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O型口蹄疫病毒VP1嵌合基因的构建及原核表达

作者：郑敏; 金宁一; 鲁会军; 韩松; 金扩世; 李昌 刊期：2005年第06期

首先合成我国O型口蹄疫病毒2个疫苗毒株VP1基因的3个抗原表位,与另外扩增的流行毒株VP1基因末端273 bp片段相连,构建出O型VP1嵌合基因片段(VP1O).然后,将VP1O基因连接到原核表达载体pET28a上,枸建了重组表达质粒pET28a-VP1O,转化大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导表达.SDS-PAGE电泳表明,VP1O基因在大肠杆菌中获得表达.Western blotting检测证实表达的VP...

绿色荧光蛋白基因与猪瘟兔化弱毒疫苗株E2基因在杆状病毒中的融合表达

作者：范学政; 王琴; 陈振海; 王在时; 赵耘; 宁宜宝 刊期：2005年第06期

为了研究猪瘟病毒E2糖蛋白的立体结构及生物学特性,将增强型荧光蛋白基因(EGFP)和猪瘟兔化弱毒疫苗株(HCLV)E2基因经PCR扩增后克隆至pBlueBacHis2A质粒,与杆状病毒DNA共转染后经PCR鉴定获得了含有EGFP和HCLV E2融合基因(GFPTE2)的重组杆状病毒rBACTE2-339,并将其感染sf9细胞后在荧光显微镜下观察到了亮绿色荧光,说明融合基因已初步表达.

2006年《福建畜牧兽医》杂志征订启事

刊期：2005年第06期

抗猪圆环病毒Ⅱ型ORF2蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

作者：陈美玲; 陈焕春; 黄红亮; 琚春梅; 宋云峰 刊期：2005年第06期

利用本室构建的质粒PGEXORF2转化BL21(DE3),经IPTG诱导表达,得到PCV2-ORF2的重组蛋白,经复性纯化后作为免疫原,采取常规免疫与体外脾脏免疫结合的方式免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与Sp2/0的骨髓瘤细胞融合,经间接酶联免疫吸附试验(ELISA)筛选,获得了2株抗PCV2-ORF2蛋白的单克隆抗体的杂交瘤细胞,分别命名为3B2F4和9C3D2,其细胞培养上清效价分别为1...

《山东畜牧兽医》2006年征订启事

刊期：2005年第06期

禽流感病毒夹心ELISA诊断试剂盒的研制及应用

作者：肖运才; 毕丁仁; 李自力; 胡思顺; 许青荣; 石德时; 李永安; 吴仁蔚 刊期：2005年第06期

将成熟的禽流感病毒(AIV)夹心ELISA快速检测方法组装成诊断试剂盒.试剂盒由1～11号试剂、一块酶标板和一份说明书组成.对试剂盒内各组份进行了特异性、敏感性、重复性及保存期的测定.结果表明,在-10℃下能保存6个月,而且特异性强、敏感性高、重复性好,操作简单、方便,能快速、准确地检测出样品中是否带有AIV抗原.先后制备了8个批次的诊断试剂盒,...

鸡感染J亚群禽白血病病毒的免疫抑制机理

作者：商营利; 刘思当; 丁宝君; 肖一红; 成子强; 孙先明; 褚艳丽 刊期：2005年第06期

通过人工接种建立了雏鸡感染J亚群禽白血病病毒(ALV-J)后发生免疫抑制的病理模型,对免疫抑制的机理进行了初步研究.结果表明:ALV-J感染早期可诱导胸腺、法氏囊的淋巴细胞凋亡,这种早期的淋巴细胞凋亡是胸腺和法氏囊萎缩的重要原因之一.病理组织学动态观察表明,ALV-J主要引起骨髓的髓系细胞灶状或弥漫性增生,病变导致骨髓机能受损,使机体免疫机能...

番鸭源新城疫病毒F蛋白基因的克隆及序列分析

作者：程龙飞; 黄瑜; 傅光华; 李文杨; 施少华; 彭春香 刊期：2005年第06期

利用RT-PCR技术对番鸭源新城疫病毒FP1/02株的F蛋白基因进行分段扩增、定向克隆到pMD 18-T SimpleVector质粒载体,然后测定其核苷酸序列,拼接出F基因全序列,并推导出其相应的氨基酸序列.FP1/02株的F蛋白基因全长1690 bp,编码553个氨基酸,其裂解位点的氨基酸序列为112R-R-Q-K-R-F117,具有强毒株特有的氨基酸序列结构特征.核苷酸序列分析结果表明,...

欢迎订阅2006年《中国兽医科技》

刊期：2005年第06期

IBDV-VP2基因高变区同义密码子在蛋鸡和乌鸡中的偏嗜性

作者：李银聚; 张春杰; 程相朝; 吴庭才; 王臣; 陈溥言 刊期：2005年第06期

以RT-PCR方法对河南省洛阳地区2000～2002年分别从IBD发病蛋鸡和乌鸡鸡群中分离到的5株和4株IBDV进行了VP2高变区基因的扩增、克隆和测序.核苷酸和氨基酸序列分析发现,9株IBDV中有4处氨基酸发生了变化,即320位的Gln/His,349位的Val/Ile,375位的Pro/Ser和381位的Lys/Arg.这些氨基酸的变化,不符合变异株的特征.核苷酸序列变化主要表现在同义密码子...

OE-PCR法扩增获得犬瘟热病毒缺失疏水区的融合蛋白基因片段

作者：乌仁高娃; 杨敬; 陈振文 刊期：2005年第06期

根据犬瘟热病毒(CDV)Onderstepoort株的核苷酸序列,设计合成引物,通过RT-PCR,从CDVOnderstepoort 株RNA中扩增出2197 bp的CDV全长融合蛋白(F)基因.将其与pGEM-T easy载体连接,通过软件分析其序列中的疏水区后,以pGEM-T/F为模板,PCR扩增出约254 bp和1017 bp的F蛋白疏水区外编码序列.以2个扩增产物为模板,以OE-PCR(overlap extension-PCR)扩增出约...

《贵州畜牧兽医》征订启事

刊期：2005年第06期

克氏原螯虾口服疫苗免疫对白斑综合征病毒人工感染的保护作用

作者：许梓荣; 魏克强 刊期：2005年第06期

猪传染性胸膜肺炎快速PCR诊断

作者：彭小华; 何孔旺; 陆承平 刊期：2005年第06期

根据GenBank中猪胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropeumoniae,APP)外膜蛋白(oml)基因序列,设计合成1对特异性引物,进行PCR检测.对App 1、2、3、4、5a、5b、6、7、9型参考株均扩增出大小为1 010 bp左右的片段,而对马链球菌兽疫亚种、多杀性巴氏杆菌、鼠伤寒沙门氏菌、副猪嗜血杆菌、产肠毒素大肠杆菌等均未扩增出任何条带.用相应的限制性内...

鸡志贺氏菌感染的血清流行病学调查

作者：许兰菊; 王川庆; 马水锋; 薛双; 赵原亮 刊期：2005年第06期

利用研制的鸡志贺氏菌平板凝集抗原及微量平板凝集试验,对我国河南、山东等不同地区35家鸡场具有拉稀病史的670只鸡血清灭活样品进行了检测.通过检测对鸡志贺氏菌病的发病率、流行地区、品种、日龄及其混合感染等进行血清流行病学调查.结果表明:我国部分地区存在有鸡志贺氏菌感染,其血清抗体阳性率较高,达28.3%(155/547)～33.7%(226/670),已远远...