杂志简介：《农业生物技术学报》杂志经新闻出版总署批准，自1993年创刊，国内刊号为11-3342/S，是一本综合性较强的科学期刊。该刊是一份月刊，致力于发表科学领域的高质量原创研究成果、综述及快报。主要栏目：研究论文与报告、研究评述与展望、研究资源与技术改进
杂志简介：《农业生物技术学报》杂志经新闻出版总署批准，自1993年创刊，国内刊号为11-3342/S，是一本综合性较强的科学期刊。该刊是一份月刊，致力于发表科学领域的高质量原创研究成果、综述及快报。主要栏目：研究论文与报告、研究评述与展望、研究资源与技术改进
作者：顿继凤; 周迎春; 蒲娟; 刘金华 刊期：2007年第04期
从质粒pGEM-HA中扩增H5N1亚型禽流感病毒（Avian influenza virus,AIV）血凝素（Hemagglutinin,HA）基因,构建转移载体pFastBacHT-HA并与大肠杆菌（Escherichia coli）DH10Bac中的Bacmid质粒重组,构建重组转座质粒rBacmid-HA.在脂质体介导下将rBacmid-HA转染sf9昆虫细胞获得重组杆状病毒.在sf9昆虫细胞中表达HA蛋白,通过SDS-PAGE、Western blot...
作者：王新卫; 毕英佐; 马静云; 曹永长; 王宪文; 詹爱军 刊期：2007年第04期
利用PCR技术,扩增去除部分序列,长度为1 320 bp,编码440个氨基酸的禽流感病毒（AIV）核蛋白基因片段,将其克隆至pR质粒的T4噬菌体SOC基因C末端获得重组质粒pR-np,以此重组载体转化大肠杆菌（Escherichia coli）2（E2）,用溶菌酶缺陷噬菌体T4-z1感染重组E2菌,重组载体与缺陷噬菌体T4-z1基因发生同源重组,将np基因整合到噬菌体基因组中,用PCR方法...
作者：王晓艳; 高宏雷; 高玉龙; 程宇; 王笑梅 刊期：2007年第04期
以纯化的重组鸡贫血病毒结构蛋白为抗原,免疫6～8周龄的雌性Balb/c鼠,经过3次免疫后,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,共获得6株能稳定分泌特异性抗体的阳性细胞株.间接免疫荧光实验证实,6株单抗与鸡贫血病毒（Chicken anemia virus,CAV）感染的MDCC-MSB1细胞发生特异性反应.Western blot结果表明,单抗与杆状病毒表达的VP1重组蛋白发生特异...
作者：李建强; 柳纪省; 兰喜; 程杰; 杨敏; 吴润; 殷相平; 李宝玉; 李学瑞; 杨彬 刊期：2007年第04期
对猪流行性腹泻病毒（Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV）DX株纤突蛋白基因进行了克隆与测序.结果表明,该基因核苷酸序列长为4 152 bp,推导氨基酸序列为1 383 aa,与比较毒株氨基酸同源性都在90%以上.系统发生树分析结果表明,比较毒株可分为3个基因群,而且每个群的毒株均来自同一个国家.利用生物软件分析结果表明PEDV发生微小的变异,尤其在...
作者：陈尔曼; 黄复深; 邱元; 郝知友; 袁鑫 刊期：2007年第04期
根据GenBank中SjFer序列设计1对特异引物,以日本血吸虫（Schistosoma japonicum）cDNA文库为模板扩增SjFer基因,常规方法构建质粒pcDNA3.0/SjFer、pcDNA3.0/GM-CSF及pcDNA3.0/SjFer-GM-CSF.85只昆明小鼠分A、B、C、D和E组,分别于0、2和4周通过左后肢股四头肌注射生理盐水50 μL/只,质粒50 μg/只.感染前和每次免疫前采血收集血清,ELISA检测特异性I...
作者：朱骞; 张汇东; 葛菲菲; 缪勤; 曹瑞兵; 陈溥言; 徐汉坤 刊期：2007年第04期
以ConA刺激的犬外周血淋巴细胞总RNA为模板,通过RT-PCR方法扩增出犬IL-2成熟蛋白基因,将目的片段连接到pMD18-T载体,测序结果显示,扩增片段与GenBank上的序列一致.然后将目的片段连接到酵母表达载体pPICZa-A上,得到重组酵母犬IL-2表达载体pPICZaA-CaIL-2,经Sac Ⅰ酶切线性化后电转化导入毕赤酵母菌株（Pichia pastoris）X-33.PCR方法筛选重组酵...
作者：田兆菊; 郑玉姝; 刘翠艳; 胡敬东; 赵宏坤 刊期：2007年第04期
将牛白细胞介素18（bovine interleukin-18,BoIL-18）的成熟蛋白基因亚克隆到原核表达载体pGEX6p-1中,并转化至大肠杆菌（Escherichia coli）BL21（DE3）获得重组菌株.该重组菌经0.3 mmol/LIPTG诱导8 h,SDS-PAGE电泳表明,BoIL-18融合蛋白获得了高效表达,分子量约为44kD,凝胶薄层扫描分析显示,融合蛋白占工程菌菌体总蛋白的31.8%;用亲和层析法对...
作者：陈红英; 崔保安; 夏平安; 李新生; 杨明凡; 郑兰兰 刊期：2007年第04期
应用RT-PCR技术,直接从麻鸭（Tadorna ferruginea）脾淋巴细胞总RNA中扩增出麻鸭IL-18成熟蛋白（mDuIL-18）基因,克隆到pGEM-T Easy载体.测序结果表明获得了mDuIL-18基因,其大小为513 bp,并将该基因亚克隆到原核表达载体pQE30.SDS-PAGE可检测到分子质量为19.76 kD的重组蛋白,Western blot证实该重组蛋白可与兔抗鸡IL-18血清发生特异性反应.表达...
作者：王燕; 汪以真 刊期：2007年第04期
从杜×（长×大）母猪的股骨骨髓中提取基因组RNA,用RT-PCR扩增抗菌肽PMAP-37基因,获得1条约282 bp的片段,以pGEM-T Easy vector为载体,将该基因片段克隆到大肠杆菌（Escherichia coli）DH5α中.从筛选的阳性克隆中分离出PMAP-37基因,测定其序列.分析表明,该片段为PMAP-37 cDNA的部分序列,编码167个氨基酸组成的多肽.研究得到的基因片段与报道的猪...
作者：左伟东; 余泉友; 李斌; 刘志; 代方银; 鲁成 刊期：2007年第04期
谷胱甘肽-S-转移酶（GSTs）是昆虫体内重要的解毒酶系,在对外源和内源化合物解毒代谢中起着重要的作用.以GenBank中已知的昆虫GST的氨基酸序列在家蚕（Bombyx mori）基因组序列中作TBLASTN检索,获得了多个可能的家蚕GST同源基因.对其中的一个GST新基因进行了EST分析和克隆,结果表明,该基因编码区全长663 bp.以该基因推导的氨基酸序列与其它物种...
作者：王丽云; 王金玉; 陈宽维; 于佳慧; 杨燕; 张跟喜 刊期：2007年第04期
根据GenBank上的Ghrelin基因的序列设计了2对引物,用PCR-SSCP方法检测了140只京海黄鸡和30只苏禽黄鸡的该基因的多态性.结果表明,引物1在两个鸡品种中均未检测到多态;引物2检测到多态：其中京海黄鸡有BB、BC和CC3种基因型;苏禽黄鸡中只检测到BB和BC两种基因型.在2个鸡品种中B等位基因为优势基因,分布较高,其中在苏禽黄鸡中BB基因型频率达0.933,...
作者：吴圣龙; 鞠慧萍; 孙鹏翔; 黄军; 包文斌; 华金弟; 黄雪根; 陈国宏 刊期：2007年第04期
采用PCR-RFLP技术对苏太猪SLA-DQB及SLA-DRB基因第2外显子PCR产物进行分析.结果表明,苏太猪SLA-DQB基因经Rsa Ⅰ酶切后共产生3种等位基因,5种基因型;SLA-DRB基因经Rsa Ⅰ酶切后共产生3种等位基因,4种基因型.x2适合性检验表明,苏太猪SLA-DQB及SLA-DRB基因外显子2的Rsa Ⅰ酶切位点均达到了Hardy-Weinberg平衡状态.将SLA-DQB和SLA-DRB基因的基因型...
作者：丁红梅; 徐世永; 邵根宝; 孙岩; 王蒙; 刘红林 刊期：2007年第04期
提取第28期伊萨鸡（Gallus domesticus）生殖嵴原始生殖细胞（PGCs）,将其与性腺基质细胞共培养,并对PGCs进行PAS（过碘酸希夫试剂）和AKP（碱性磷酸酶）染色鉴定.构建pL-CMV-eGFP慢病毒表达载体,与辅助质粒共转染293FT细胞生产病毒颗粒.将慢病毒浓缩后转染鸡胚PGCs,转染率高达24.19%.
作者：孙红梅; 杨公社; 孙超 刊期：2007年第04期
利用差速贴壁法分别纯化前体脂肪细胞与肌卫星细胞,按1∶10的浓度比接种混合培养.以单独两类细胞培养作对照,采用油红O染色和Desmin免疫组化染色鉴定,通过形态学观察和MTT比色绘制生长曲线研究细胞生长规律.结果表明,Desmin免疫组化染色观察肌细胞阳性率达97%以上,油红O染色计数诱导分化细胞比率大于60%;形态学观察发现,联合培养细胞接触汇合前...
作者：王赟; 赵婷; 乔海; 杨春荣; 张翊华; 王华岩; 窦忠英 刊期：2007年第04期
从胎猪胰腺分离得到1株细胞,该细胞经免疫组化检测表达胰肠同源域因子1（pancreatic duodenal homeobox-1,PDX-1）、葡萄糖转运子2（glucose transporter-2,GLUT-2）、增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen,PCNA）、胰高血糖素（glucagon）、生长抑素（somatostatin）、胰多肽（pancreatic polypeptide）和弱表达巢蛋白（nestin...
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