作者:胡; 王金富 期刊:《生物学通报》 2005年第05期
直接从鱼类组织提取线粒体DNA和先提取基因组DNA再用相应引物PCR扩增所需mtDNA某一区域序列片段是获取鱼类mtDNA切实可行的两种方法.对这两种方法在使用过程中的注意事项、各自的优缺点及应用范围进行了较为细致的比较,为更好地利用mtDNA这一重要分子标记研究鱼类mtDNA的遗传多态提供参考.
作者:安春菊; 李德森; 赵素然; 杜荣骞 期刊:《生物学通报》 2004年第08期
介绍1种大量提取家蝇幼虫基因组DNA的新方法,该法由提取植物DNA的CTAB法改进而成,利用该法可在数小时内得到高质量的家蝇幼虫基因组DNA.琼脂糖凝胶电泳和紫外分析表明,该法所得DNA的完整性和纯度均可满足分子生物学水平的一般要求.
作者:陈冬妹; 林英; 王艳霞; 杨瑜; 代方银; 夏庆友 期刊:《蚕学通讯》 2007年第02期
本研究对传统的家蚕基因组提取方法进行了改进。改进方法无需研钵和液氮,将RNase与蛋白酶K同时加入剪碎的家蚕样品中消化处理,并利用旋转振荡培养箱旋转混匀和培育每步的样品。该方法减少了基因组DNA的损失,提高了工作效率,节约了成本。利用改进后的方法对不同家蚕品种的基因组DNA进行了提取和PCR扩增验证,结果表明提取的基因组DNA的质量、获得率、重复性都更好,能够满足家蚕分子生物学研究的需要。
高效、稳定的基因组DNA提取是进行分子标记辅助育种研究的关键技术环节之一。以刺槐叶片为材料,将传统的CTAB法进行优化改良,结合组织研磨棒液氮研磨建立刺槐基因组DNA的提取方法。将提取获得的基因组DNA进行SSR分子标记技术研究,获得的条带清晰、稳定.表明提取获得的基因组DNA能很好的满足SSR分子标记的需要。为刺槐遗传多样性以及相关的分子标记辅助育种研究奠定了基础。
作者:朱少芳; 罗少军; 汤少明 期刊:《广东医科大学学报》 2004年第05期
比较基因组杂交(comparative genomic hybridization,CGH)于1992年由kallioniemi[1]首先创建,其基本原理是用不同的荧光染料标记正常的基因组DNA和待测细胞的DNA,再和正常人的中期染色体杂交,通过检测染色体上两种荧光信号的相对强度比率,了解待测组织DNA拷贝数的改变,同时在染色体上定位.这种技术最初用于实体瘤的研究,现已广泛用于血液系统疾病、先天性疾病和产前诊断等方面,本文是对其在临床应用的进展作一综述.
我们现在已经知道,生命体的各种性状,包括生长、发育、生殖、衰老等大都由基因组DNA决定,许多疾病的发生也都与基因的序列改变有关。基因编辑技术就是对基因组DNA序列进行精确修饰,以达到解析生命本质、生长和发育的机理,了解疾病发生机制和治疗疾病等目的。科技界和生物产业界已经形成共识:基因编辑将给基础研究和转化医学研究带来革命性变革,是下一代生物技术的核心。鉴于此,欧、美等发达国家和地区都对基因编辑研究进行了重点投...
作者:刘忠浩 期刊:《内蒙古科技与经济》 2019年第20期
通过对《分子克隆实验指南》中以蛋白酶K和苯酚从哺乳动物血液中分离高分子质量DNA的操作步骤进行优化,探讨了不同操作对从冻存家养动物全血中提取DNA质量的影响,为家养动物的分子生物学研究提供参考。
科学家发现在人类基因组DNA中,只有3%在起作用,另外97%的部分不包含任何遗传因子,对人类的进化没有任何明显影响,一些科学家将它们称作“垃圾DNA”。然而,美国波士顿大学和哈佛大学医学院的专家们通过专门检测语言词频的“齐普夫定律”对垃圾DNA进行了检测,结果震惊地发现,它们竟完全符合某种神秘的语言标准!已故不久的英国诺贝尔医学奖获得者弗朗西斯·克里克生前相信,地球上拥有原始DNA的最早细菌应该来自外星球,这些“...
作者:张智勇; 倪娜; 李国瑞; 王超; 朱国立; 何智彪; 贾娟霞; 莫德乐吐; 乔文杰; 陈永胜 期刊:《北方农业学报》 2013年第04期
探讨最适于PCR试验的快速高效蓖麻DNA提取方法。采用改良CTAB法、改良SDS法和植物基因组提取试剂盒法提取蓖麻嫩叶片总DNA,对所提DNA进行分光光度计及琼脂糖凝胶电泳法测定其纯度与浓度,并以其为模板进行ISSR—PCR分析。改良SDS法与改良CTAB法所提取的DNA浓度较低,纯度不高,用时较长,操作较难;试剂盒法提取的DNA浓度较高,纯度较好,操作简单用时少,费用较高,三种方法所提DNA在ISSR—PCR均能扩增出条带。在所用材料较少、...
作者:何晓红; 韩秀丽; 马月辉 期刊:《家畜生态学报》 2009年第04期
综述了国内外近40年双峰驼在染色体核型、血液蛋白多态、基因组DNA和线粒体DNA遗传多样性上的研究进展。染色体核型、血液蛋白多态分析表明,双峰驼的遗传多样性有限,微卫星和线粒体DNA的RFLP分析表明双峰驼具有较丰富的遗传多样性,基于线粒体DNA全序列的骆驼科动物遗传进化分析有助于理解骆驼科动物进化历史。由于研究滞后,目前还未有关于双峰驼群体线粒体DNA序列的遗传多样性分析。
作者:徐世清; 陈息林; 戴璇颖; 司马杨虎; 王玉军; 吴阳春; 朱端红; 唐斌 期刊:《江苏蚕业》 2005年第03期
利用单粒卵微量DNA抽提法,从家蚕黄海、苏春及其一代杂交种转青蚕卵快速提取出基因组DNA。筛选出的RAPD随机引物S60稳定扩增出2个原种的DNA特异性片段RH-Ⅰ440和RS-Ⅱ1000,克隆和测序后发现分别为463bp和约938bp。利用网上数据库进行序列分析,RH-Ⅰ440的nt2-462与一个家蚕whole genome shotgun sequence(WGS)(No:BAAB01096026.1)的nt1644-2104有96%的一致性,其中存在2个Caps。RS-Ⅱ1000的nt3-935与另一个家蚕WGS(No:B...
以马尾松针叶为试验材料,利用改良的CTAB法抽提基因组DNA,其浓度和纯度符合PCR实验的要求,经凝胶电泳检测,DNA纯化效果好。
作者:闫桂琴; 任鹰; 张变红; 李钻青 期刊:《山西师范大学学报·自然科学版》 2004年第01期
木本植物体内含有大量的酚类、多糖等次生代谢物质,严重影响提取其基因组DNA的得率和纯度.本文分别用改进的高盐低pH法、2×CTAB法和SDS法从脱皮榆、酸枣、翅果油树的叶组织中提取基因组DNA,通过琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度法检测所提取基因组DNA的纯度,分别筛选出简便、经济、适合脱皮榆、酸枣、翅果油树基因组DNA提取的方法,为其分子生物学研究及下游操作奠定了基础.结果也表明抗坏血酸、PVP、β-SH等抗氧剂为木本植物基因...
作者:邹兴华; 廖昌伟 期刊:《图书情报导刊》 2010年第13期
通过改良CTAB法从豌豆(Pisum sativum)嫩叶中提取了基因组DNA,并进行了紫外分光光度计和琼脂糖凝胶电泳分析,结果表明,得到的DNA一级结构较完整,杂质较少,浓度也较高,可进一步用于PCR(Polymerase chain reaction)和酶切等分子生物学实验。
作者:万火福; 韦凤英; 廖玉英; 邓继贤; 黄英飞; 吴强; 吴亮; 黄丽 期刊:《中国家禽》 2018年第12期
应用比色法测定霞烟鸡、东兰乌鸡及鸿光黑鸡胸肌和腿肌肌肉组织的基因组DNA甲基化水平,并分析了其与肉质性状的相关性,以此来探讨广西不同地方品种鸡肌肉组织基因组DAN甲基化水平的差异。结果表明:在霞烟鸡腿肌组织中,DNA甲基化水平与pH的相关性差异显著(P=0.020),但在胸肌组织中,它们间的相关性不显著;更重要的是,DNA甲基化水平与霞烟鸡腿肌重量相关性显著(P=0.025),与三个品种的其他肉质性状相关性不显著(P〉0.05)。推测D...
作者:王春梅; 徐娜; 李阳春; 白昌军; 徐立 期刊:《草学》 2011年第05期
山蚂蝗属植物(Desmodium Desv.)部分种如绒毛山蚂蝗(D.velutinum(Willd.)DC.var.velutinum),在基因组DNA提取过程中易降解,影响了基因组DNA的纯度。本文分析了引起绒毛山蚂蝗基因组DNA降解的可能原因,并采用改良的SDS法解决了部分山蚂蝗属植物的DNA降解问题,提高了DNA的质量。对采用该方法提取的基因组DNA进行AFLP分析,得到条带清晰、多样性丰富的图谱。结果表明改良的SDS法适宜绒毛山蚂蝗基因组DNA的提取。
作者:马林; 王广超; 罗昭标; 寇晓腾; 张文龙 期刊:《轻工学报》 2013年第02期
为解决烤后烟叶基因组DNA提取稳定性差的问题,以烤后烟叶为材料,对CTAB法提取基因组DNA进一步改良优化:对CTAB沉淀缓冲液使用量、裂解时间、Tris平衡酚的处理次数和RNase处理时间4个影响因素进行单因素优化.实验结果表明:CTAB沉淀缓冲液使用DNA溶液体积的1.5倍、裂解时间40min、Tris平衡酚抽提1次和RNase(10mg/mL,1μL)处理10min,能得到主带清晰的烤后烟叶基因组DNA.该方法提取得到的烤后烟叶基因组DNAOD260/OD280为1...
作者:孟姣; 刘佳; 刘云云 期刊:《科学技术创新》 2017年第05期
高质量的基因组DNA是进行分子生物学实验的前提。为此,本研究通过从动植物组织和细胞中分别提取DNA,探索了一种通用的基因组DNA的提取方法。本方法所提取到的DNA纯度高、适合后续PCR扩增。
作者:徐修才; 周荣富; 吴竞生; 方怡; 王学锋; 翟志敏; 王鸿利 期刊:《中华血液学》 2005年第03期
目的检测1例遗传性无纤维蛋白原血症患者家系纤维蛋白原(Fg)基因突变.方法检测先证者及其家系成员血浆Fg:C及Fg的水平,从外周血单个核细胞中提取基因组DNA,PCR扩增Fg基因的所有外显子及侧翼内含子序列,检测其基因突变.结果发现先证者Fg基因共2处突变,FGB基因7972碱基处缺失G以及FGG基因2543碱基处的纯合T→A.结论FGG基因2543碱基处为多态位点,形成γ144位氨基酸的I/K多态性.FGB基因7972碱基处缺失G,导致β链419位氨基酸之后的移码突...
作者:邵敏; 周鹤峰; 唐历波; 刘银花; 李官成 期刊:《时珍国医国药》 2009年第01期
目的对影响沉香随机扩增多态性DNA(RAPD)反应的各因素进行优化,建立适用于沉香RAPD的最佳反应体系。方法采用改良的CTAB法提取基因组DNA,变化单一因素的方法对模板DNA浓度、Taq酶用量、dNTPs、引物浓度、Mg^2+浓度、退火温度对RAPD影响进行分析。结果建立了适合沉香RAPD分析的最佳反应体系:在20μl反应体系中,模板DNA用量20ng、Taq酶1.0U、dNTPs浓度为0.3~0.4mmol·L^-1、随机引物浓度为0.6μmol·L、Mg^2+浓度1.5—2.0...