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猪圆环病毒（PCV）序列分析与进化

作者：马相如; 陈焕春; 肖少波; 刘正飞; 曹胜波; 张利达 刊期：2004年第02期

从GenBank数据库下载了世界各地分离的猪圆环病毒基因组全序列,并对其进行多重比对,绘制系统进化树,发现来自同一国家或地区的PCV毒株亲缘关系较近.提取PCV ORF1编码的蛋白质序列,进行多序列比较,分析保守氨基酸序列,搜索结构域相似序列,结果发现玉米线条病毒属与PCV的起源有密切的关系.此外,在数据处理过程中通过自编程序结合互联网及免费软件,...

用于转导猪β-干扰素基因的高滴度逆转录病毒的制备

作者：王继英; 张大龙; 杜立新 刊期：2004年第02期

通过DNA重组技术,将卵清蛋白5'调控序列和猪β-干扰素基因重组到逆转录病毒载体pLNHX中.通过瞬时转染法,将构建好的逆转录病毒重组载体和表达VSV-G膜蛋白的表达载体pVSV共转染GP2 293包装细胞.病毒滴度测定表明,利用瞬时转染法可以产生高滴度的逆转录病毒,最高滴度可达107CFU/mL.

美国为防止疯牛病传播采取新举措

作者：郭志儒 刊期：2004年第02期

3种非猪瘟病毒单独或混合感染对猪瘟弱毒疫苗免疫效力的影响

作者：宁宜宝; 赵耘; 王琴; 宋立; 张广川; 丘惠深; 沈青春; 王在时 刊期：2004年第02期

将20头9月龄左右猪瘟、伪狂犬、猪繁殖与呼吸障碍综合征抗原、抗体阴性猪分成6组,分别利用猪细小病毒(PPV)、猪伪狂犬病毒(PRV)和猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)单独或混合感染.7 d后连同对照猪4头,免疫接种猪瘟兔化弱毒疫苗(HCLV),13 d后连同4头阴性对照猪一起攻击猪瘟石门强毒.整个试验期间分别每天测温,观察临床症状,每周采集扁桃体和血...

CpG寡核苷酸对IBDV VP2基因真核表达质粒免疫增效作用

作者：王晓泉; 姜平; 丁铲; 许家荣 刊期：2004年第02期

以传染性法氏囊病病毒(IBDV)VP2蛋白基因表达质粒DNA为免疫原,以CpG的寡核苷酸(CpG-ODN)为免疫佐剂,肌肉注射于14日龄SPF鸡,1周后加强免疫1次,2次免疫后15 d和21 d分别测定血清ELISA抗体效价,并于免疫后21 d用IBDV 99J1强毒株攻毒和进行病理学观察.结果显示,(1)VP2基因重组质粒DNA与CpG共同免疫组的ELISA抗体水平明显高于VP2重组质粒免疫组;(2)I...

马立克氏病病毒pp38基因真核表达质粒的构建及其在鸡胚成纤维细胞中的表达

作者：姜世金; 丁家波; 张志; 孙淑红; 王玉; 杨汉春; 崔治中 刊期：2004年第02期

通过PCR方法扩增马立克氏病病毒(Marek's disease virus,MDV)Md11株的pp38基因,并将其克隆到真核表达载体pcDNA3.1/zeo(+)中.阳性克隆鉴定后,在脂质体作用下转染鸡胚成纤维细胞(CEF),通过间接免疫荧光试验(IFA)检测到了pp38在CEF中的表达.

鸡白细胞介素18成熟蛋白全长基因的克隆与序列测定

作者：胡敬东; 崔治中; 范伟兴; 刘文强; 赵宏坤 刊期：2004年第02期

根据已发表的鸡白细胞介素18(IL-18)成熟蛋白的cDNA序列,设计1对特异性引物,应用RT-PCR从脂多糖(LPS)刺激10 h活化的MDCC-MSB1细胞中克隆到编码鸡IL-18成熟活性蛋白的完整基因片段,其大小为510 bp.经序列测定证实,所获得的cDNA基因序列与文献报道的结果完全一致,从而为进一步研究鸡IL-18的基因表达、生物学活性以及应用奠定了基础.

鸡传染性支气管炎病毒国内分离株D971mRNA，和mRNA4cDNA的分子特征

作者：刘玉芬; 刘胜旺; 荣骏弓; 孔宪刚; 刘宝全 刊期：2004年第02期

参照已发表的鸡传染性支气管炎病毒(infectious bronchitis virus，IBV)基因序列，设计合成了1对引物，经RT—PCR扩增得到了IBV国内分离株D971约1．3kb的片段，其中包含3a、3b、E及M蛋白基因的完整0RF，并将该片段进行了克隆和序列测定。与国内外部分IBV毒株序列比较表明：D9713a基因与CU—T2、D1466、DE072、M41、GA／99和UK／66的3a基因核苷酸...

鹅细小病毒VP2基因在大肠杆菌中的表达及纯化

作者：贺云霞; 王君伟; 王立群; Ulrich; Neumann 刊期：2004年第02期

将鹅细小病毒(GPV)VP2基因插入原核表达载体pPROEX-HTb,获得重组表达质粒pPROEX-HTb-VP2.将其转化大肠杆菌DH5α,用IPTG诱导表达,表达菌体蛋白中可产生与预期大小相符的约72 000的蛋白.以光密度扫描对该表达产物进行定量分析,表达产物约占菌体总蛋白的14%.经His-tag金属螯合层析纯化,获得纯度较高的6His-VP2融合蛋白.Western-blot结果表明,所得蛋...

专家对SARS疫苗研究表示谨慎态度

作者：郭志儒 刊期：2004年第02期

猪胸膜肺炎放线杆菌快速PCR检测方法的建立

作者：王贵平; 何启盖; 刘军发; 蔡旭旺; 陈焕春 刊期：2004年第02期

根据猪胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,APP)的apxⅣA基因序列设计了1对可扩增1个422 bp片段的特异性引物,成功地建立了一种检测APP的快速PCR方法,并确定了其特异性和灵敏性.对血清1～13型等13个APP标准株均能扩增出预期422 bp的特异性条带;对猪副嗜血杆菌、多杀性巴氏杆菌、支气管败血波氏杆菌、大肠杆菌、葡萄球菌、链球菌...

中华鳖对温和气单胞菌口服微球缓释疫苗的免疫应答

作者：孙红祥; 潘杭君; 胡富强; 郑聪霞 刊期：2004年第02期

以中华鳖温和气单胞菌(Aeromonas sobria,As)Z-1株灭活全菌液,采用生物降解性高分子材料制成缓释微球疫苗,口服免疫中华鳖,测定血清中凝集抗体、血液中白细胞杀菌率以及对活菌攻击的免疫保护率.结果表明,中华鳖口服微球疫苗,其血清中凝集抗体效价和血液中白细胞杀菌百分率均可达到灭活菌液注射组相当的水平(P＞0.05),显著高于对照组(P＜0.01);微...

兔脑炎原虫引起肾上皮凋亡的研究

作者：潘耀谦; 张柳平; 段艳 刊期：2004年第02期

对16只具有兔脑炎原虫病的示病症状,即出现不同程度的头颈歪邪、震颤、平衡失调和转圈运动等运动障碍症状的獭兔,运用原位末端标记技术和基因染色技术,着重对病兔肾组织损伤的发生进行了研究.结果表明:肾远曲小管和集合管是脑炎原虫主要的寄生部位,在此常能检出虫体或假囊;凋亡的细胞多见于集合小管的上皮细胞.用TUNEL染色,不同阶段的凋亡细胞可...

亚洲多个国家暴发H5N1高致病性禽流感

作者：郭志儒 刊期：2004年第02期

柔嫩艾美耳球虫地克珠利抗药株和马杜拉霉素抗药株的实验室诱导

作者：韩红玉; 赵其平; 陈兆国; 黄兵 刊期：2004年第02期

采用药物浓度逐渐递增的方法，以0．05×10^-6地克珠利和2．0×10^-6马杜拉霉素为起始诱导浓度，分别经过18次和20次传代，在实验室诱导了柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)对地克珠利和马杜拉霉素的抗药性虫株。经抗药性检测，以最适抗球虫指数(POAA)、病变记分减少率(RLS)、相对卵囊产量(ROP)和抗球虫指数(ACI)4项指标综合判定及综合抗药性指数(G...