首页 期刊 中国心血管病研究 HIF-1α质粒转染NIH3T3细胞的体外实验 【正文】

HIF-1α质粒转染NIH3T3细胞的体外实验

作者:李建勇; 王彬尧; 王长谦; 厉锦华; 李慧丽; 胡大一 100730; 北京市; 首都医科大学附属北京同仁医院心血管疾病诊疗中心; 上海第二医科大学附属仁济医院心内科
nih3t3细胞   体外实验   western   真核表达质粒   elisa检测  

摘要:目的探讨低氧诱导因子1(HIF-1)在NIH3T3细胞的体外表达.方法首先构建真核表达质粒,以脂质体为介导,体外转染细胞,经RT-PCR,Western blot,ELISA检测基因在mRNA、蛋白质等方面的表达.结果半定量RT-PCR证实在NIH3T3细胞表达外源基因,Western blot检测到外源HIF-1蛋白质表达,ELISA试验证明表达的基因产物具有生物活性.结论PcDNA3-HIF1真核表达质粒能够有效地在体外表达目的基因,为进一步的动物实验奠定了基础.

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