中国兽医学报杂志 北大期刊 CSCD期刊 统计源期刊

VP22融合猪细小病毒VP2蛋白在杆状病毒系统中的表达及免疫原性分析

作者：刘金凤; 杜毅超; 白安斌; 陈凤莲; 覃绍敏; 马玲; 孟菲; 吴健敏 刊期：2019年第05期

旨在利用杆状病毒-昆虫细胞表达系统表达融合VP22短肽的重组猪细小病毒(PPV)衣壳蛋白VP2,分析其免疫原性。以PPV N株为模板,通过重叠延伸PCR技术分别将VP22融合到VP2基因的N端或C端,构建重组杆状病毒rBV-VP2、rBV-VP22-VP2和rBV-VP2-VP22,通过感染昆虫细胞进行重组蛋白的表达,并在小鼠上初步验证其免疫原性。间接免疫荧光和Western blot分析结果...

蓝舌病毒RT-PCR检测方法的建立及对云南省库蠓蓝舌病流行病学检测

作者：李成辉; 肖朋朋; 赵冠宇; 张克龙; 李卓昕; 南福龙; 陈竞; 张涵; 马彬尧; 韩继成; 金鑫; 田明尧; 鲁会军; 金宁一 刊期：2019年第05期

建立蓝舌病毒(bluetongue virus,BTV)RT-PCR检测方法,用于2018年云南省库蠓的蓝舌病(BT)流行病学检测。设计2对保守引物,优化RT-PCR方法的退火温度、循环次数、退火时间和延伸时间,并进行灵敏性和特异性评价。采集了昭通市3个县及普洱市澜沧县的BT传播媒介库蠓共25万余只,进行研磨后,用建立的RT-PCR方法检测样本。筛选出1对引物BTVS10-F和BTVS10...

高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒国家核酸标准物质的研制

作者：原霖; 李尔华; 董浩; 陈亚娜; 鞠厚斌; 张红丽; 王林; 宋晓晖; 杨林; 王传彬 刊期：2019年第05期

为了研制高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)国家核酸标准物质,将PRRSV美洲变异株代表毒株PRRSV JXA1接种Marc145细胞,出现细胞病变后,反复冻融并收集病毒液,并灭活分装。制备后进行均匀性、稳定性评估、数字PCR法定值、不确定度分析和临床试用。结果表明,制备的标准物质的定值为:(1.13±0.18)×10~4拷贝/μL,样品均匀;-20℃可稳定保存12个月以...

猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒GP5蛋白羧基端的噬菌体展示及其诱导仔猪产生中和抗体水平

作者：王艳梅; 顾敬敏; 雷连成; 冯新; 孙长江; 韩文瑜 刊期：2019年第05期

为了发现并验证猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)保护性抗原GP5蛋白羧基端新的中和性表位,本研究运用生物信息学软件预测PRRSV GP5蛋白羧基端的抗原性,全基因合成GP5蛋白羧基端168~198位氨基酸的编码序列,构建了重组噬菌体M13-GP5aa168~198,以临床阳性血清进行Western blot分析重组噬菌体表面展示的GP5aa168~198多肽的免疫反应原性。以1.0×101...

山东省免疫猪场猪伪狂犬病病毒gC基因的序列分析

作者：陈超; 田野; 李海娥; 薛瑞雪; 陈书民; 刘存; 张月; 姜世金; 田夫林 刊期：2019年第05期

为了调查山东省使用Bartha-K61疫苗免疫后,猪场猪伪狂犬病(PR)仍旧流行的原因,本研究对山东省动物疫病预防与控制中心在免疫猪场分离到的12株PRV的gC基因进行克隆测序与分析。核苷酸和氨基酸比对结果表明PRV欧美毒株与国内毒株亲缘关系较远,序列具有明显的地域特征,而大部分国内2011年后的分离毒株在氨基酸进化树上位于同一个分支,这表明gC基因...

鸡传染性支气管炎病毒M41株的致病性及排毒规律

作者：潘力; 林树乾; 于可响; 李桂明; 杨世发; 宋玲玲; 董雯雯; 李颖; 逯月; 王林; 王振勇 刊期：2019年第05期

本试验针对鸡传染性支气管炎病毒(IBV)呼吸型M41标准株的S1基因设计并合成引物,构建了阳性质粒标准品;经过不断优化建立了检测IBV-M41 SYBR GreenⅠReal-Time PCR标准曲线。通过对8日龄SPF鸡人工感染IBV-M41发病,采用Real-Time PCR方法跟踪检测其泄殖腔排毒情况;剖检并采集试验鸡的相关器官制作病理切片;在临床观察的基础上记录试验鸡的体质量、...

鹅细小病毒DY16株的分子鉴定及重组分析

作者：贾婧宇; 凌珏怡; 王志仙; 王建业; 朱国强 刊期：2019年第05期

为了了解鹅细小病毒(goose parvovirus,GPV)田间分离株是否存在变异可能,本研究对GPV分离株DY16进行了全基因组测序和重组分析。DY16株基因组由5 046个碱基组成,与国内外的5个强毒株同源性在98.1%以上。末端倒置重复(inverted terminal repeats,ITR)由414个碱基组成,与已报道的多个GPV强毒株同样在ITR的回文区茎部存在14个碱基对缺失。Simplot软...

小鼠诺如病毒逆转录重组酶聚合酶扩增检测方法的初步建立

作者：马磊; 曾繁文; 丛锋; 袁文; 朱余军; 伍妙梨; 徐凤娇; 黄碧洪; 练月晓; 黄韧; 郭鹏举 刊期：2019年第05期

小鼠是科学研究中使用最多的实验动物,小鼠诺如病毒(MNV)是试验小鼠感染率最高的病毒性病原,因此MNV感染小鼠将影响研究结果,及时对小鼠健康状态进行监测必不可少。本研究根据逆转录重组酶聚合酶扩增技术(RT-RPA),通过引物探针的筛选,建立了检测MNV的RT-RPA方法。该方法具有较好的敏感性和特异性,通过荧光扩增曲线判定样本中是否含有MNV,在20 mi...

羊口疮病毒的分离鉴定及F1L基因的遗传变异分析

作者：曾显成; 陈珍珍; 林心宇; 程洁; 张晨凯; 刘平; 池雪林; 罗树红; 修金生 刊期：2019年第05期

采用羊胚胎鼻甲(OFTu)细胞对湖北某山羊养殖场疑似羊口疮(Orf)的病羊唇部痂皮组织进行病毒分离,通过病理组织学、电镜形态观察及PCR试验等方法对分离的病毒进行鉴定,证实分离毒株为羊口疮病毒(Orf virus,ORFV),命名为HuB13。分析HuB13 F1L基因序列,结果F1L基因全长为1 017 bp,编码339个氨基酸,G+C含量为64.70%。遗传进化树显示,HuB13与8株山羊和...

牛呼吸道合胞体病毒RT-LAMP检测方法的建立

作者：李家伟; 王建科; 张淑琴; 张加力; 郭利 刊期：2019年第05期

牛呼吸道合胞体病毒(BRSV)是引起牛呼吸道疾病的一种病毒性病原体。本研究建立一种利用环介导等温扩增技术(RT-LAMP)快速检测BRSV的新的方法,针对BRSV N基因(GeneBank:AF054668.1)设计4对特异性LAMP引物,每组引物特异性识别靶基因序列上4个独立区域,利用扩增靶DNA的Bst2.0 DNA聚合酶,63℃恒温水浴50 min完成病毒检测,使用钙黄绿素检测荧光目视和...

1株疑似沙门菌的鸡源恶臭假单胞菌的分离鉴定及药敏试验

作者：杨斌; 徐仕忠; 韦丁贤; 袁天梅; 王茂莹; 岑秋丽; 韦丽珍; 潘夏雨; 羊扬; 朱国强; 张伟; 石宝兰; 张建军; 周玉双 刊期：2019年第05期

恶臭假单胞菌是一种广泛存在于环境中的人兽共患条件致病菌,主要引起水生动物疾病,其对禽类的致病性研究目前没有引起关注。本研究从临床上78日龄脚软病鸡的跖趾关节腔中分离出1株病原菌,结合临床症状、细菌培养和血清学凝集反应,前期一直怀疑为沙门菌,通过进一步的微生物质谱检测、生化反应和16S rDNA测序,确定为恶臭假单胞菌。药敏试验结果显...

狐源大肠杆菌HtrA基因缺失株的构建及生物学特性

作者：张志强; 杨楠; 李永慧; 苏硕青; 李巧玲; 段滇宁; 吴同垒; 钱爱东; 史秋梅 刊期：2019年第05期

HtrA是一种重要的抗应激蛋白,对细菌抵抗应激条件至关重要。为研究HtrA蛋白在狐源大肠杆菌致病过程中的作用,本研究利用λ-Red同源重组方法构建狐大肠杆菌HtrA基因缺失株,并从生长特性、生化特性、抗吞噬细胞吞噬能力、菌株毒力等几方面对突变菌株进行评价,结果表明:与狐源大肠杆菌野生型菌株相比,HtrA基因缺失株生长特性和生化特性无明显差异,但...

鸡白痢沙门菌毒力蛋白SpiC与肝损伤关系

作者：余庆; 陈小辉; 崔亮亮; 刘晓丽; 张万坡; 胡薛英; 谷长勤; 程国富 刊期：2019年第05期

旨在研究毒力蛋白SpiC在雏鸡肝组织内的动态分布及与肝脏损伤的关系。选用3日龄SPF雏鸡为试验对象,分别感染2株鸡白痢沙门菌(Salmonella pullorum,S.pullorum),并分别命名为S0701和S0702株。在进行致死性感染试验和半数致死量的测定后,建立动物感染模型。取肝脏于4%多聚甲醛中固定,并进行HE染色和毒力蛋白SpiC免疫组织化学染色。结果表明毒力蛋...

牛源金黄色葡萄球菌的分离鉴定、耐药性分析及木糖醇对生物被膜形成的干预

作者：郭慧琴; 李田; 肖鹏; 余茂林; 姜中其 刊期：2019年第05期

猪肺炎支原体部分血清体液免疫显性蛋白抗原的筛选鉴定

作者：钟杰; 蔡宜冰; 周瑶琴; 徐作波; 吴建云; 丁红雷 刊期：2019年第05期

旨在筛选猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp)部分血清体液免疫显性蛋白抗原。利用生物信息学软件筛选到7个普遍存在于Mhp菌株中的蛋白Mhp104、Mhp299、Mhp367、Mhp462、Mhp465、Mhp477、Mhp488。将其对应的基因分别连接pGEX-6P-1载体后转化至大肠杆菌BL21(DE3),诱导表达目的蛋白。将诱导表达目的蛋白的7个重组菌裂解液和GST工程菌裂解...