中国生物制品学杂志 北大期刊 CSCD期刊 统计源期刊

重组DT／bFGF融合蛋白基因表达载体的构建及表达产物的纯化

作者：张华捷; 张庶民; 庄辉 刊期：2006年第04期

目的 构建重组DT/bFGF融合蛋白表达载体，制备高纯度的DLF融合毒素。方法 PCR扩增DT389和bFGF的编码DNA序列，经酶切和连接，克隆至表达载体pET-30a，转化E．coli BL21（DE3），鉴定阳性克隆菌落，经IPTG诱导表达融合蛋白DLF，镍离子螯合层析纯化，用Western blot分析其抗原性。结果 测序表明，插入片段可编码含545个氨基酸残基的融合蛋白DLF。S...

目前收录《中国生物制品学杂志》的数据库

刊期：2006年第04期

猪流感复合多表位核酸疫苗的构建及其表达研究

作者：贾雷立; 金宁一; 金扩世; 郑敏; 金洪涛; 连海; 王瑞琳; 李昌; 鲁会军; 马鸣潇; 金明兰 刊期：2006年第04期

目的 构建猪流感病毒复合多表位核酸疫苗，并研究其表达产物的抗原性。方法 以H3、H9亚型流感的HA抗原表位及流感病毒的其它主要抗原（NP、NA、M）表位基因为基础，再附以Kozak序列和适当的酶切位点，设计并合成一段长765bp的复合多表位基因（Epi），其中各表位基本独立，将其克隆入真核表达载体pIRES1neo，构建重组质粒pIRE-Epi。将多表位抗原...

细菌内同源重组构建人p21^WAF1基因重组腺病毒

作者：邹昌勇; 杨京生; 全家妩; 田生和 刊期：2006年第04期

目的 构建人p21^WAF1基因重组腺病毒载体，并在293细胞中包装制备重组腺病毒。方法 将人p21^WAF1基因亚克隆连接到腺病毒转移质粒pshuttle-cmv，得到阳性重组转移质粒psh-p21。先将腺病毒骨架质粒pAdEasy-1转化BJ5183菌，筛选得到AdBJ5183菌，再将Pme Ⅰ线性化的psh-p21转化AdBJ5183菌，经细菌内同源重组法构建重组腺病毒质粒pAdp21。经PacⅠ和B...

耐药大肠杆菌的致病性与免疫原性

作者：雷连成; 韩文瑜; 郑丹; 乔红伟; 杨洋 刊期：2006年第04期

目的 了解大肠杆菌耐药株的致病性与免疫原性。方法 临床分离耐药大肠杆菌，经适宜条件培养后接种小鼠，观察耐药菌株对小鼠的致病性；并选择已知血清型的不同耐药谱和不同耐药水平的菌，分别培养至对数生长期，经甲醛灭活后免疫小鼠，2周后分别用致死剂量的原菌株和同期分离菌株进行攻毒，考察耐药菌株免疫原性。结果 24株耐药菌普通肉汤培养物...

浙江省桐庐县狂犬病发病情况分析

作者：方胜宇; 徐进 刊期：2006年第04期

近年来，浙江省桐庐县狂犬病发病有所上升。我们对该县2000-2005年发生的7例狂犬病进行了流行病学调查。

植物细胞表达人胰岛素的载体构建

作者：汪春义; 戚凤春; 陈桂玲; 申镇维; 王宣军; 盛军 刊期：2006年第04期

目的 构建人胰岛素的植物细胞表达载体。方法 设计多对引物，通过PCR反应合成霍乱毒素B亚单位（CTB）基因和不带C肽的人胰岛素基因。将霍乱毒素B亚单位（CTB）基因与这种不带C肽的人胰岛素基因融合后，插入克隆载体，然后用BamHⅠ和SacⅠ进行酶切，并将酶切的融合基因片段连接在植物表达载体pBI121上，最后用BamHⅠ和SacⅠ进行酶切鉴定。结果 测...

HIV-1 C亚型调控蛋白Nef在大肠杆菌中的表达

作者：戴青; 孙明; 周东霞; 蒋国润; 黄小琴; 褚嘉祐 刊期：2006年第04期

目的 表达人免疫缺陷病毒1型C亚型调控蛋白Nef，为研制HIV疫苗寻找新的途径。方法 通过PCR扩增，获得HIV-1C亚型Nef基因片段，并将其克隆到原核表达载体pGEX-5X-1中，转化大肠杆菌B121（DE3），IPTG诱导表达后，以SDS—PAGE和Western blot分析表达产物。结果 表达产物是相对分子质量为50000的GST融合蛋白，且能与p27单克隆抗体发生特异性反应。...

LHRH-PE40对LOVO细胞的靶向杀伤作用

作者：吴广谋; 张国利; 岳玉环; 何畅; 朱平 刊期：2006年第04期

目的 研究LHRH-PE40对LOVO细胞的靶向杀伤作用。方法 用XTT检测LHRH-PE40对LOVO细胞的体外细胞毒性。将LOVO细胞移植于裸鼠，测定静脉注射LHRH-PE40对体内肿瘤细胞生长的抑制作用。结果 LHRH-PE40对LOVO细胞细胞毒作用的半数抑制浓度为2．103μg/ml，在裸鼠肿瘤模型中，LHRH-PE40剂量为150μg／kg时抑瘤率为68．49％，这种细胞毒性作用可以被LHRH...

RhD（-）血型临床供应模式

作者：刘芳兰; 袁连根; 孙树丰; 张来玉 刊期：2006年第04期

RhD（-）属稀有血型，在我国汉族人群中的比例为0．3％～0．5％，故对RhD（-）患者的血液供应一直是困扰输血界的难题。据中国输血协会提供的数据显示，我国2000年临床用血量为810万袋，RhD（-）用血量7000袋，按0．2％～0．4％计算，每年的RhD（-）血液需求量约2～4万袋，而实际供给数小于需求数。本站平均每年可筛查出50份RhD（-）血液，临床...

人乳头瘤病毒16型晚期蛋白L1基因重组MVA病毒的构建及鉴定

作者：刘大维; 姜春来; 于湘晖; 吴永革; 金英花; 孔维 刊期：2006年第04期

目的 研制预防人乳头瘤病毒（HPV）感染的重组修饰的Ankara痘病毒（MVA）活载体疫苗。方法 将HPV16L1基因插入MVA病毒转移载体psc11M2的P7．5启动子的下游，构建转移质粒psc11M2-L1，与MVA共转染鸡胚成纤维细胞（CEF），进行同源重组。通过9轮蓝斑筛选，以PCR和western blot鉴定重组病毒。结果 获得的含目的片段的重组MVA病毒，表达产物与鼠抗人...

人乳头瘤病毒16型L1／E7嵌合基因的克隆及其在毕赤酵母中的表达

作者：宋衍燕; 李秀玲; 何薇薇; 张中洋; 许丽锋 刊期：2006年第04期

目的 克隆人乳头状瘤病毒16型（HPV16）L1／E7嵌合蛋白基因，并在毕赤酵母中表达。方法 PCR扩增HPV16L1／E7基因，并克隆至毕赤酵母表达载体pPIC-3．5K和pPIC-9K中，构建含HPV16L1／E7基因的pPIC3．5K—HPV16L1／E7和pPIC9K—HPV16L1／E7重组表达载体，经测序证实插入的外源基因读码框正确后，分别转入GS115和KM71菌株中，筛选阳性转化菌株，经P...

“西部地区疾控中心主任论坛：疾病预防控制面临的机遇与挑战”会议预备通知

刊期：2006年第04期

重组Thermus thermophilus DNA聚合酶表达纯化及其在RT-PCR中的应用

作者：王峤; 相世和; 母凯萍; 母敬郁; 王恩思 刊期：2006年第04期

目的 研究重组Thermus thermophilus DNA聚合酶的表达、纯化和应用。方法 提取Thermus thermophilus hb8基因组DNA作为模板，PCR扩增Tth DNA聚合酶基因后，克隆至pET28a表达载体上，转化大肠杆菌BL21（DE3），经IPTG诱导表达，用His-Bind Quick Cartridse 300纯化重组Tth DNA聚合酶His—tag融合蛋白。提取Thermomonospora fusca总RNA，用一管法R...

中国流行株HIV-1B／C重组亚型包膜蛋白真核表达载体的构建及稳定表达细胞株的筛选

作者：马红霞; 于湘晖; 姜春来; 吴永革; 孔维 刊期：2006年第04期

目的 获得高质量的中国流行株HIV-1B／C重组亚型包膜蛋白抗原。方法 改造表达载体，以构建中国流行株HIV-1B／C重组亚型包膜蛋白基因带有筛选标记的真核细胞表达质粒，将所构建质粒转染真核细胞，用含有抗性的培养基筛选出能够高效、持续表达包膜蛋白的稳定表达细胞株。结果 所构建的表达载体pVRPEnv转染细胞后可表达目的蛋白，并建立了稳定表达...