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高脂环境下五指山小型猪和西藏小型猪冠心病相关血脂和炎症易感基因的表达

作者：郁晨; 刘志华; 潘永明; 徐孝平; 徐剑钦; 杨钦钦; 蔡兆伟; 陈民利 刊期：2019年第05期

Hpd基因修饰制备高酪氨酸血症Ⅲ型巴马小型猪模型

作者：顾鹏; 陈傍柱; 徐涛; 刘闻; 邓俊成; 徐名衬; 袁进; 陈恩生; 顾为望 刊期：2019年第05期

目的利用CRISPR/Cas9技术敲除巴马小型猪4-羟基苯丙酮酸氧化酶(4-O Hphenylpyruvate dioxygenase,4HPPD/HPD)制备高酪氨酸血症Ⅲ型巴马小型猪模型。方法分别从质粒pGL3-U6-gRNA-PGK-puromycin和pST1374-NLS-flag-linker-Cas9中通过PCR扩增sgRNA-Hpd和Cas9体外转录用模板,接着体外转录出Cas9mRNA和sgRNA-Hpd,最后将Cas9mRNA和sgRNA-Hpd共注射入巴...

西藏小型猪多组织组蛋白修饰谱研究

作者：陈娜; 刘闻; 秦锐; 于欣鑫; 顾为望; 高飞 刊期：2019年第05期

目的对西藏小型猪全基因组范围内的组蛋白修饰位点进行注释,并比较不同组织间组蛋白修饰的差异。方法取三月龄的雄性非同胎西藏小型猪两只,分别取其血液、肝、小肠(回肠段)和背最长肌的组织样本,进行染色质免疫共沉淀实验,捕获 DNA 片段进行高通量测序。下机数据经过滤后比对到参考基因组上,并使用 MACS 软件统计reads在基因组上的富集情况。结...

基于Tet-On系统构建Alb启动子调控猪uPA转基因表达的慢病毒载体

作者：刘宇; 陈恒伟; 温悦婷; 贾俊双; 林晓琳; 肖东 刊期：2019年第05期

目的应用 Tet-On 基因表达调控系统构建 Alb 启动子调控小型猪 uPA (pig urokinase-typeplasminogen activator,puPA)基因表达的慢病毒载体 pLVX-Alb-TetOne-TRE-puPA-T2A-CopGFP(pLATTPUTG)。方法首先将pAlb-Cre-GH/BS作为模板,PCR扩增目的基因Alb-enhancer/promoter,In-Fusion克隆至XhoI/XbaI双酶切的 pLVX-TetOne 中,获得 Alb 启动子替换 pLV...

FAH基因敲除克隆小型猪的制备及繁育

作者：王莎莎; 朱辉斌; 卢晟盛; 潘登科 刊期：2019年第05期

目的供体的短缺是器官移植所面临的主要问题,制备人源化器官是解决此问题的有效途径之一。缺乏延胡索酸乙酰乙酸水解酶(fumarylacetoacetate hydrolase, FAH)会引起遗传性酪氨酸血症Ⅰ型(hereditarytyrosinemiatypeⅠ,HTⅠ),致使患者肝细胞凋亡,呈现出肝损伤。对猪(Susscrofa)进行基因编辑,建立FAH基因敲除巴马小型猪,结合人干细胞将有利于人源...

前列腺癌人源性异种移植裸鼠模型的建立与治疗

作者：陈薛; 谭邓旭; 赵宁宁; 赵勇; 张彩勤; 白冰; 师长宏 刊期：2019年第05期

目的建立前列腺癌人源性异种移植(patient-derived xenograft,PDX)模型,评价不同治疗方案的抗肿瘤效果。方法将人新鲜的前列腺癌手术标本与基质胶混合后移植入补充有外源性雄激素的裸鼠皮下,连续监测肿瘤生长,评估其保真度并连续传代;将荷瘤鼠分为四组:多西他赛组、去势组、多西他赛联合去势组以及对照组,治疗期间测量肿瘤体积及小鼠体重变化,治...

CRISPR/Cas9系统介导Slc6a6基因敲除大鼠的繁殖与鉴定

作者：仝慧慧; 齐浩铭; 王辰; 莫丽冬; 范维佳; 徐立霞; 么秀华; 夏一鸣; 黄慧玲 刊期：2019年第05期

目的利用CRISPR/ Cas9 技术构建牛磺酸转运体基因(solute carrier family 6 member 6,Slc6a6)敲除大鼠,繁殖并鉴定,为研究牛磺酸缺失对神经系统疾病的影响提供稳定的大鼠模型。方法针对Slc6a6 基因第5外显子,设计向导RNA(single-guide RNA,sgRNA)介导Cas9 核酸酶与靶点DNA 特异性结合,并切割基因组DNA,被切割后的DNA 进行重组修复,从而实现基因...

三种方法气管灌注博来霉素诱导小鼠肺纤维化的比较

作者：王志超; 冯凡超; 武琦; 顾诚; 徐泳; 周贤梅 刊期：2019年第05期

食蟹猴血糖值与季节性气温变化的关系

作者：孙云霄; 张艳春; 饶军华; 季芳; 靳丽莎; 刘晓明; 张礼标 刊期：2019年第05期

目的检测并分析食蟹猴血糖值一年内季节性变化,考察食蟹猴血糖值在不同季节间是否存在显著差异。同时比较便携式血糖仪与全自动生化分析仪测定值之间差异。方法采集食蟹猴静脉血,利用全自动生化仪及便携式血糖仪检测不同季节食蟹猴血糖值,进行比较分析。结果显示食蟹猴血糖值呈现夏季最低,冬季最高,春秋位于两者间的周期性波动。且夏→秋和冬→...

结肠癌肝转移裸鼠模型的建立

作者：李华驰; 熊治国; 谢敏; 谈凯; 殷涛; 冯茂辉 刊期：2019年第05期

目的构建一种转移率高、操作简便、结果可靠的结肠癌肝转移模型,用于结肠癌转移防治的实验研究。方法 15只Balb/c裸鼠平均分为3组(A组、B组、C组),5只Balb/c小鼠单独为D组,以细胞浓度2.5×10^7 / mL 的 HCT116、CT26 细胞悬液 0. 2 mL 分别行脾种植保脾法及切脾法构建结肠癌肝转移模型,对比四组动物模型造模成功率及肝转移灶大小、数目及腹腔内转...

Mfge8 基因敲除纯合子小鼠的定向繁殖和鉴定及其与自身免疫疾病相关性分析

作者：杨文强; 黄伟; 马威; 崔天盆 刊期：2019年第05期

目的繁殖和鉴定Mfge8基因敲除C57BL/6小鼠,获取纯合子(Mfge8^-/-)小鼠,并比较Mfge8^-/-小鼠血清学及组织学改变。方法 对幼鼠剪尾抽提基因组DNA,用PCR 法和琼脂糖凝胶电泳法鉴定幼鼠基因型;利用TUNEL 法分别检测12 周龄野生型(WT)和Mfge8^-/-小鼠肺组织中凋亡细胞;并且利用免疫荧光法分别检测36周龄WT 和Mfge8^-/-小鼠血清中ANA和AECA含量。结果...

犬体内唾液酸受体的组织分布及对 H3N2 亚型犬流感病毒的易感性研究

作者：秦海斌; 强京宁; 宋珍华; 贺星亮; 温海; 朱骞; 包喜军; 宋庆平 刊期：2019年第05期

目的测定犬体不同组织器官内流感病毒受体的类型和分布差异,验证犬对 H3N2 亚型犬流感病毒的易感性。方法采集健康英国史宾格犬的不同组织器官,利用凝集素免疫荧光组织染色方法,检测组织内人型流感病毒唾液酸受体唾液酸α2,6-半乳糖(SAα2,6Gal)和禽型流感病毒唾液酸受体唾液酸α2,3-半乳糖(SAα2,3Gal)类型与分布;用 H3N2 亚型犬流感病毒人工感染英...

红系祖细胞在造血缺陷斑马鱼体内的移植

作者：李志操; 黄波; 向文碧; 孙琮杰; 吴西军; 周艳华; 何志旭; 舒莉萍 刊期：2019年第05期

目的评估红系祖细胞在先天原始造血缺陷cloche^-/-突变体斑马鱼体内的移植效果。方法收集绿色荧光标记红系祖细胞的转基因系zTg(gata1 :EGFP)斑马鱼胚胎,制备成单细胞悬液,经流式细胞仪分选出携带绿色荧光的gata1^+细胞,利用显微注射技术将gata1 +细胞移植到42hpf的cloche^-/-突变体斑马鱼心脏中,采用体视荧光显微镜追踪观察移植后的红系祖细胞...

姜黄素对2型糖尿病大鼠脂肪细胞葡萄糖转运及PI3K/Akt信号通路的影响

作者：陈洁; 刘一然 刊期：2019年第05期

microRNA-1247通过靶向CCR16抑制脂多糖诱导的小鼠急性肺炎的机制

作者：丁秀秀; 黄琳惠; 黄奕江 刊期：2019年第05期