杂志简介：《中国生物工程》杂志经新闻出版总署批准，自1976年创刊，国内刊号为11-4816/Q，是一本综合性较强的生物期刊。该刊是一份月刊，致力于发表生物领域的高质量原创研究成果、综述及快报。主要栏目：研究报告、技术与方法、综述、行业分析、发展战略
杂志简介：《中国生物工程》杂志经新闻出版总署批准，自1976年创刊，国内刊号为11-4816/Q，是一本综合性较强的生物期刊。该刊是一份月刊，致力于发表生物领域的高质量原创研究成果、综述及快报。主要栏目：研究报告、技术与方法、综述、行业分析、发展战略
作者：林颖; 李璞; 单敬轩; 陈晓静; 施慧莉; 霍克克 刊期：2012年第08期
RIO3为非典型激酶RIO家族的成员之一,仅在多细胞真核生物中出现,为研究RIOK3蛋白的功能,以其作为诱饵蛋白对成人肝cDNA文库进行酵母双杂交筛选,得到其相互作用蛋白PAK2,并通过细胞内免疫共沉淀和免疫荧光共定位实验验证了该相互作用。实时定量PCR和免疫印迹检测结果显示,RIOK3能够在蛋白水平上降低PAK2表达量。通过CCK-8和细胞凋亡检测,发现二者...
作者：苏曼曼; 陈月; 王丁丁; 许天敏; 颜炜群 刊期：2012年第08期
目的：在毕赤酵母中高效分泌表达与天然人载脂蛋白C-I具有相同结构和活性的重组人载脂蛋白C-I（rhApoC-I）。方法：RT-PCR法自人肝组织调取编码人ApoC-I的cDNA,构建真核分泌型表达载体pPICZα/hApoC-I。重组质粒线性化后转化毕赤酵母感受态细胞,甲醇诱导表达,建立rhApoC-I的毕赤酵母表达体系。对rhApoC-I进行Western blot分析和体外活性研究。结...
作者：李杰萍; 庄庆仁; 兰小鹏; 曾国彬; 罗小锋 刊期：2012年第08期
雌激素（E2）和雌激素受体（ER）在E2诱发的肿瘤中起着极其重要的作用。ER共调节因子通过与ER相互作用调节其生物学功能。PES1主要表达于E2的重要靶器官如乳腺、卵巢等组织中,并在乳腺癌细胞中高表达。用PCR技术构建HA标签的PES1全长以及1～322aa、312～588aa和414～588aa三个不同功能区片段的重组质粒。将不同的重组质粒与FLAG-ERα和或FLAGC-ER...
作者：吴爽; 周东; 张娟辉; 唐松山 刊期：2012年第08期
目的：蛋白转化酶PC2在神经内分泌肽的成熟过程中起到了非常重要的作用,为了研究鼠肿瘤膜型中pc2基因对乳腺癌生长转移的影响,重组并构建了鼠源pc2基因。方法：提取大鼠脑垂体总RNA,通过RT-PCR方法克隆并扩增了鼠源pc2的cDNA。将pc2基因的cDNA插入pCDNA3.1/Zeo载体构建成pCDNA3.1-pc2重组载体。通过pCDNA3.1-pc2或和它的分子伴侣基因7b2的共表达...
作者：冯舵; 张阔; 李倩倩; 韩翠晓; 高伟 刊期：2012年第08期
Sf2523蛋白属于硫氧还蛋白过氧化物酶（Prx）家族,在有氧代谢过程中消除活性氧,起到保护生命大分子的重要作用。通过构建原核表达体系,可溶性表达并纯化了Sf2523酶蛋白,并对蛋白进行了过氧化物酶活性检测,证明其依然具有天然活性,酶的核心结构并未发生变化。由分子排阻色谱结果发现,酶蛋白体内和体外聚集状态不同,离体蛋白聚集状态不稳定,趋于二...
作者：李锐; 王文国; 范林洪; 王胜华 刊期：2012年第08期
对金发草（Pogonatherum paniceum）第3组LEA蛋白（PpLEA3）基因两个剪接体进行分析,并利用酿酒酵母表达系统分析两个剪接体在不同非生物胁迫的响应差异。以PpLEA3基因两个剪接体（PpLEA3.a和PpLEA3.b）的重组载体pMD19-T-PpLEA3.a和pMD19-T-PpLEA3.b为模板,PCR法构建酵母表达载体pYES2-PpLEA3.a和pYES2-PpLEA3.b,并转化酿酒酵母细胞得到重组菌I...
刊期：2012年第08期
蛋白质研讨班学员问：姜老师,您好!我是您＂蛋白质分离纯化技术专题研讨班＂的学员。我们准备用溴化氰活化介质偶联α-银环蛇毒素装柱,溴化氰活化的琼脂糖4B是某知名公司的,空柱还没定,说明书上推荐的是HR 16/10。请问这款柱子我们可以用吗？急切盼望您的回复,谢谢!
作者：汪婷婷; 季静; 王罡; 关春峰; 张烈; 金超 刊期：2012年第08期
以玉米自交系天塔五母、7922的芽尖为受体,用农杆菌介导法将psy基因转入玉米中。以植株的转化率为指标,研究了真空处理方式,真空处理时间及共培养时间对转化率的影响。结果表明,当在真空条件下侵染20min,共培养3天时转化率最高。用200mg/L的草胺膦溶液筛选,获得抗性植株经PCR检测有16株表现阳性,其中天塔五母有12株,7922有4株。RT-PCR及高效液相...
作者：朱宽鹏; 赵树进 刊期：2012年第08期
目的：建立一套探究植物基因功能的方法体系,验证由芪合酶基因保守序列通过RACE扩增技术在何首乌中得到的基因Fm-STS的功能。方法：由含CaMV 35S启动子驱动的gfp基因的植物转基因表达基础质粒pBIN-35S-GFP构建过表达质粒pBIN-35S-STS-GFP（阳性）和双链RNA干扰重组质粒pBIN-35S-正向-反向-GFP（阴性）,并同空白表达质粒pBIN-35S-GFP（空白）均导...
作者：李倩倩; 李中媛; 冯舵; 黄火清; 韩翠晓; 杨培龙; 姚斌; 高伟 刊期：2012年第08期
目的：来源于芽孢杆菌的β-折叠桶植酸酶基因PhyH,截去N端120个碱基编码的40个氨基酸后,成功构建了原核表达体系,通过两种方法分别得到有活性的目的蛋白PhyHT,并通过进一步纯化提高目的蛋白的纯度。方法：通过分子伴侣共表达系统提高目的蛋白的可溶性表达,并通过包涵体复性研究,从包涵体中制备出有活性的目的蛋白。结果：（1）目的蛋白PhyHT主要...
作者：林琼珊; 唐咸来; 李献; 蒋承建; 李俊芳; 申佩弘 刊期：2012年第08期
八氢番茄红素脱氢酶（CrtI）催化八氢番茄红素经过4次脱氢合成番茄红素,或者经过3次脱氢合成链孢红素,在类胡萝卜素的生物合成中发挥重要的作用。以甲基营养菌Methylobacterium sp MB200为原始菌株,首先采用转座子突变技术构建部分突变体库共11552株,筛选得到33株颜色发生变化的目的突变体,随后利用分子克隆技术从目的突变体中获得crtI基因的完...
作者：郭云萍; 孙璐; 张立剑; 王增禄; 高超; 杨强; 刘毅; 张英起; 屈延; 陶凌 刊期：2012年第08期
目的：利用基因工程的方法原核表达无标签的重组人硫氧还蛋白（rhTrx）并对其进行大规模表达、纯化和鉴定。方法：从人胚胎肾HEK293细胞中提取总RNA,反转录合成cDNA,经PCR扩增、酶切后连入pET-22b（＋）载体构建重组质粒,重组质粒转化大肠杆菌BL21（DE3）感受态细胞,IPTG诱导表达,经两步离子交换层析纯化重组蛋白,采用SDS-PAGE、Western blottin...
作者：石永乾; 何文腾; 周洋; 焦明霞; 解炳腾; 胡魁; 孔庆然; 刘忠华 刊期：2012年第08期
目的：通过建立慢病毒载体感染猪胚胎体系实现胚胎标记,进而研究不同发育阶段猪孤雌胚胎之间的嵌合能力,为进一步研究猪早期胚胎发育以及细胞分化奠定基础。方法：首先,通过显微注射的方法把2×109I.U./ml、2×108I.U./ml和2×107I.U./ml三个梯度的表达绿色荧光的慢病毒载体分别注射到猪1-细胞胚胎和2-细胞胚胎的透明带下,进行胚胎的GFP转基因标记,...
作者：张丽铃; 王筱兰 刊期：2012年第08期
采用正交设计法对耐底物腈水合酶融合子的发酵条件进行优化,以发酵液起始pH,发酵周期,接种量,装料系数作为考察因素,最终确定最佳发酵条件为：起始pH8.0、发酵周期54h、接种量12%、装液系数12%。在此优化条件下融合子腈水合酶的活力达到1100万U/ml,较优化前提高了83.3%。通过响应面法对发酵培养基配方进行优化研究,采用Plackett-Burman法对8个因...
作者：王琛; 朱化彬; 刘玲; 郝海生; 赵学明; 冯荣; 杜卫华; 秦彤; 刘岩; 黎宗强; 王栋 刊期：2012年第08期
精原干细胞移植为研究精子发生、雄性生殖能力及新型转基因技术奠定了基础。尽管已利用小鼠建立了较成熟的移植技术体系,白消安受体制备法和曲细精管及睾丸网移植法已得到广泛应用,但白消安可导致动物较高的死亡率,局部射线照射和无内源性精子发生受体动物的制备费用较昂贵,热处理受体制备法应用范围较窄且效果不稳定;三种移植方法均对操作有较...
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