中国生物制品学杂志 北大期刊 CSCD期刊 统计源期刊

复合通用CD4＋T辅助细胞表位基因克隆载体的构建及测序

作者：刘汉平 方志正 刊期：2008年第05期

目的构建复合通用CD4^＋T辅助细胞表位基因克隆载体，并进行测序。方法由DNAwork2．0软件设计并人工合成20条55个碱基的寡核苷酸序列，利用套叠PCR技术人工合成全基因序列，并克隆至pUC19载体，转化大肠杆菌DH5a，提取质粒，酶切鉴定并进行测序。结果经PCR扩增出645bp的目的DN段。酶切鉴定筛选出8个阳性克隆，经测序获得一个序列完全正确的克隆...

蚯蚓脱氧核糖核酸酶的底物特异性及降解产物的特性

作者：刘志贞 康慧芳 樊慧杰 王晓媛 杨利军 杨琦 牛勃 刊期：2008年第05期

目的研究蚯蚓组织中一种新型脱氧核糖核酸酶（EwD）的底物特异性及降解产物的特性。方法采用ZOR-BAX-Oligo柱-HPIE、琼脂糖凝胶电泳、紫外分光光度法等技术，分析EWD对环状质粒DNA、线状λ-DNA、大肠杆菌基因组的降解作用，及对真核鲱精DNAf、单链DNA等的降解中间产物和终产物的特性，并观察其对RNA的降解作用。结果EWD对这几种DNA均有降解作用，...

重组口蹄疫鸡痘病毒vUTAL3CP1的构建及其遗传稳定性和免疫原性

作者：金明兰 金宁一 鲁会军 马鸣潇 郑敏 金扩世 霍晓伟 计越 刊期：2008年第05期

目的构建重组口蹄疫鸡痘病毒，并检测其遗传稳定性和免疫原性。方法将口蹄疫病毒（FMDV）的衣壳蛋白前体P1-2A和蛋白酶3C基因插入到鸡痘病毒表达载体中，构建重组鸡痘病毒转移载体pUTAL3CPl，并与鸡痘病毒（FPV）282E4株共转染鸡胚成纤维细胞（CEF），通过BrdU加压筛选获得重组鸡痘病毒vUTAL3CPl。重组病毒在CEF中连续传30代，分别进行毒力和基...

RhoC基因沉默对肝癌细胞增殖的影响

作者：谢淑丽 陈志明 苏学今 孙梅 全成实 刊期：2008年第05期

目的构建靶向RhoC基因的RNA干扰（RNAi）载体，并研究RhoC基因沉默对肝癌细胞增殖的影响。方法将合成的寡核苷酸片段克隆入RNAi载体，并转染肝癌细胞，以沉默RhoC基因表达，RT-PCR检测基因抑制效果。绘制生长曲线，检测转染细胞的增殖情况，FCM检测细胞周期变化。结果构建的RNAi载体有效地抑制了肝癌细胞RhoC基因的表达，RhoC基因沉默显著地抑制...

TGF-β RⅡ真核表达载体及其RNA干扰质粒的构建及鉴定

作者：杜德伟 孙脊峰 吴学勤 李端 杨洁 李占亭 刊期：2008年第05期

目的构建含有TGF-βⅡ型受体（TCF-βRⅡ）的真核表达载体及针对TGF-βRⅡ的RNA干扰质粒，并观察RNA干扰对TGF-βRⅡ表达的抑制作用。方法PCR方法扩增TGF-βRⅡ的cDNA序列，将全长的TGF-βRⅡcDNA插入pcDNA3．1中，构建TGF-βRⅡ的真核表达载体pcDNA3，1-TGF-βRⅡ，并检测其在293T细胞中的表达。根据TGF-βRⅡ的基因序列，设计针对TGF-βRⅡ的干扰RNA，构...

欢迎订阅《中国生物制品学杂志》

刊期：2008年第05期

Asia1型口蹄疫病毒P1-2A-3C基因真核表达质粒的构建及鉴定

作者：霍晓伟 金宁一 鲁会军 马鸣潇 牟伟峰 刊期：2008年第05期

目的构建Asial型口蹄疫病毒（FMDV）P1-2A-3C基因真核表达质粒。方法采集疫区牛的水疱液及水疱皮，经RT-PCR法扩增出AsiaⅠ型FMDV的前体蛋白基因P1-2段和蛋白酶基因3C片段，分别克隆至pMD18-T载体上，通过酶切、连接，获得质粒pMD18-T-P1-2A-3C。经酶切获得P1-2A-3C片段，插入真核表达载体pVAXIpCMV启动子下游，构建pVAXI-P1-2A-3C真核表达载体...

人Cu，Zn-SOD基因在毕赤酵母中的表达及稳定性

作者：迟春萍 隋红 李雨桐 薛向光 王志武 牛灵 刘畅 王艳芳 吴晓娟 郭立君 盛军 李校堃 刊期：2008年第05期

目的构建人Cu，Zn-SOD基因的真核表达载体，转化毕赤酵母，并检测表达产物的稳定性。方法根据酵母密码子偏好性，合成人Cu，Zn-SOD基因，克隆至真核表达载体pPICgk中，转化毕赤酵母GS115。甲醇进行诱导表达，SDS-PAGE和Westernblot鉴定表达产物。优化表达条件，并检测粗酶液的稳定性。结果经SDS-PAGE和Westernblot检测，表达的目的蛋白相对分子...

不同型别正常人红细胞膜蛋白质组的双向凝胶电泳分析

作者：马秋平 白坚石 刊期：2008年第05期

目的以双向凝胶电泳（2-DE）方法分析不同型别正常人红细胞及细胞膜的蛋白质组图谱。方法提取不同型别的正常人红细胞全细胞蛋白和膜蛋白，以2．DE进行蛋白质的分离，银染显示电泳分离结果，ImageScanner扫描仪扫描并获得图像，以图像分析软件ImageMaster2DPlatinum进行结果分析和比较。结果在不同型别红细胞的全细胞蛋白谱中，有5个蛋白斑点出...

重组人白细胞介素-10的表达与纯化

作者：方爱平 任莉莉 齐晖 文锦丽 王英兰 刊期：2008年第05期

目的表达并纯化重组人白细胞介素-10蛋白，并进行活性检测。方法将重组质粒PCRqT7／NT-TOPO-IL-10转化大肠杆菌B121（DE3）pLyse细胞，IFrG诱导表达。采用Ni柱对表达产物进行亲和纯化，并检测其对外周血单核细胞分泌TNF-α的影响。结果IFrG诱导4h，目的蛋白表达量最高，可达45．02％，主要以包涵体形式表达。纯化后，所得目的产物的回收率为66．7...

儿童呼吸道感染军团菌抗体的检测

作者：李辉 刘广华 谢风 刊期：2008年第05期

目前已发现军团菌属有42个种，64个血清型，其中至少有19个种与人类疾病有关。与人类关系最密切的为嗜肺军团菌种（L．pneumophile，Lp），已发现有15个血清型。除印外，非嗜肺军团菌中与人类疾病关系最密切的为米克戴德军团菌（L．micdadei，Lm）。为了解本地区儿童呼吸道军团菌感染情况，应用血试管凝集试验（TAT）对77名住院呼吸道感染患儿进...

1名Am亚型患者的血型血清学鉴定及输血策略

作者：吴勇 吴远军 陈宝婵 刘艳 刊期：2008年第05期

目的对Am亚型患者的血型进行血清学鉴定，并为其输血选择适合的血液成分。方法对1名ABO正反定型不相符患者，用抗-A、抗-A1、抗-B、抗-AB和抗-H单抗检测红细胞ABH抗原；A、B、O型红细胞与血浆反应检测ABO血型抗体及不规则抗体；吸收放散试验检测红细胞弱抗原；中和抑制试验检测唾液中ABH血型物质。根据患者血型血清学检测结果，选择相容血液成分...

结核菌H37Ra在小鼠体内诱导的免疫应答

作者：刘来成 王淑玲 范雄林 付瑞玲 刘岚 卢贤瑜 刊期：2008年第05期

目的检测结核菌H37Ra免疫小鼠后产生的特异性细胞免疫和体液免疫应答水平。方法将BALB／c小鼠随机分为H37Ra组、BCG组和生理盐水（Ns）组，分别进行免疫，免疫8周后处死小鼠，分离血清，EIJSA间接法测定血清特异性抗PPDISG抗体的水平，流式细胞分析仪检测脾脏T淋巴细胞亚群的变化。脾淋巴细胞经体外培养、PPD刺激后，MTY法检测脾淋巴细胞的刺激...

二乙烯亚胺灭活流感病毒的效果观察

作者：魏晓露 刘婧 高菁霞 张新文 陈俊英 黄秋香 何香莲 张云昆 余磊 姜述德 廖国阳 李映波 刊期：2008年第05期

目的观察二乙烯亚胺（BEI）对流感病毒的灭活效果。方法分别使用甲醛和BEI对流感病毒进行灭活试验，通过血凝试验检测二者灭活效果，并确定各自最佳灭活时间。用灭活的病毒液免疫小鼠，检测其抗原性，并用RT-PCR方法分析灭活病毒基因组的完整性。以裂解剂Triton X-100裂解病毒后，分别加入甲醛和BEI灭活，采用单向免疫扩散法检测灭活不同时间病...

弓形虫STAg不同接种途径免疫小鼠诱导的免疫应答

作者：刘延庆 刘晋平 殷国荣 马晓明 孟晓丽 刘红丽 刊期：2008年第05期

目的观察弓形虫可溶性速殖子抗原（STAg）经滴鼻、灌胃和皮下注射3种途径免疫小鼠诱导的免疫应答。方法5-6周龄BALB／c小鼠32只，随机分为4组，分别以20μgSTAg滴鼻、灌胃或皮下注射免疫小鼠2次，间隔2周，对照组不作处理。末次免疫后14d脱颈椎处死小鼠，分离脾淋巴细胞和肠上皮内淋巴细胞（IELs）并计数，ELISA法测定血清、肠冲洗液中的弓形虫特...