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陕西部分猪场PCV2抗体及病毒检测分析

作者：罗丽华; 赵紫印; 冯秀; 侯玉凤; 徐盼盼; 吕江漫; 周宏超; 张振仓; 郭抗抗 刊期：2019年第07期

为了解陕西省猪群中猪圆环病毒2型(PCV2)感染及其免疫抗体情况,2016-2017年间,在陕西省7个地区21个猪场采集544份血清样品(其中8个免疫猪场进行PCV2疫苗免疫,采集320份血清样品;13个非免疫猪场未进行PCV2疫苗免疫,采集224份血清样品),分别通过ELISA方法检测PCV2血清抗体及PCR方法检测PCV2核酸。结果显示,采集的544份血清中PCV2血清抗体平均阳性...

猪圆环病毒3型SYBR greenⅠ荧光定量PCR方法建立及初步应用

作者：吕素芳; 李峰; 郭广君; 魏凤; 张文通; 沈志强 刊期：2019年第07期

为建立一种快速、特异、敏感的SYBR greenⅠ实时定量PCR方法,检测猪圆环病毒3型(PCV3)在感染猪体内的分布情况和病毒含量,本研究根据PCV3的cap基因序列设计1对引物,对反应条件、反应体系进行优化,建立了检测PCV3 cap基因的SYBR greenⅠ实时定量PCR方法,并对动物回归试验后剖检的病料组织进行了检测。结果,该方法比传统PCR方法灵敏度高100倍,可达...

抗猪流行性腹泻病毒纳米单链抗体CNC-CBD-scFv的制备及鉴定

作者：刘慧敏; 李浩; 朱文娇; 常琛; 路万平; 杨国庆 刊期：2019年第07期

为防治猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV),本文制备纳米化抗PEDV单链抗体(singlechain fragment,scFv)并验证其生物学特性。通过PCR方法扩增含有纤维素结合结构域(cellulose binding domain,CBD)的单链抗体基因CBD-scFv,构建抗PEDV的原核重组表达载体pET19b-CBD-scFv,鉴定正确后进行蛋白表达与鉴定。经硫酸水解法制备纳米...

从江香猪源Ⅰ、Ⅱ型干扰素生菜中融合表达及其生物活性

作者：田浪; 温贵兰; 张升波; 杨佰启; 李昌红; 陈广; 张喜懿 刊期：2019年第07期

干扰素(interfern,IFN)是在特定的诱生剂作用下,由细胞产生的一种具有高度生物活性的糖蛋白,具有广谱抗病毒活性。从江香猪源Ι型干扰素α2和Ⅱ型干扰素γ于生菜中融合表达及生物活性研究未见报道。本研究应用生菜植物表达系统,将从江香猪源干扰素植物表达载体PBI121-IFNα2、PBI121-IFNα2γ、PBI121-IFNγ、PBI121-Vec转入根癌农杆菌LBA4404中,用真空...

IBDV和NDV共感染对DF-1细胞的协同致病作用

作者：钱晶; 欧阳伟; 王晶宇; 王晓丽; 夏兴霞; 诸玉梅; 王永山 刊期：2019年第07期

为研究传染性法氏囊病病毒(IBDV)和新城疫病毒(NDV)共感染对DF-1细胞的致病作用,本试验将IBDV和NDV以单独/共同形式感染DF-1细胞,镜下观察可见共感染组最早在感染48h后出现细胞病变现象(CPE),其他感染组在72h后出现明显CPE;细胞活性检测结果显示共感染组在48h出现明显下降,在72h显著低于其他组。感染上清中共感染组与单感染组病毒增殖曲线基本一...

种公鸡精液在坦布苏病毒感染传播中的作用

作者：陈珍; 施少华; 刘荣昌; 蔡国漳; 傅光华; 陈翠腾; 朱春华; 刘斌琼; 黄瑜 刊期：2019年第07期

利用建立的(RT-)PCR方法对35份表现产蛋下降、受精率低下的种母鸡卵巢组织和140份用于人工授精种公鸡的精液进行病毒感染检测。结果仅检出坦布苏病毒阳性,其阳性率分别为100.0%和57.8%;以建立的间接ELISA方法对该种鸡群的320份种母鸡血清和140份种公鸡血清检测坦布苏病毒抗体,其阳性率分别为100.0%和69.3%。以上结果表明,该种鸡群的种母鸡和种公...

兔病毒性出血症快速检测方法的建立

作者：林颖峥; 林士佳; 孙欣; 熊炜; 张强; 王艳; 李树清 刊期：2019年第07期

兔病毒性出血症是兔的1种传播性极强、致死率极高的重要传染病,针对性地加强该病原的进出境监测将对动物疫病防控具有重要的意义。本研究使用软件分析设计RT-PCR、实时荧光定量RT-PCR的引物和TaqMan探针,建立了兔病毒性出血症RT-PCR和实时荧光定量RT-PCR方法,并测定其特异性和敏感性。试验结果显示,只有阳性参照样品的DNA出现扩增,其他对照样品...

IFITM3对羊口疮病毒在羊胚胎鼻甲上皮细胞上增殖的影响

作者：刘健新; 彭斐; 任旭皎; 黎振标; 鲁荣; 李慧子; 张彭涛; 宁章勇 刊期：2019年第07期

狐肺炎大肠杆菌ybjX基因缺失株构建及其对小鼠致病性检测

作者：张志强; 苏硕青; 李巧玲; 肖丽荣; 李永慧; 黄翠琴; 段滇宁; 吴同垒; 高云航 刊期：2019年第07期

为研究外膜蛋白YbjX对大肠杆菌致病作用的影响,本研究利用λ-Red同源重组系统构建了狐肺炎大肠杆菌(HBCLE-12)ybjX基因缺失突变株(HBCLEΔybjX),并对其生物学特性进行分析,探索YbjX蛋白在大肠杆菌致病过程中的作用。结果表明,缺失株HBCLEΔybjX与野生型菌株和回补菌株相比,其生长速度、生化特性无明显差异,但其运动能力和血清内存活能力显著下降,对...

穿孔艾美耳球虫浙江分离株的致病性和免疫原性

作者：陈莉; 石团员; 付媛; 周永学; 鲍国连; 杜爱芳 刊期：2019年第07期

兔球虫病是一种严重威胁我国家兔养殖业的重要传染性寄生虫病,目前,世界公认的兔球虫种类有11种,其中,穿孔艾美耳球虫(Eimeria perforans)在我国兔群的感染率最高,为35.2%;然而,国内尚未有关于其分离株致病性和免疫性的报道。本研究通过单卵囊显微挑选和无球虫兔体内传代技术,从浙江地区分离获得了1株穿孔艾美耳球虫,在此基础上,通过分子生物学...

表达H1N1亚型猪流感病毒HA蛋白的重组伪狂犬病病毒rPRV-opti-HA的构建及生物学特性

作者：范桂芳; 徐守兴; 杨斓; 宋文博; 华琳; 吴斌 刊期：2019年第07期

为研发针对猪流感病毒流行毒株和猪伪狂犬病病毒变异毒株更为有效的基因工程疫苗,本研究以变异伪狂犬病病毒基因缺失毒株(rPRVΔTKΔgI/gE)为载体,采用同源重组的方法,成功构建了表达经密码子优化的H1N1亚型猪流感病毒HA基因的重组病毒rPRVΔTKΔgI/gE-optiHA。对获得的重组病毒在多种细胞上的增殖特性、一步生长曲线、遗传稳定性以及对小鼠的安全性...

埃博拉病毒病抗原反向间接血凝检测方法的建立

作者：张颖; 王化磊; 曹增国; 李国华; 李恩涛; 迟航; 焦翠翠; 徐胜男; 杨松涛; 赵永坤; 夏咸柱 刊期：2019年第07期

为建立埃博拉病毒(Ebola virus,EBOV)抗原快速检测方法,本研究利用纯化后的埃博拉病毒样颗粒(EBOVVLPs)免疫马匹制备阳性血清,采用饱和硫酸铵沉淀法初纯血清中的IgG,后经过Protien G柱亲和层析法精纯IgG,利用精纯后的IgG致敏醛化的绵羊红细胞,建立反向间接血凝抗原检测方法,并对该方法进行最佳反应条件的优化。将该方法用于不同批次制得的已知病...

甘肃省某市种羊场布鲁菌病血清流行率横断面研究

作者：赵咏中; 方玉鹏; 王建军; 董伟; 赵欢庆; 许开云 刊期：2019年第07期

为了进一步了解甘肃省W市种羊场羊布鲁菌病血清流行率情况及空间分布,为当地种羊场羊布鲁菌病的防控提供参考。本研究采用血清学检测以及群间、空间分析的方法,对甘肃省W市种羊场进行羊布鲁菌病血清流行病学调查。结果表明,W市2016年种羊场布病表观血清流行率为38.10%,真实血清流行率为45.69%,个体表观血清流行率为6.61%,真实血清流行率为5.84%;...

羊种布氏杆菌介导巨噬细胞mmu-miR-146a-5p的差异表达及其靶基因的初步鉴定

作者：焦寒伟; 赵宇; 罗艺晨; 顾国靖; 李博文; 李文杰; 周志雄; 伍莉; 王红均; 黄庆洲 刊期：2019年第07期

羊种布氏杆菌(Brucella melitensis,B.melitensis)感染巨噬细胞后,运用高通量测序技术挖掘出mmu-miR-146a-5p差异表达。利用TargetScan和miRDB数据库分别进行mmu-miR-146a-5p靶基因的在线预测,结果分别有224和125个,利用韦恩分析发现,2个数据库的在线预测结果交集有70个;进一步利用PicTar数据库进行mmumiR-146a-5p靶基因的在线预测,并与韦恩分析...

河北省奶牛场犊牛安氏隐孢子虫的分离鉴定

作者：康茜; 陈颖彬; 关一凡; 李林; 秦建华; 赵月兰 刊期：2019年第07期

本研究从河北省奶牛场有腹泻症状2月龄左右的犊牛粪便中分离卵囊,进行病原分离与虫株鉴定。采集腹泻犊牛的新鲜粪便24份,采用饱和蔗糖溶液漂浮法和抗酸染色法检测隐孢子虫卵囊,观察卵囊形态、大小。提取卵囊基因组DNA,进行18SrRNA基因PCR扩增及琼脂糖凝胶电泳检测。对扩增片段进行序列测定及分析,进一步确定分离虫株隐孢子虫的种类/基因型,根据1...