019年第10期

1株山羊源海藻糖比伯斯坦杆菌的分离鉴定及药敏试验

作者：任绍科; 何深宏; 李小燕; 刘威; 周作勇; 曹立亭; 郭建华; 程方俊 刊期：2019年第10期

为确定引起山羊肺炎的病原,本研究从病死山羊肺脏中分离纯化获得1株细菌,通过生化试验和分子生物学方法鉴定为海藻糖比伯斯坦杆菌。利用生物信息学软件MEGA6.0对巴氏杆菌科5个属细菌的白细胞毒素基因(lktA)和RNA聚合酶β亚基基因(rpoB)分别构建遗传系统发育树,可知分离株与海藻糖比伯斯坦杆菌(AF314526.2、CP003745.1、CP006955.1等)的lktA基因相...

驴源马流产沙门菌的耐药表型及毒力基因检测

作者：孙莹慧; 刘康军; 陶璐瑶; 孟霞; 崔璐莹; 姜桂苗; 赵付伟; 李建基; 王亨 刊期：2019年第10期

为了解驴源马流产沙门菌临床分离株的耐药表型及毒力基因的携带情况,本试验通过K-B药敏纸片扩散法对9株马流产沙门菌进行11种临床常用抗菌药物的敏感性测试,采用PCR方法检测与沙门菌致病性相关的10种毒力基因。结果显示:9株驴源马流产沙门菌存在2种耐药表型,对链霉素耐药率达100%,对阿莫西林耐药率为33%;10种毒力基因中仅traT未被检出,invA、avr...

色氨酸对产肠毒素大肠杆菌感染SD大鼠肠道的防御作用

作者：李金龙; 王瑶; 马娅君; 陈庆菊; 卢昌文; 唐志如 刊期：2019年第10期

FcRn介导Fc与金黄色葡萄球菌毒力因子融合蛋白跨细胞转运至局部免疫触发位点

作者：吕天星; 郝永清 刊期：2019年第10期

为了探究奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌毒力因子的重组蛋白能否经上皮屏障被转运至特定的乳腺局部免疫触发位点,本研究对金黄色葡萄球菌毒力因子重组蛋白FnBPB-ClfA和Fc融合蛋白Fc-FnBPB-ClfA的跨细胞转运机制、新生儿Fc受体(FcRn)是否参与此进程进行了验证。原代奶牛乳腺上皮细胞(pbMECs)接种于Transwell嵌套内的多孔膜上,培养至极性状态且细胞屏障...