作者:刘琳; 门婷婷; 张文凤; 张建棣; 米佳; 杨春华 期刊:《滨州医学院学报》 2020年第01期
目的检测定量斑点印迹(QDB analysis)技术在高通量组织样品和细胞样品蛋白表达水平定量检测中的应用情况。方法采用QDB analysis技术检测87只小鼠的前列腺组织中tubulin的相对表达水平,以及8种人细胞系中tubulin的绝对表达水平(即蛋白真正表达水平)。结果通过QDB analysis技术发现小鼠前列腺组织中tubulin蛋白的表达水平根据小鼠周龄不同而有所不同;8种人细胞系中tubulin蛋白的绝对表达水平在90~140 fmol/μg之间。结论QDB技术可适...
作者: 期刊:《广州医科大学学报》 2009年第05期
健康报报道:中科院上海生命科学研究院计算生物学所严军课题组、生化与细胞所曾嵘课题组与美国阿拉斯加大学Brian Barnes等合作,在动物冬眠中mRNA水平研究的基础上,新近系统研究北极地鼠在冬眠中蛋白质表达发生整体变化获得突破。其研究论文日前在线发表于《分子与细胞蛋白质组学》杂志上。
作者:朱先玉; 王历; 杨茂; 吴婷; 何涛; 杨文理 期刊:《西南医科大学学报》 2019年第03期
目的:构建hFGFR1α(human fibroblast growth factor receptor 1 alpha, hFGFRα)稳定细胞系,优化获得最适诱导表达条件,实现可诱导的、高效的稳定表达。方法:将hFGFR1α基因编码区全长克隆入pcDNA5/FRT/TO/2 × Flag表达载体,连同pOG44重组酶质粒共转染人宿主细胞Flp-InTM-T-RexTM-293细胞系(HEK293H),潮霉素B筛选获得阳性克隆细胞系HEK293H/hFGFR1ɑ。用不同浓度强力霉素(doxycline, Dox)或者不同作用时间对HEK293H/hFGFR1ɑ细胞系进行...
日本味之素公司在开展利用谷氨酸棒杆菌的蛋白质表达系统(CORKYNEX)进行蛋白质表达的受托业务。CORYNEX的最大特点是,表达的蛋白质被分泌到菌体细胞之外,能够成功地表达大肠杆菌等难以表达的蛋白质。
作者:赵建国; 李玉; 杨德健; 朱昌蔼; 李刚强 期刊:《轻工学报》 2018年第06期
采用序批式生物反应器(SBR)处理BPA模拟废水,探讨不同BPA废水处理方式对污泥急性毒性和蛋白质表达的影响,结果表明:当进水BPA质量浓度为40mg/L时,受BPA冲击的SBR中的污泥活性明显受到抑制,出水COD质量浓度显著高于经进水BPA逐步驯化的SBR,随着运行时间的延长,其水相、泥相中的BPA质量浓度均呈现先升高后降低直至被完全降解去除的变化趋势;在整个SBR运行过程中,经BPA冲击的SBR中污泥和EPS急性毒性均高于逐步驯化的SBR,但EPS急性毒性...
作者:王帅; 韩聚强; 曹建彪 期刊:《中国妇幼保健》 2012年第31期
蛋白组学是对来源于基因组的所有蛋白质进行鉴定及定量的研究方法。基因组在任何位点上是相对静止的,而蛋白质组却具有高度可变性。作为对各种环境因素的反应,特定细胞类型在分化过程中蛋白质表达也在不断变化。更为复杂的是,由于选择剪接、RNA编辑、启动子交变及翻译后修饰等原因,许多蛋白质可能存在多种亚型[1]。
作者:安梦楠; 吴元华 期刊:《生物技术通报》 2017年第12期
无细胞翻译系统是高效表达重组蛋白质的体外分子研究系统,BYL是一种通过密度梯度离心法脱去液泡的烟草BY-2裂解液无细胞系统.BYL系统可支持外源mRNA以及多种植物RNA病毒的蛋白质表达,由于BYL系统中保留植物RNA病毒复制所需的胞内膜结构,所以该系统可支持RNA病毒核酸负义链、正义链和亚基因RNA的合成.综述了BYL系统应用于植物RNA病毒翻译和复制等机理以及RNA干扰机制方面的研究进展,并对其研究前景进行展望,旨在便于更多的研究者系...
作者:王继红; 吴毓; 任凤; 田晓光; 吴妍宁; 赵宝昌 期刊:《应用与环境生物学报》 2004年第06期
Adinhiter为一通过基因工程方法获得的来自于中国白眉蝮蛇毒腺的去整合素家族的新成员,从蝮蛇毒腺中提取总RNA进行RT-PCR扩增,获得了219bp的白眉蝮蛇去整合素基因,cDNA测序及由此推导的氨基酸序列结果显示,Adinhiter为含有73个氨基酸的多肽,其中包括12个半胱氨酸,并具有去整合素的特征模序-RGD,对此去整合素基因进行克隆,转化与诱导后,得到了该蛋白的可溶性高效表达,经组氨酸亲和层析纯化,获得了分子量Mr为9×10^3的均质...
作者:郑斌; 詹希美 期刊:《生物技术通讯》 2005年第03期
信号肽在蛋白分泌的过程中起重要作用,分泌性蛋白质合成后由信号肽引导其穿过合成所在的细胞到其他组织细胞中.可以利用因特网在线工具和信号序列捕获系统来判定基因序列中是否含有信号肽序列.外源蛋白的表达形式多为细胞内不溶性表达(包涵体),少数为细胞外分泌表达.利用信号肽来引导外源蛋白分泌可避免因包涵体复性带来的困难.研究表明,多种外源基因连接上信号肽后在原核表达系统如大肠杆菌、L型细菌、芽孢杆菌和乳酸杆菌中等都得...
作者:李建勇; 王彬尧; 王长谦; 厉锦华; 李慧丽; 胡大一 期刊:《中国心血管病研究》 2005年第06期
目的探讨低氧诱导因子1(HIF-1)在NIH3T3细胞的体外表达.方法首先构建真核表达质粒,以脂质体为介导,体外转染细胞,经RT-PCR,Western blot,ELISA检测基因在mRNA、蛋白质等方面的表达.结果半定量RT-PCR证实在NIH3T3细胞表达外源基因,Western blot检测到外源HIF-1蛋白质表达,ELISA试验证明表达的基因产物具有生物活性.结论PcDNA3-HIF1真核表达质粒能够有效地在体外表达目的基因,为进一步的动物实验奠定了基础.
作者:陆志成; 蔡刚; 沈茜 期刊:《检验医学》 2005年第01期
目的建立实时逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测二氢嘧啶脱氢酶mRNA的定量方法,并分别从RNA水平与蛋白质水平检测二氢嘧啶脱氢酶在人体部分组织中的表达.方法采用基于TaqMan探针技术的实时RT-PCR方法检测二氢嘧啶脱氢酶mRNA的表达,用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测其蛋白质表达水平.结果实时RT-PCR检测二氢嘧啶脱氢酶的线性范围可达102~109拷贝数/μl,批内误差<5%.结论这一实时RT-PCR的方法可以从纳克级的总RNA中检出二氢嘧啶脱氢...
作者:王晨; 张学敏; 杨树源; 杨新宇; 王鸿丽; 刘炳玉; 王杰; 魏开华 期刊:《中华神经外科》 2005年第06期
目的应用蛋白质组学技术,研究重型人脑外伤后的脑皮层蛋白质组表达变化的情况.方法提取脑挫伤部位皮层的总蛋白.通过双向电泳,分离蛋白.应用胶内酶切、生物质谱,鉴定由图像分析软件所得出的具有表达差异的蛋白质点.结果在急性期8h内,目前已发现138个蛋白质点,表达水平具有显著性差异变化.在已鉴定出的83个蛋白点中,属于64种蛋白质.依其功能可分为:细胞骨架、代谢反应、核酸蛋白合成与更新、信号传导、氧化应激反应、功能未知等几类...
作者:李琦; 于颖彦; 朱正纲; 刘炳亚; 纪玉宝; 张奕; 程琳玲; 林言箴 期刊:《中华实验外科》 2004年第08期
目的探讨胃癌细胞株是否存在核转录因子(NF)-κB组成性激活及其对胃癌细胞增殖的影响机制.方法采用蛋白免疫印迹法(Western blot法)检测4株不同分化程度的胃癌细胞株NF-κB蛋白表达,比较4株胃癌细胞株中NF-κB蛋白质表达水平的差异.通过TransAMTMNF-κB p65试剂盒来比较不同胃癌细胞株中p65亚基的蛋白活性差异.选取活性较高细胞株,观察吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)对NF-κB活性的影响;利用噻唑蓝(MTT)法,分别观察24、48、72h,PDTC对细...
作者:唐四元; 管茶香; 周建华 期刊:《中国现代医学》 2004年第12期
目的观察MMP-2和MMP-9在肺组织损伤修复过程中的表达和变化规律,并探讨它们在肺组织损伤修复中作用的分子机制和意义.方法20只Wister大白鼠,随机分为一个正常组和臭氧攻击损伤后不同时间的实验组,制作大鼠肺损伤模型.应用免疫组化法和图像分析技术观察各组MMP-2及MMP-9蛋白表达的强度.结果成功复制大鼠肺组织损伤动物模型;实验观察表明,MMP-2、MMP-9蛋白表达在正常肺组织为弱阳性,在肺组织损伤时,表达上调,且随着肺组织损伤修复行...
作者:徐英辉; 董斌; 罗其中; 周洪语; 贾宜昌; 杨友峰; 王以政 期刊:《中华医学》 2005年第24期
作者:郭丽娟; 罗湘杭; 谢辉; 周后德; 廖二元 期刊:《中华内科》 2005年第02期
作者:周雷激; 王柯敏; 左新兵; 文建辉; 刘斌; 陈韵晴; 王炜; 谭蔚泓; 黄杉生 期刊:《高等学校化学学报》 2004年第Z1期
本文提出和构建了一种新型的生物芯片平台技术,这种芯片平台技术将微流控芯片[1~3]与基于高通量并行分析方法的生物芯片[4]原理相结合,发展成基于微流控串行分析技术的一维生物芯片.这种芯片设计的优势在于不仅试样用量极微,自动化程度高,不易污染,而且有望在"芯片实验室"上实现将单细胞水平上的基因、蛋白表达谱分析.……
作者:程志强; 吴学龙; 陈旭君; 李德葆; 郭泽建 期刊:《植物病理学报》 2005年第02期
将丁香假单胞菌hrmA基因构建到原核表达载体pET-29中,得到重组载体pET-hrmA.将重组载体转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导,获得了以包含体形式存在的融合蛋白.复性的融合蛋白能诱导水稻悬浮细胞的活性氧进发,处理20 min后达到峰值.Northern杂交结果表明hrmA蛋白能显著地诱导PBZ1基因在水稻悬浮细胞中表达,在所观察的时间内PBZ1基因表达丰度随处理时间延长而增加,用hrmA处理水稻植株,诱导了PAL基因的表达.实验结果表明hrmA融合蛋白...
作者:尹志奎; 杨锦楠; 许兵红; 刘世国 期刊:《新乡医学院学报》 2005年第02期
目的在大肠埃希菌中表达致密颗粒蛋白(GRA7).方法将弓形虫GRA7基因克隆入原核表达载体pGEX-4T-1,构建重组质粒pGEX-4T-1/ GRA7并转化大肠埃希菌BL21.IPTG体外诱导重组质粒菌的表达,对表达的GRA7融合蛋白进行SDS-PAGE和Western-blotting分析.结果成功构建了pGEX-4T-1/GRA7重组质粒,该重组质粒在大肠埃希菌中表达了目的蛋白,该蛋白能与抗GST抗体结合.结论 GRA7基因在大肠埃希菌中以GST融合蛋白的形式得到表达.
作者:杨红霞; 朱敏怡 期刊:《实用医学》 2005年第17期
目的:探讨黄芪对糖尿病(DM)肾损害的保护作用机制.方法:建立2型DM模型,黄芪组给予5 mL/(只·d)灌胃.12周测体重、血糖、微量白蛋白排泄率(UAE)、尿肌酐(Cr),处死大鼠,用PAS及Masson染色观察肾脏病理变化.用免疫组化方法检测肾组织中转化生长因子-β1(TGF-β1)和Smad 7的蛋白质表达.结果:与对照组相比,DM组大鼠血糖、UAE及肾重/体重比值、Ccr比值均显著上升(P<0.05/0.01),肾小球系膜及基底膜相对面积、肾间质纤维组织相对面积均显著增...