作者:周鹏; 朱闻君 期刊:《安徽农业科学》 2020年第03期
为明确湖北枣阳烟区烟草赤星病病原菌的种类,给产区综合防治烟草赤星病提供依据。从枣阳烟区采集典型烟草赤星病样本进行病原菌分离,在致病性测定的基础上通过形态学和分子生物学方法对病原菌进行鉴定。结果显示,分离出的菌株ZY-1为烟草赤星病病原菌,其分生孢子卵形或椭圆形,褐色,具有3~6个横隔膜和1~4个纵隔膜,分生孢子链较短呈树状,多分枝,病原菌rDNA-ITS序列分析结果表明,菌株ZY-1与链格孢(A.alternata)同源性最高,达100%。结合...
作者:胡晓宇; 杨馨玥; 姚金剑; 陈雪; 都景晓; 辛杰; 张波; 陈敏 期刊:《药学研究》 2019年第12期
随着科学技术的不断发展和多学科的交叉融合,中药鉴定技术手段逐渐增多,鉴定结果的客观性和准确性也不断提高。然而真正适用于中药材生产实际和中药材贸易流通领域的现场化鉴定技术却少之又少。为充分发挥中药鉴定技术在生产及贸易实践中鉴别中药真伪优劣的核心作用,本文从现有中药鉴定技术中筛选了可用于现场鉴定的技术方法,介绍了其用于现场鉴定的可行性、适用范围及方法的优缺点。总结了中药现场鉴定技术面临的难题,展望了未来...
作者:陈梦; 朱玲燕; 黄真; 葛宇清; 张光霁; 程汝滨 期刊:《中草药》 2019年第22期
目的建立三斑海马Hippocampus trimaculatus的COI、16 S rRNA和ATP6的条形码序列数据库,应用DNA条形码技术从分子水平快速准确鉴定三斑海马和其他正伪品海马,探讨海马属药材鉴定的新方法。方法提取三斑海马药材的基因组DNA,PCR扩增COI、16 S rRNA和ATP6的序列并进行双向测序,所得序列采用软件Codon Code Aligner V4.2对测序峰图进行校对拼接,应用Clustal X软件进行序列比对,MAGA 5.0软件计算三斑海马的种内种间遗传距离(Kimura 2-P...
作者:曾璐岚; 郝新兴; 祁兴磊; 林凤鹏; 黄永震; 党瑞华; 蓝贤勇; 陈宏; 雷初朝 期刊:《中国牛业科学》 2017年第04期
[目的]旨在检测夏南牛公牛和母牛的有角与无角性状及其相应的基因型,为夏南牛无角品系的选育奠定分子遗传学基础。[方法]采用PCR扩增,琼脂糖电泳分型的方法。[结果]通过对夏南牛P202ID位点进行检测,发现其基因型有三种,即PC/PC,PC/prs和Prs/Prs,其基因型频率分别为3.54%,78.76%和17.70%。分子鉴定结果表明,113头夏南牛的基因型与其无角与有角性状一致。[结论]可利用单倍型P202ID有效鉴定夏南牛无角与有角性状,并用于夏南牛无角品系...
作者:王成业; 赵敏; 王金迪; 蒋筠雅; 何钊; 冯颖 期刊:《生物资源》 2018年第02期
蜻蜓是一类营养丰富且具有药用保健价值的可食用昆虫。目前蜻蜓在国内被食用的种类见诸报道的有红蜻(Crocothemis servilia)、角突箭蜓(Gomphus cuneatus)、舟尾丝蟌(Lestes praemorsa)、闪蓝丽大蜻(Epophthalmia elegans)、碧伟蜓(Anax parthenope julius)、小团扇春蜓(Ictinogomphus rapax)、大团扇春蜓(Sinictinogomphus clavatus)、黄蜻(Pantala flavescens)、赤褐灰蜻(Orthetrum pruinosum)、白尾灰蜻(Ort...
作者:郝苑汝; 庞俊倩; 赵鑫丹; 翟梅枝 期刊:《西北林学院学报》 2020年第01期
选取实验室保存的核桃内生真菌SYS-5-2,对其进行形态学和分子生物学鉴定,并通过生长速率法综合评价该菌株发酵产物的抑菌活性。结果表明,综合形态学分类方法和基于ITS序列基础上的系统发育分析,核桃内生真菌SYS-5-2鉴定为裂褶菌属。菌株SYS-5-2发酵产物对供试的6种植物病原菌均有不同程度的抑菌效果;液体发酵产物浓缩倍数越大,抑菌率越高,且相同浓度下,供试液B的抑菌效果整体优于供试液A;固体发酵产物中,乙酸乙酯和正丁醇相萃取物...
作者:谢丽雪; 张小艳; 郑姗; 张立杰; 李韬 期刊:《东南园艺》 2019年第05期
以采集的福建地区西番莲病叶为材料,利用菜豆金色花叶病毒属(Begomovirus)双生病毒特异性简并引物进行PCR检测,从2份病样中扩增出预期大小约900 bp的目的片段。PCR产物克隆测序后进行序列分析,结果发现获得的目的片段与广东番木瓜曲叶病毒(Papaya leaf curl Guandong virus,PaLCuGDV)韩国西番莲分离物JN17-PF10(GenBank登录号:MK070462)一致性最高,达99.5%。上述结果表明,福建地区西番莲存在广东番木瓜曲叶病毒的侵染。
作者:宋志强; 杨喜爱; 张晓伟; 郭兵; 肖爱平; 肖清明; 梅时勇 期刊:《中国麻业科学》 2019年第06期
在湖南省益阳市植物线虫种类调查期间,从苎麻根际土壤中分离到一种拟鞘线虫,应用形态学和分子生物学方法,将其鉴定为加德拟鞘线虫[Hemicriconemoides gaddi(Loos,1949)Chitwood&Birchfield,1957]。该线虫的主要形态特征为:体长387.0~464.8μm;体环89~98个;唇区有2个唇环;口针发达,长63.6~74.7μm;排泄孔到头端的距离92.6~130.3μm;阴门至尾端的距离为阴门处体宽的1.7~2.1倍;尾部呈圆锥形,末端钝圆。结合rDNA-ITS区和28S rDNA-D2/D3区...
作者:干射香; 涂丽琴; 吴淑华; 范小燕; 吴瑞雪; 赵文浩; 程兆榜; 周益军; 竺晓平; 季英华; 章松柏 期刊:《江苏农业学报》 2019年第05期
2016年,本研究在对山东黄瓜病毒病调查时发现当地黄瓜上出现一种叶片表现黄化植株伴有轻微矮缩的病害,为明确其中伴随的病毒种类,我们对田间病样进行了采集,提取总RNA后利用瓜类病毒引物进行RT-PCR检测,结果发现在利用瓜类褪绿黄化病毒(Cucurbit chlorotic yellows virus,CCYV)引物检测样品时,田间采集的25份疑似病样中13份能扩增到400 bp左右的目的条带。为进一步确认,我们又针对CCYV的外壳蛋白基因(CP)设计了特异性引物,对13份阳...
作者:徐娟; 吴伟伟; 周梦诗; 李睿; 赵飞; 龚杰; 单小云; 张玲 期刊:《中国病原生物学》 2019年第09期
作者:姜雪萍; 陈艳君; 朱富成; 王芳; 孙传伯; 赵群 期刊:《园艺与种苗》 2019年第09期
通过DNA条形码ITS序列,探讨鉴别中药百合及其混伪品的有效方法。从GenBank下载了8种百合属(Lilium)、2种假百合属(Notholirion)和1种老鸦瓣属(Amana)物种的ITS部分核DNA序列。经过比对后,ITS序列长度为610 bp,G+C平均含量为60.1%。用贝叶斯法(Bayesian inference,BI)和简约法(Maximum parsimony,MP)分别构建系统发育树。结果表明,百合药材的3种正品基源植物的单倍型在BI和MP 2种系统发育树中都各自聚类为单系,并不和其他混伪品的物...
作者:岳苑; 徐娟; 赵飞; 周梦诗; 何利华; 张建中; 龚杰 期刊:《现代食品科技》 2019年第10期
宁夏是宁夏枸杞的主要种植地,枸杞鲜果加工或干果储藏不当易发霉变质造成经济损失。本研究使用真菌培养及分子生物学技术分析引起宁夏枸杞干果霉变的主要真菌种类,并探讨宁夏枸杞干果霉变可能造成的危害。从宁夏的五个村庄采集的枸杞霉变果实中分离培养真菌菌株,将分离到的菌株提取DNA,利用生物条形码技术对致病真菌进行扩增和鉴定,并使用最大似然法进行菌株系统发生分析。从宁夏枸杞分离出45株真菌,经鉴定发现存在10个属的真菌,分...
作者:李克梅; 阿孜古丽·木汉买提; 葛瑞云; 刘学学; 李宝义; 热甫卡提·雪合拉提 期刊:《草业科学》 2019年第09期
中文新疆栽培苜蓿(Medicago sativa)有一种疑似病毒病的病害,种植第2年开始出现植株矮化、枝条细弱、叶片卷缩,种植第4年部分田块发病率达100%。为确定其病原,本研究在乌鲁木齐、昌吉、阿勒泰等地采集了219份发病苜蓿植株,采用菜豆卷叶病毒(BLRV)外壳蛋白基因特异性引物开展RT-PCR检测与分子鉴定。结果表明,在55份样品均可扩增得到一条长955kb的特异性片段,检出率为25%,该片段的序列(登录号:MK263743)与已知菜豆卷叶病毒(BLRV)外壳...
作者:王定锋; 李良德; 李慧玲; 张辉; 王庆森; 吴光远 期刊:《茶叶学报》 2019年第02期
分子标记作为一种快速、有效、精准的鉴定工具,在昆虫病原真菌新种的鉴定中发挥重要的作用。为明确一株分离自茶大灰象甲的棒束孢If410的具体分类归属,我们对该菌株的rDNA-ITS,EF1-α和β-tubulin等3个分子标记基因进行了PCR扩增、测序和系统发育树构建,最终明确了其为玫烟色棒束孢Isariafumosorosea。本研究结果将为今后更好地利用玫烟色棒束孢来防治茶大灰象甲和其它鞘翅目害虫奠定基础。
作者:朱; 爽; 周; 林; 杨梅宝; 黄宏靓; 孙悦; 曾常青 期刊:《广东药科大学学报》 2012年第01期
目的以核糖体转录间隔区(rDNA ITS)序列为分子标记,对1种华钩藤植物进行遗传分析与分子鉴定。方法通过改良CTAB法提取样品总DNA,利用通用引物对rDNA ITS序列进行PCR扩增,经克隆、测序后,运用Clustal X、BioEdit和PAUP等软件进行序列分析和构建系统发育树。结果测序得到样品的rDNA ITS区序列长度为719 bp,序列分析结果显示其与Genbank中已有的华钩藤[Uncaria sinensi(Oliv.)Havil.]rDNA ITS区序列之间相似性达99.4%,并且在系统...
作者:成树森; 王武静; 陈超志; 段元静; 任玲; 王秋红; 李书渊 期刊:《广东药科大学学报》 2017年第06期
目的选取ITS2序列对广陈皮基原植物及药材进行鉴定,为DNA条形码技术应用于广陈皮药材的鉴定研究提供理论依据。方法提取样品DNA,利用PCR技术对样品进行核基因ITS2片段扩增并双向测序。所得序列经Codon Code Aligner拼接后,用MEGA6.0软件进行数据分析;计算种内、种间Kimura-2-Parameter(K2P)遗传距离并采用邻接法构建NJ系统树。结果广陈皮种内最大K2P遗传距离远小于种间最小K2P遗传距离;由构建的系统聚类树可以看出,广陈皮基原植...
作者:覃仙玲; 赖俊翔; 陈波; 姜发军; 许铭本 期刊:《热带亚热带植物学报》 2016年第02期
为研究北部湾棕囊藻(Phaeocystis)藻华的成因,采用PCR克隆了棕囊藻北部湾株核糖体18SrDNA序列。结果表明,棕囊藻北部湾株具有游动单细胞与群体结构两种形态;其18SrDNA序列和NCBI基因库中球形棕囊藻(Phaeocystis globosa)的同源性为99%~100%,在系统进化树上与不同海域来源的球形棕囊藻聚在一大分支上,且与球形棕囊藻问的遗传距离均小于其他种。首次从分子生物学上确定棕囊藻北部湾株为球形棕囊藻。
作者:申建芳; 李子桀; 蒙春燕; 周洪友 期刊:《北方农业学报》 2018年第01期
马铃薯黄萎病是重要的土传病害之一, 对于该病害目前并没有特别有效的防治手段.利用生物方法防治马铃薯黄萎病是一种比较有潜力的防治方法.文章采用对峙培养和生物测定的方法筛选生防菌株, 应用 16S rDNA 序列分析,并结合生理生化指标的测定对其鉴定. 结果表明, 从内蒙古农业大学植物病理生防菌资源库中筛选到 1 株防治效果明显且稳定的生防菌株 XT1-4,该菌株是一种对马铃薯黄萎病菌有较好拮抗作用的细菌, 室内对马铃薯黄萎病的防...
作者:周晶耀; 林启; 张辉; 张均和; 顾舟霞 期刊:《预防医学》 2017年第07期
目的了解舟山渔场海洋鱼类异尖线虫感染状况。方法从舟山市农贸市场购买带鱼、小黄鱼和鲐鱼3个品种89尾鱼,解剖后在光学显微镜下观察异尖线虫幼虫形态并进行初步鉴定;采用限制性片段长度多态性聚合酶链反应(PCR-RFLP)方法分析核糖体DNA(r DNA)内转录间隔区(ITS)进行分子学鉴定。结果在82尾鱼中检出异尖线虫幼虫,感染率为92.13%,共获得1 023条异尖线虫样品。鱼小肠、肠系膜和性腺(62.35%)以及体腔周围脏器(37.05%)是主要...
作者:邱莫寒; 马恩跃; 杜华锐; 杨朝武; 朱师良; 罗彬; 张增荣; 王彦; 许恒勇; 蒋小松 期刊:《中国家禽》 2018年第11期
为了建立一种快速准确鉴定大恒优质肉鸡慢羽系公鸡纯合子的分子检测方法,以加快纯合慢羽系及其配套系的育种速度,利用鸡性连锁羽速基因K/k+中慢羽基因的断点连接序列以及快慢羽基因的SNP,选择200只(表型鉴定为慢羽)50日龄的大恒优质肉鸡慢羽系公鸡进行羽速基因的分子检测,检测结果与雏鸡羽速表型判定结果一致率达100%。采用限制性内切酶TaqI法进一步检测发现,慢羽纯合子公鸡(197只)2条带,杂合子公鸡(3只)3条带。综...