杂志简介：《中国生物工程》杂志经新闻出版总署批准，自1976年创刊，国内刊号为11-4816/Q，是一本综合性较强的生物期刊。该刊是一份月刊，致力于发表生物领域的高质量原创研究成果、综述及快报。主要栏目：研究报告、技术与方法、综述、行业分析、发展战略
杂志简介：《中国生物工程》杂志经新闻出版总署批准，自1976年创刊，国内刊号为11-4816/Q，是一本综合性较强的生物期刊。该刊是一份月刊，致力于发表生物领域的高质量原创研究成果、综述及快报。主要栏目：研究报告、技术与方法、综述、行业分析、发展战略
作者：李翠琳; 张帆; 陈丹扬; 王昊; 郭强; 杜军 刊期：2014年第08期
目的：利用SUMO标签构建人TNFα原核表达载体,通过表达及纯化获得重组蛋白,为深入研究和利用人TNFα奠定基础。方法：利用PCR技术,从质粒pET32a-hTNFα中扩增出人TNFα成熟肽编码序列,并在其上游添加SUMO标签,与原核表达载体pET28a连接,构建表达质粒pET28a-SUMO-hTNFα。在BL21（DE3）工程菌中表达融合蛋白,经Ni-NTA纯化体系纯化,切除SUMO标签,纯化获...
作者：赵晶; 吕慧; 贾依娜古丽·朱玛拜; 孙素荣 刊期：2014年第08期
目的：构建骆驼蓬脂转移蛋白（lipid transfer protein from Peganum harmala,PhLTP）基因真核表达质粒,并探讨其对黑色素瘤B16细胞在体内外的抗肿瘤作用。方法：将PhLTP基因亚克隆至pcDNA3.1上,获得重组质粒pcDNA3.1-PhLTP;用脂质体转染法将重组质粒及空载体外转染B16细胞,MTT检测其对B16细胞生长的影响。建立B16荷瘤小鼠模型,设重组质粒（pcDN...
作者：丛姗; 王秀梅; 李岩; 宋瑾; 白立恒; 曹贵方 刊期：2014年第08期
目的：观察活体染料羧基荧光素乙酰乙酸（CFSE）标记的人羊膜间充质干细胞对四氯化碳诱导小鼠肝损伤模型的定位修复情况。方法：采用胰蛋白酶-胶原酶消化法从羊膜组织中分离间充质干细胞,通过流式细胞术和免疫荧光等方法进行鉴定。模型组按浓度为20μl/g剂量的四氯化碳和橄榄油混合液诱导小鼠肝损伤,治疗组经小鼠尾静脉注射羧基荧光素乙酰乙酸标...
作者：翟田甜; 马晓玲; 木亚沙尔·买买提拉洪; 李玲霞; 李江伟 刊期：2014年第08期
目的：制备高效价、高特异性的抗CD133胞外区新疆双峰驼来源的多克隆抗体,为制备高亲和力的抗CD133纳米抗体做准备。方法：将CD133胞外区基因序列构建到原核表达载体pET28a中,诱导表达及纯化CD133蛋白,免疫新疆双峰驼及新西兰兔。通过酶联免疫吸附实验（ELISA）和Western blot检测多克隆抗体的效价及与CD133特异性结合活性。结果：ELISA测定抗-C...
作者：江黎涵; 程小龙; 瞿慧萍; 黄逸怡; 王淑佳; 罗勤 刊期：2014年第08期
CcpA是革兰氏阳性菌中由ccpA基因编码的介导碳分解代谢物阻遏的全局调控因子。近年来的研究表明,CcpA不仅参与CCR效应,还直接或间接参与病原细菌毒力基因的表达调控。为探讨CcpA对单核细胞增生李斯特菌（Lm）毒力的影响,应用同源重组方法构建CcpA缺失菌株。以BLAB/c小鼠为实验动物模型,检测野生株EGDe和缺失株EGDeΔccpA侵染小鼠后的半数致死剂量...
刊期：2014年第08期
蛋白质研讨班学员问： 姜老师,您好!我是＂蛋白质分离纯化技术专题研讨班＂的学员,在纯化一个糖蛋白,使用的是单抗与CNBr结合后的亲和层析,洗脱是0.1M甘氨酸,盐酸调节pH至2.5,样品用含有巯基乙醇的5×上样缓冲液煮沸十分钟,但结果显示分子量增加了很多,由36KD左右到了60KD。想向您请教原因。非常感谢!
作者：陈香粉; 鲁洪中; 唐文俊; 唐寅; 储炬; 庄英萍; 张嗣良 刊期：2014年第08期
黑曲霉具备优异的外源蛋白表达和分泌能力,从而被广泛应用于工业酶制剂的生产。通过研究黑曲霉突变株和野生株在相同培养条件下生理参数和代谢流的差异,确定了黑曲霉合成糖化酶过程中的限制性因素。宏观动力学分析发现,较之野生株,突变株具有较高的最大比生长速率,并且副产物得率降低了90%,底物利用率提高了近30%,表明突变株与野生株在碳源分配...
作者：张巍; 王亚伟; 陈丰; 周樱; 熊海容 刊期：2014年第08期
根据已知耐热甘露聚糖酶ManAd3氨基酸序列与毕赤酵母密码子使用偏爱性,设计并合成了甘露聚糖酶ManA全基因（Accession No.KJ806637）,与表达载体pPIC9k重组后,转化毕赤酵母GS115,筛选获得重组菌株ManA-GS115。该重组菌株发酵产物经SDS-PAGE鉴定,其中甘露聚糖酶ManA含量达到电泳纯级别,分子量大小约为30 kDa。其酶学性质检测结果显示该酶最适反应...
作者：岳昌武; 李园园; 吕玉红; 王苗; 邵美云; 刘明皓; 黄英 刊期：2014年第08期
碳水化合物水解酶家族在自然界碳素循环及农业废弃物中几丁质、纤维素等碳水化合物的生物质转化利用中发挥了重要作用。通过PCR技术从海洋链霉菌Streptomyces olivaceus strain FXJ 7.023的fosmid基因组文库中成功克隆得到1个全长885bp的编码295个氨基酸残基的包含1个19个氨基酸残基的N-末端信号肽的壳聚糖酶完全编码区。系统进化分析表明该基因...
作者：杨江科; 毛玲; 周文静; 陈江山; 胡臣 刊期：2014年第08期
脂肪酶（EC 3.1.1.3）是应用广泛的工业用酶。高效的脂肪酶产生菌是脂肪酶工业生产和应用的前提。通过基因的重新设计与合成技术优化了解脂耶氏酵母（Yarrowia lipolytica）脂肪酶YLL的密码子,并实现了其在毕赤酵母（Pichia pastoris）中的高效表达;通过高通量筛选策略获得了更高效的脂肪酶基因工程菌菌株SILVER。在14 L发酵罐条件下,菌株SILVER...
作者：黎亮; 王泽建; 郭美锦; 储炬; 庄英萍; 张嗣良 刊期：2014年第08期
通过对顶头孢霉（Cephalosporium acremonium）FC-01进行诱变选育及特定种子培养基的优化,提高了头孢菌素C的发酵产量。分别采用紫外-氯化锂和钴-60（60Co）γ射线对FC-01进行诱变选育,筛选到高产菌株FC-1-4和FC-4-2,产量较出发菌株分别提高了26%和54.5%。运用Plackett-Burman设计方法和响应面法对种子培养基进行优化,头孢菌素C发酵效价较对照分...
作者：邓珊珊; 王明超; 曹琦琛; 白海红; 彭博; 应万涛; 蔡耘 刊期：2014年第08期
目的：将自合成的超支化聚合物固定到氨基硅球上形成一种新型的糖肽富集材料,用于糖肽的高效分离与富集。方法：阴离子开环聚合法合成的超支化聚缩水甘油,经高碘酸氧化成为超支化聚甘油醛（hyperbranched polyglycerol-aldehydes,HPG-ALD）后固定于氨基硅球上,再用己二酸二酰肼修饰得到的酰肼材料应用于糖肽富集。结果：经扫描电镜（Scanning El...
作者：庄军; 吴祖建 刊期：2014年第08期
植物黄单胞菌病原细菌分泌的TAL效应子（Transcription activator-like effector）可结合特异的双链DNA。TAL是由序列几乎相同的多个DNA结合域的重复串联而构成的,每个DNA结合模块的重复可变双残基特异识别一个DNA碱基。TAL和核酸修饰相关功能域融合而成的定制TAL效应子（dTALE）能特定靶向修饰基因组DNA,在新近遗传工程中扮演重要角色。目前,TA...
作者：满朝来; 唐高霞; 赵丽; 李凤; 甄鑫 刊期：2014年第08期
细胞中DNA甲基化和microRNA（miRNA）相互影响,并共同调控着下游靶基因的表达活性,在细胞生长代谢、免疫、肿瘤和心血管疾病等生理和病理过程中发挥重要作用。首先简要介绍DNA甲基化与miRNA的概况,然后分析了miRNA调控下的DNA甲基化改变,探讨了DNA甲基化影响miRNA的表达活性变化,并归纳了miRNA与DNA甲基化之间的反馈调控关系;最后对DNA甲基化和m...
作者：刘陆罡; 纪晓俊; 沈梦秋; 童颖佳; 黄和 刊期：2014年第08期
Red同源重组技术发展迅速,已经广泛应用于大肠杆菌基因的敲除、插入与替换。与传统的DNA有痕重组技术相比,基于Red重组原理的DNA无痕重组技术,能够更为精确、快速、高效地修饰大肠杆菌基因组中的目标基因,且在基因组中不残留任何外源片段,因此不会影响后续的基因操作与基因表达。从Red同源重组的原理出发,简要综述了近年来在大肠杆菌中广泛使用...
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