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猪繁殖与呼吸综合征病毒SDZP P126株GP2基因序列分析及其对病毒增殖的影响

作者：张倩; 苏兆军; 魏凤; 毕艳丽; 肖跃强; 王金良; 苗立中; 唐娜 刊期：2019年第08期

旨在研究1株连续传代的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV) SDZP P126 GP2基因的变异情况,以及GP2对病毒增殖的影响。构建GP2基因全长真核载体pEGFP-N1-GP2,利用生物学软件对GP2基因进行核苷酸和氨基酸的同源性分析,并将重组质粒pEGFP-N1-GP2转染到Marc-145细胞上,接毒后检测对病毒增殖的影响。通过GP2基因核苷酸和氨基酸的同源性分析,发现9个碱基的...

兔出血症病毒VP60蛋白单克隆抗体的制备及活性鉴定

作者：杨慧; 武玉香; 王文秀; 孙培姣; 于雪; 王玉茂; 沈志强; 肖跃强 刊期：2019年第08期

为制备兔出血症病毒VP60单克隆抗体,利用HEK293T细胞瞬时表达VP60,免疫Balb/c小鼠,将小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,间接ELISA筛选获得阳性克隆细胞株-5D11。利用血凝抑制(HI)、间接免疫荧光(IFA)和Westernblot等方法对5D11分泌的单克隆抗体活性进行鉴定,并对其识别区域进行了定位。结果显示,5D11能抑制病毒凝集人“O”型红细胞,与杆状病毒表...

3株鸭乙型肝炎病毒全基因组克隆与序列分析

作者：王静; 许鑫; 李宛玉; 王雪雨; 吴倩倩; 姚伦广; 阚云超; 冀君 刊期：2019年第08期

对河南南阳、安徽亳州、湖北潜江三地鸭血清样本用PCR进行鸭乙型肝炎病毒(DHBV)检测,并从三地经检测为DHBV阳性的样本中各挑选1份进行DHBV全基因的扩增、克隆、测序及序列分析。结果显示,河南南阳、安徽亳州、湖北潜江三地的鸭乙型肝炎自然感染率分别为17.6%、13.6%、16.1%,差异不显著(P>0.05)。河南南阳、安徽亳州、湖北潜江3株DHBV基因组全长...

A型塞内卡病毒CH-HNXC株的分离鉴定及其致病性研究

作者：胡东波; 李雪锋; 晋春霞; 刘栓; 孙哲 刊期：2019年第08期

自2007年A型塞内卡病毒(SVA)在猪体内被发现以来,给全球养猪业造成了严重的经济损失,SVA感染的典型症状包括猪口鼻部囊泡的形成及破裂,以及蹄部冠状带水疱引起的跛行。用RT-PCR从河南某猪场具有水疱样病变的猪水疱皮或水疱液中检测到了SVA的特异性核酸片段,并通过IBRS-2细胞进行SVA的分离和传代,将分离得到的SVA命名为CH-HNXC,扩增和测定了VP1基...

氟苯尼考耐药基因floR LAMP检测方法的建立及应用

作者：冯世文; 李军; 潘艳; 彭昊; 贺会利; 钟舒红; 胡帅; 曾芸 刊期：2019年第08期

为建立快速、灵敏且可定量检测氟苯尼考耐药基因floR的环介导等温扩增方法(LAMP),根据GenBank登录的革兰阴性菌floR基因保守序列,利用PrimerExploerV4设计特异性LAMP引物,成功建立了快速检测氟苯尼考耐药floR基因的LAMP方法。该LAMP检测方法反应温度为63℃,反应时间为60min,具有可实时监测反应、定量检测出floR基因的拷贝数,以及操作简便的特点,...

基于四环素调控系统构建白蛋白启动子调控大鼠uPA转基因表达的慢病毒载体

作者：张晟; 黎海燕; 廉梅; 刘宇; 肖东; 林晓琳 刊期：2019年第08期

基于四环素调控系统构建白蛋白(albumin,Alb)启动子调控大鼠uPA(urokinase-type plasminogen activator,ruPA)转基因肝特异性过表达的慢病毒载体pLVX-Alb-TetOne-TRE-ruPA-T2A-CopGFP(pLATTRUTG)。以CTG0875-2-11质粒为模板,PCR扩增大鼠的uPA(ruPA)基因,3’端添加Flag标签,In-Fusion克隆至pLVX-Alb-TetOne-TRE-T2A-CopGFP(pLATTTG)质粒中,得到慢...

致动物脑膜炎粪肠球菌人工感染小鼠脑部模型的建立

作者：李慧; 王蒙蒙; 李傲寒; 高静雯; 高健鹏; 张华雷; 张莉; 齐亚银 刊期：2019年第08期

为了构建粪肠球菌人工感染小鼠脑部损伤模型,以清洁级昆明小鼠为实验动物,将实验室保存的致羔羊脑膜炎粪肠球菌进行复苏,用寇氏法测定小鼠半数致死量(LD50),并以LD50剂量、1/2 LD50的剂量、2/3 LD50剂量感染小鼠,观察临床症状,选择2、4、8、12、24、36、48、60、72、84 h共10个时间点,无菌取其脑部、内脏组织进行细菌的分离鉴定,并观察病理组织...

鸭补体调节因子H的原核表达及多克隆抗体制备

作者：王向丽; 李德龙; 谷九龙; 刘海兰; 孟雅娜; 陈思怀; 唐发书; 李继祥 刊期：2019年第08期

为制备鸭补体调节因子H(CFH)的多克隆抗体,从健康雏鸭的肝脏组织中提取总RNA及反转录合成cDNA,PCR扩增补体调节因子H基因的2个片段H1和H2,插入到载体pMD19-T,测序正确后,将目的基因分别克隆至原核表达载体pCold-TF,转化至大肠埃希菌BL21(DE3),用IPTG诱导表达蛋白,重组蛋白经SDS-PAGE检测,镍柱亲和层析纯化的重组蛋白免疫新西兰大白兔,制备多克隆...

H7N9亚型重组禽流感病毒rGD76株灭活疫苗的研制

作者：叶贺佳; 仇微红; 亓文宝; 万红; 李敏; 许利娜; 胡秀美; 廖明; 梁昭平 刊期：2019年第08期

利用H7N9亚型重组禽流感病毒rGD76株进行灭活疫苗的研制,并对疫苗的免疫效果进行评价,为家禽H7N9亚型流感的防控提供科学数据及手段。将AIV-rGD76株用灭菌生理盐水作104倍稀释后,接种11日龄非免疫鸡胚,37℃孵育72h后收获感染鸡胚尿囊液,经甲醛灭活后,加矿物油佐剂乳化制成油乳剂灭活疫苗,对制备疫苗的性状、安全性、免疫效力等进行检验。结果显...

小鼠棕色脂肪转基因过表达miR-155损坏棕色脂肪细胞的分化

作者：黎海燕; 刘宇; 廉梅; 陈恒伟; 温悦婷; 贾俊双; 林晓琳; 肖东 刊期：2019年第08期

白头翁汤中6种指标成分含量测定

作者：贾娅倩; 马琪; 张晓松; 魏彦明; 袁子文; 华永丽 刊期：2019年第08期

建立高效液相色谱法(HPLC)测定白头翁汤中4味中药(白头翁、黄连、黄柏及秦皮)的6种成分含量的方法。采用安捷伦色谱柱(4.6mm×150mm,5μm),以乙腈-1mg/mL磷酸水溶液为流动相进行线性梯度洗脱,检测波长205nm,流速0.8mL/min(白头翁皂苷B4)、检测波长335nm,流速1.0mL/min(盐酸小檗碱、盐酸药根碱、盐酸巴马汀、秦皮甲素和秦皮乙素)。秦皮甲素在1.04μg...

2017年山东16株H9N2亚型禽流感病毒的分离鉴定及其HA基因序列分析

作者：高绪慧; 孙伟; 李志中; 魏笑笑; 吴海洋; 刁秀国; 王晓茹; 武梅; 马芹; 韩姗姗; 张民霞; 张秀美; 秦立廷 刊期：2019年第08期

为了解山东省H9N2亚型禽流感的流行情况, 2017年从山东省不同地区分离并鉴定16株H9N2亚型禽流感病毒(AIV)株,并对其血凝素(HA)基因进行扩增、克隆和测序,将所得序列进行同源性和遗传进化分析。结果显示,2017年分离的16株病毒之间HA基因的核苷酸序列同源性为91.2%~99.8%,氨基酸同源性为93.6%~100.0%。系统进化树显示,16株病毒均属于H9.4.2.5分支,...

中药复方对衰老及肾阳虚小鼠激素水平及肾功能的影响

作者：钱旭丰; 林春丽; 王霄; 马爱团 刊期：2019年第08期

甘草查尔酮A对副猪嗜血杆菌的体内外抑制作用

作者：贾永鑫; 杨裕; 杨春雷; 关文超; 崔小珍; YANG; Shi-Yu 刊期：2019年第08期

探讨甘草查尔酮A对副猪嗜血杆菌体内外生长的影响。将副猪嗜血杆菌于分别含10、20、50、100、200μg/mL甘草查尔酮A的TSA液体培养基中培养,采用分光光度法分析副猪嗜血杆菌生长和生物被膜形成的变化;以1、10、100mg/kg甘草查尔酮A经口灌胃小鼠,分别在3d、5d和7d称重,并计算脏器指数,Hiseq高通量测序技术分析肠道菌群等生长性能,Bliss法测定副猪嗜...

马属动物毕氏肠微孢子虫研究进展

作者：齐萌; 朱怡萱; 赵爱云 刊期：2019年第08期

毕氏肠微孢子虫是一种引起人和动物腹泻的常见病原体,可通过食物和水源传播,具有重要的公共卫生意义。根据系统进化分析,已鉴定出近300个毕氏肠微孢子虫基因型,分为9个组群,组群1中的基因型大多数具有潜在人兽共患性;组群2~8中的基因型多数具有宿主特异性,部分也可感染人。研究表明,马属动物可感染37个毕氏肠微孢子虫基因型,具有一定人兽共患风...