作者:范海延; 陈捷; 曲波; 苗青; 李楠 期刊:《生物学通报》 2006年第01期
蛋白质组学是后基因组时代出现的一个新兴研究领域。简要介绍了蛋白质组学的研究意义及其研究内容与技术手段,及蛋白质组研究在植物科学中的应用。
作者:侯丽娜; 刘炜烨; 贾小平; 李亮; 李小溪 期刊:《转化医学电子》 2017年第08期
目的:分析慢性心力衰竭患者尿液双向电泳技术的影响因素以提高其分辨率及稳定性.方法:采用超滤法富集并浓缩尿液蛋白,Bradford法测浓度后进行双向电泳,凝胶经银染显色后,用Melanie 4软件分析双向电泳图谱.分别对蛋白上样量,聚焦参数等步骤进行优化.结果:超滤浓缩法,150μg的上样量,60 KVh的聚焦总伏特数,进行的双向电泳图谱分辨率高,稳定性好.结论:对上样量和聚焦总伏特数优化后可获得稳定性高和重复性好的慢性心力衰竭患者尿液...
作者:翁瑜; 曾群力; 姜槐; 许正平 期刊:《中国生物化学与分子生物学报》 2005年第05期
组织(或细胞)的蛋白质提取效率直接影响蛋白质双向凝胶电泳(2-DE)的分辨率.为探索建立适用于人乳腺癌细胞株MCF-7蛋白质提取的最佳条件,比较目前在双向凝胶电泳中常用的3种蛋白质提取方法对MCF-7细胞总蛋白的提取效率.MCF-7细胞经培养后,分别采用M-PER试剂、标准裂解液或含硫脲裂解液提取其总蛋白质,然后进行双向凝胶电泳,并根据凝胶上蛋白质斑点的丰度和分布特点判断所得双向电泳图谱的质量,以确定MCF-7细胞蛋白质提取的相对最佳...
作者:田帅(综述); 孟凡义(审校) 期刊:《国际内科学》 2005年第11期
蛋白质组学是在细胞整体水平上研究蛋白质组成和动态变化的一门新兴学科.研究技术的主要步骤包括双向凝胶电泳(2-DE),蛋白质的鉴定技术和相应的信息处理及数据库查询三大方面.随着研究的深入,技术方法也日趋成熟.不仅在实体肿瘤中取得有意义的结果,而且在恶性血液病的预后和耐药机制方面也显示了良好的应用前景.
作者:李焕敏; 邵明; 吴卓华; 谭红愉; 周细武; 孔天翰 期刊:《广州医科大学学报》 2011年第05期
目的:通过脑脊液蛋白质组学实验技术体系,筛选并鉴定帕金森病患者脑脊液特异蛋白,初步探讨帕金森病的发病机制。方法:选自广州医学院第一附属医院神经内科与脑深部电刺激术(deepbrainstimulation,DBS)治疗中心帕金森病患者和对照组脑脊液为研究对象,进行双向凝胶电泳,经银染、图像分析寻找差异蛋白质,并进行质谱分析鉴定。结果:鉴定得到4种差异蛋白质,分别是CENP—E、Tetranectin非钙离子C型凝集素样结构域、假想蛋白F...
作者:郝会军; 刘英; 丁雪珍; 陈美霞 期刊:《潍坊高等职业教育》 2007年第01期
本文主要介绍了蛋白质组的含义以及蛋白质组研究的核心——用于分离的双向式电泳(2-DE)技术和主要的蛋白质鉴定技术包括图象分析技术、微量测序、与质谱相关的一些应用技术,同时,对蛋白质研究的新进展如双向电泳数据库和蛋白质组数据库,作简要介绍。
作者:杨烨; 张春燕; 林海英; 王斌; 邬丽莎 期刊:《西南医科大学学报》 2011年第03期
比较吗啡成瘾与正常大鼠前额叶皮质(prefrontal cortex,PFC)蛋白质双向电泳图谱,可找和鉴定吗啡成瘾人鼠PFC中的差异表达蛋白质。方法:以固相pH梯度等电聚焦为第一向和垂直SDS—PAGE为第二向,分别对正常对照火鼠和吗啡:成瘾大鼠的PFC蛋白质样品进行二维分离,2-DE图谱经ImageMaster2DPlatinumv5.0软件分忻,选取4个簋异蛋白点用荩质辅助激光解吸附离子化飞行时间质谱(MALDI—TOF—MS)进行鉴定。结果:通过对2-DE图谱蛋白...
作者:刘颖丽; 杜克久; 裴东 期刊:《林业与生态科学》 2006年第03期
蛋白质组学是后基因组时代的新兴领域,本文简要介绍了其研究内容和方法,特别介绍了蛋白质组学的关键技术——双向凝胶电泳和质谱,概括了蛋白质组学在草本及木本植物中的主要研究进展,展望了植物蛋白质组学的发展前景。
对于双向凝胶电泳实验来说最重要的环节就是样品制备,样品的好坏直接关系到整个实验最终的成败。本文将对样品制备进行简要的阐述,并以大肠杆菌为例介绍具体的制备步骤。
作者:孙晓敏; 刘艳艳; 张乐; 罗仁; 赵晓山 期刊:《时珍国医国药》 2011年第10期
目的初步观察IgA肾病肾阴虚证患者血浆蛋白质组的变化与表达差异,为进一步探讨肾阴虚证的发生机制奠定基础。方法采用双向凝胶电泳(2-DE)技术分离IgA肾病肾阴虚证患者、肾阳虚证患者与正常人血浆总蛋白,银染显色;PDQest软件对凝胶图像进行定性定量差异表达分析;从中选取差异表达蛋白质斑点,通过基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)分析,获取肽质量指纹图谱(PMF);通过Mscot-Wizard软件进行数据库搜索,鉴定蛋白质...
作者:孙志岭; 王玲; 王富强; 许志洋; 钱鑫; 纪伟 期刊:《时珍国医国药》 2013年第01期
目的应用蛋白质组学技术,开展中医湿热痹阻证证候学研究。方法对类风湿性关节炎湿热痹阻证(n=12)、类风湿性关节炎肝肾阴虚证(n=12)、正常对照(n=12)共三组血清,分别进行双向凝胶电泳,通过软件分别比较湿热痹阻证组和其他两组图谱,找出共同的湿热痹阻证差异蛋白质点,应用基质辅助激光解吸飞行时间质谱进行鉴定。结果对14个湿热痹阻证共同的差异蛋白点,应用质谱进行鉴定和SwissProt数据库检索,得到9个湿热痹阻证差异蛋白,涉及...
作者:马海鸥; 李巨; 苏畅 期刊:《中国妇幼保健》 2009年第09期
目的:建立人绒癌耐药细胞株JAR/MTX蛋白质组双向凝胶电泳图谱。方法:用含10%胎牛血清的RPMI—1640培养液培养JAR/MTX细胞,胰酶消化后收集细胞,加入细胞裂解液使细胞充分裂解,离心后取上清液进行双向凝胶电泳和考马斯亮蓝染色,应用PDQuest图像分析系统进行凝胶图谱分析,从凝胶图中选取1个分离较好的蛋白质点,应用四极杆一飞行时间质谱(Q-TOF-MS)和数据库搜索鉴定蛋白质。结果:获得了背景清晰、分辨率和蘑复性较好的双...
作者:吕静瑶; 李志海; 蔡志毅 期刊:《中国现代医生》 2012年第06期
目的通过对人类的喉癌组表达差异中的高、低分化癌组之间的相互差异性的研究,运用网上数据库对不同蛋白点的肽指纹图进行分析和鉴定。方法选取本院耳鼻喉科2011年1~5月喉癌患者的病理临床资料进行回顾性分析与研究。结果随机将新鲜喉癌标本分为高分化癌组和低分化癌组,并提取两组的组织总蛋白进行双向凝胶电泳分析,将分析结果与正常黏膜组织对照,将得到的高分化与低分化癌组织之间的表达式进行比较分析。结论高分化癌组织与低...
作者:侯小凡; 宋鸿雁; 杨纤纤; 宋添铖; 邵义祥 期刊:《动物医学进展》 2018年第05期
为从蛋白质水平上探讨B6-Co突变系小鼠眼睑发育缺陷的发生机制,利用蛋白质组学技术分析B6-Co突变系小鼠和B6小鼠眼睑组织蛋白质组,以寻找B6-Co突变系小鼠眼睑组织的差异表达蛋白。取胚胎期16.5dB6-Co小鼠与B6小鼠眼睑组织,提取眼睑组织总蛋白,通过双向凝胶电泳技术检测,共筛选出29个差异蛋白点,其中7个蛋白点表达上调,22个蛋白点表达下调;再利用质谱分析结合数据库检索,共鉴定出6个表达上调蛋白,18个表达下调蛋白。研究结果表明,B6...
作者:罗小敏; 崔妍; 陈彤; 朱宝成 期刊:《生物技术通报》 2004年第04期
目前功能基因组研究开展得如火如荼,蛋白质组研究是阐明基因组所表达的真正执行生命活动的全部蛋白质的表达规律和生物功能,而植物蛋白质组研究是21世纪整体细胞生物学最重要的内容,将为医药、农业和工业的革新提供崭新的思路.当前主要的研究手段为双向凝胶电泳、双向高效柱层析、质谱分析和生物信息学.
作者:潘卫; 王应雄; 黎刚; 翁亚光; 陈雪梅 期刊:《中国生物工程》 2004年第04期
目的研究小鼠子宫内膜胚泡着床点和着床旁蛋白质表达图谱及其差异.方法用固相pH梯度双向凝胶电泳分离5d.p.c.(days postcoitum)小鼠子宫内膜胚泡着床点和着床旁总蛋白,同时分离同龄未交配小鼠子宫内膜总蛋白,银染显色,PDQuest 2DE软件分析.结果图像分析测得三块胶的匹配率达74.5%以上,在等电点pI 3~10、分子量14.4~75.4 kD范围内分离得未交配小鼠子宫内膜蛋白点大约810个,受孕小鼠子宫内膜胚泡着床旁和着床点蛋白质点分别大约为9...
作者:丁学知; 邹先琼; 孙运军; 付祖姣; 高必达; 夏立秋 期刊:《农业生物技术学报》 2005年第03期
以苏云金芽孢杆菌(Bacillusthuringiensis,Bt)4.0718菌株伴孢晶体65 kD原毒素为材料,比较了几种染色-脱色方法对电洗脱回收蛋白的影响.蛋白纯化的步骤包括SDS-PAGE分离、采用自制蛋白回收装置电洗脱回收杀虫晶体蛋白及抗胰蛋白酶核心多肽、超滤法脱盐、冷丙酮沉淀法除去考马斯亮蓝及SDS.经SDS-PAGE检测,呈现出均一的蛋白带,回收蛋白达到了电泳纯.以双向凝胶电泳(2-DE)技术分析了苏云金芽孢杆菌库斯塔克亚种HD-1和4.0718菌株伴孢晶...
作者:张慧敏; 姚善泾; 彭立凤; 清水和幸 期刊:《生物工程学报》 2004年第03期
为了分析酿酒酵母在不同培养条件下的代谢调控过程的差异,采用固相pH梯度-SDS聚丙烯酰胺双向凝胶电泳对其利用不同碳源时细胞的总蛋白进行了分离,银染显色,使用2D蛋白质图像分析系统Image Master 2DElite对双向电泳图谱进行分析,查询SWISS-2D PAGE蛋白质组数据库,识别了约500个蛋白质点.对与糖酵解途径、磷酸戊糖途径、三羧酸循环和几种回补反应相关的大部分关键的蛋白质进行了差异分析.探讨了酿酒酵母利用不同碳源时及生长的不同...
作者:彭勇; 史绍蓉; 黄思敏; 徐哲; 郭远盘 期刊:《中国康复医学》 2019年第05期
目的:基于蛋白质组学的研究技术与方法,研究4周中等强度有氧运动对大鼠心房肌蛋白质组差异表达的影响,揭示中等强度有氧运动对心房肌物质能量代谢影响的规律。方法:建立速度24m/min、持续时间40min(负荷强度相当于60%—70%VO2max),持续训练4周的中等强度有氧运动实验动物模型。应用双向凝胶电泳技术(2-DE)分离心房肌蛋白质点,串联飞行时间质谱仪技术鉴定电泳结果中表达量上调≥5倍以上,下调至1/5以下的13个备选目标蛋白质点。结果:...
作者:王建东; 任艳; 夏季; 宋旭华; 刘斯奇; 李荣; 徐迎新 期刊:《中华实验外科》 2004年第11期
目的探索应用DEAE-Cibacron Blue 3GA去除小鼠血浆白蛋白的条件.方法在DEAE-Cibacron Blue 3GA与小鼠血浆结合的不同时间点取样,SDS-PAGE及蛋白质定量检测去除白蛋白的效果,对最佳结合时间点所取的血浆行双向凝胶电泳;软件分析去除白蛋白前后双向电泳显示的蛋白质斑点变化.结果 DEAE-Cibacron Blue 3GA与小鼠血浆结合40?min时,小鼠血浆中80%的白蛋白被去除,双向电泳显示的蛋白质点由处理前的 (211± 19)个增加到 (392± 11)个;其中蛋...