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口蹄疫病毒衣壳蛋白氨基酸突变对病毒热稳定性的影响

作者：高雅; 李平花; 马雪青; 寻广谨; 白兴文; 孙普; 袁红; 卢曾军; 刘在新; 李冬 刊期：2019年第07期

口蹄疫是世界范围内广泛流行的一种偶蹄动物的烈性传染病,其病原为口蹄疫病毒(FMDV),它对热比较敏感,当温度高于30℃时,病毒衣壳容易解离为五聚体亚单位而影响疫苗的免疫保护效果。因此,改善病毒的热稳定性,制备热稳定优良的口蹄疫疫苗具有重大的应用价值。在实验室建立的口蹄疫病毒型内嵌和全长感染性克隆的基础上,在结构蛋白引入1个或2个氨基...

猪繁殖与呼吸综合征病毒Nsp4抗体ELISA检测方法的建立

作者：刘磊; 马永彪; 王文秀; 李峰; 沈志强; 张松林 刊期：2019年第07期

克隆、表达了猪繁殖与呼吸综合征病毒DY株(GenBank:JN864948)的Nsp4蛋白,并利用Nsp4作为包被蛋白建立了ELISA检测方法。优化的Nsp4抗体ELISA检测方法的最佳抗原包被浓度为1μg/mL,血清最佳稀释度为1∶40,最佳封闭液为100mL/L牛血清,酶标二抗的最佳工作稀释度为1∶4000,最佳显色时间为37℃反应15min。用建立的ELISA检测方法和IDEXX ELISA检测试剂...

猪圆环病毒2型Guizhou LZTQ/2017株全基因组序列分析

作者：张爱琼; 梁海英; 曾智勇; 王彬; 徐国; 咸文; 何小莉; 陈娟; 吴好叶 刊期：2019年第07期

为了解贵州省某新建猪场由猪圆环病毒2型(PCV2)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的保育猪咳喘、腹泻死亡的病原中PCV2的基因型和变异情况,采用基因克隆技术,对其全基因进行克隆分析。结果显示,PCV2/Guizhou-LZTQ/2017株全长为1768bp,属PCV2a型,与国内外毒株碱基之间存在多处差异;其ORF2基因编码的Cap蛋白氨基酸与常用疫苗毒株之间同源性在92...

羊梭菌病快速鉴别PCR方法的建立及初步应用

作者：李田美; 吴正双; 许大伟; 姜艳芬 刊期：2019年第07期

根据GenBank已公布的产气荚膜梭菌和腐败梭菌的α毒素基因序列,分别设计并合成针对2种α毒素基因的特异性引物,通过扩增条件的优化,建立快速鉴别产气荚膜梭菌和腐败梭菌的双重PCR方法。特异性试验显示,产气荚膜梭菌和腐败梭菌参考菌株均扩增出了相应的预期目的条带,而大肠埃希菌、沙门菌、金黄色葡萄球菌和链球菌则均未能扩增出相应条带。灵敏度试...

鸭抗菌肽Dcath多克隆抗体的制备及鉴定

作者：朱健; 刘超群; 刘瑞奇; 张婷婷; 付杰; 卢连强; 冯兴军 刊期：2019年第07期

为制备效价高、特异性强的鸭抗菌肽Dcath多克隆抗体,并对制备的多克隆抗体进行鉴定和初步应用,采用Fmoc固相化学合成法合成鸭抗菌肽Dcath的成熟肽段,与血蓝蛋白偶联后,与弗氏完全佐剂乳化,按照免疫程序免疫接种大白兔,采集免疫兔血清,亲和层析纯化多抗,ELISA检测多抗效价,以制备的多抗为一抗,用Western blot检测鸭血外周异嗜性粒细胞中Dcath的表...

Balb/c小鼠线粒体转录终止因子3基因克隆及其组织表达分析

作者：熊伟; 王唯斯; 李素芬; 自加吉; 严长宝; 戴莉萍; 张若鹏 刊期：2019年第07期

旨在获得Balb/c小鼠线粒体转录终止因子3(MTERF3)基因cDNA的序列特征并进行比较分析,揭示该基因的组织特异性表达规律。应用RT-PCR技术克隆Balb/c小鼠MTERF3基因cDNA编码区序列(CDS),采用MEGA6.0软件构建小鼠MTERF3基因系统进化树,并采用Northern blot、RT-qPCR和Western blot技术研究该基因在小鼠大脑、心、脾、肺、肾、肝、骨骼肌和睾丸等8种...

活化转录因子4基因敲除小鼠完全缺失晶状体致小眼症

作者：张晟; 林晓琳; 和法莲; 彭珊; 申红芬 刊期：2019年第07期

旨在研究活化转录因子4(ATF4)基因敲除对小鼠眼睛发育的影响。将小鼠分为野生型(WT)组和ATF4敲除(KO)组,采用器官大体观察和组织病理学分析,明确ATF4基因敲除后对小鼠眼睛发育的影响。结果发现,WT小鼠眼球大小及组织结构正常。而ATF4^-/-小鼠眼球体积缩小;脉络膜和视网膜层层次结构基本存在,各个层次结构紊乱;神经节细胞层细胞数基本正常,约2层...

菪可轮蒲水煎液对多杀性巴氏杆菌体内外抑菌活性研究

作者：高艳; 郝宝成; 吴金措姆; 格桑卓嘎; 班旦; 四郎玉珍; 邢小勇; 梁云; 杨志伟; 王兰芳; 胡永浩; 梁剑平; 拉巴次旦 刊期：2019年第07期

研究菪可轮蒲水煎液对多杀性巴氏杆菌的体内外抑菌活性作用。用传统水煎法制备菪可轮蒲水煎液,用HPLC法测定菪可轮蒲水煎液中龙胆苦苷浓度,并用龙胆苦苷浓度标定复方药物浓度,分别采用牛津杯法和宏量肉汤稀释法测定菪可轮蒲水煎液对多杀性巴氏杆菌的抑菌圈直径和最小抑菌浓度(MIC),通过建立死亡率为75%的多杀性巴氏杆菌体内感染小鼠模型,测定浓...

枸杞多糖对免疫抑制小鼠血清中IL-6、IL-10和IL-12/IL23 p40分泌水平的影响

作者：白学鹏; 孙鹏; 沈春秀; 杨荣敏; 王昀昕; 王佩; 李家兴; 苏春霞 刊期：2019年第07期

通过研究枸杞多糖(LBP)对免疫抑制小鼠血清中细胞因子IL-6、IL-12/IL-23p40和IL-10分泌的影响,探讨LBP的免疫调节机制,为LBP的开发利用提供理论依据。60只ICR雌性小鼠,随机分为5组,对各组小鼠进行连续4d每日腹腔注射环磷酰胺(40mg/kg),间隔3d后,再连续4d每日腹腔注射环磷酰胺(40mg/kg);同时,用高(40mg/1kg)、中(20mg/1kg)、低剂量(10mg/1kg)的LB...

玉屏风多糖脂质体的制备及表征研究

作者：张勇军; 巴娟; 巫辅达; 王少杰; 蒲文珺; 邓桦; 杨鸿 刊期：2019年第07期

优选玉屏风多糖脂质体的最佳工艺并对其进行表征验证。采用逆向蒸发法制备玉屏风多糖脂质体,以膜材比、脂药比和超声时间为考察因素,包封率为评价指标,采用L9(34)正交试验设计优选制备条件,以超速离心法测定包封率,体外释药试验验证,纳米颗粒分析仪和透射电镜测定其粒径大小与形态。制备玉屏风多糖脂质体的最佳工艺为膜材比8∶1,脂药比4∶1,超声...

树莓叶黄酮提取的正交试验和响应曲面法工艺优化对比

作者：成旭东; 辛志君; 梁妍; 姜婷婷; 李雪虎; 陆锡宏; 周翔; 梁剑平 刊期：2019年第07期

旨在为树莓叶黄酮的开发应用提供数据参考,通过正交试验与响应曲面法设计改良乙醇提取工艺,并通过HPLC建立树莓叶黄酮的色谱分离条件为:Agilent ZorBax SB色谱柱,流动相为1mg/mL乙酸-乙腈=72.5∶27.5,等度分离,柱温30℃,检测波长:257nm,完成树莓叶黄酮的初步分离,以及黄酮中芦丁含量的准确测定和验证。最佳提取工艺为:646mL/mL乙醇,料液比1∶12....

云南松松塔提取物对H22实体瘤小鼠模型的抑瘤作用

作者：刘晓波; 郭美仙; 陈俊雅; 李冬梅; 刘光明; 杨静 刊期：2019年第07期

研究云南松松塔乙醇提取物(PEA)和碱水提取醇沉物(PED)对H22实体瘤小鼠的抑瘤作用。建立H22实体瘤小鼠模型,随机分组,灌胃给药,1次/d,给药10d。末次给药24h后,取血检测γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-4(IL-4)和白细胞介素-10(IL-10)含量;剥离肿瘤组织并称重,计算抑瘤率;检测肿瘤组织匀浆中环氧化酶-2(COX-2)和前列腺素E2(PGE2)...

β-catenin基因26 bp插入/缺失对陕北白绒山羊生长性状的遗传效应分析

作者：高晔; 张雪莲; 赵林虎; 张雨欣; 闫玉清; 潘传英; 闫海龙 刊期：2019年第07期

玉米赤霉烯酮对趋化因子诱导的小鼠T细胞迁移效应和黏附与迁移相关蛋白表达的影响

作者：史嘉缤; 朱敏; 钱婧; 蔡国栋; 邹辉; 袁燕; 顾建红; 刘学忠; 刘宗平; 卞建春 刊期：2019年第07期

为揭示玉米赤霉烯酮(ZEA)免疫毒性机理,通过体外试验研究了ZEA对趋化因子诱导的小鼠T细胞迁移效应的影响,以及这一过程中与细胞黏附与迁移相关蛋白的变化。以ConA作为T细胞活化剂,以不同浓度ZEA(0、10、20、40μmol/L)染毒处理细胞后,Transwell法检测T细胞分别在CCL19、CCL21作用下的迁移效应,以及利用流式细胞术检测迁移后CD4、CD8阳性T细胞所占...

牛上皮细胞中有效表面标记物的筛选

作者：王燕琴; 王易之; 智宇 刊期：2019年第07期

动物上皮细胞容易被多种病毒感染,上皮细胞表面标记物的检测可以作为表征上皮细胞状态的一种手段,但是大多数上皮细胞表面标记物也会在上皮来源的肿瘤细胞中表达。为了选择高效、独特的上皮标记物,采用蛋白质印迹法和间接免疫荧光技术,在牛肾上皮细胞(KE)、舌上皮细胞(TE)、甲状腺上皮细胞(TYE)以及A549细胞和SW480细胞中,检测了AE3(basic cytok...