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猪流行性腹泻病毒实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立及初步应用

作者：杨峰; 杨猛超; 周宏超; 许信刚; 张为民; 张琪 刊期：2018年第07期

为建立一种特异、灵敏、量化、快速的猪流行性腹泻病毒(PEDV)检测方法,设计1对PEDVN基因的特异性引物,建立EvaGreen染料的实时荧光定量RT-PCR的检测方法,并对疑似PEDV感染的临床样品进行检测。结果显示,所建立的实时荧光定量RT-PCR方法的标准曲线具有良好的线性关系,线性相关系数R2=0.999;不与猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖...

猪瘟病毒在猪体组织中的分布

作者：张秋雨; 李鹏; 陈晴; 任鹏举; 银梅; 王选年 刊期：2018年第07期

建立一种猪瘟病毒Taq Man qPCR检测方法,为研究急性死亡期猪瘟病毒在组织中的分布提供一种可靠的方法。采用病理变化和实验室诊断方法对河南新乡某种猪场送检的病死猪进行诊断。根据猪瘟病毒特异性靶基因E0,设计并合成1对引物和水解探针,建立了Taq Man qPCR方法。以不同浓度的重组质粒pMD19-T-E0为模板,生成标准曲线,并对其重复性和特异性进行了...

基于CMV启动子表达鹦鹉热衣原体PmpD-N蛋白的重组火鸡疱疹病毒的构建

作者：刘杉杉; 孙伟; 张稳; 贾长青; 罗杰; 沈易华; 郁建生; 何诚 刊期：2018年第07期

为构建表达鹦鹉热衣原体多型外膜蛋白D的N端(PmpD-N)蛋白重组火鸡疱疹病毒(HVT),以鹦鹉热衣原体CB7株DNA为模板,通过PCR扩增pmpD-N基因,构建带有巨细胞病毒(CMV)启动子的真核表达盒,采用细菌人工染色体技术构建HVT重组子,转染细胞获得HVT重组病毒,并在体外评价该重组病毒的相关特性。结果表明,转染细胞后成功获得HVT重组病毒。通过Westernblot和...

H9N2亚型禽流感病毒糖基化位点突变株的构建与生物学特性研究

作者：廖昌韬; 曾凡桂; 严专强; 覃健萍; 曹永长; 谢青梅; 陈峰 刊期：2018年第07期

为了解H9N2亚型禽流感病毒(AIV)HA蛋白第200位N-糖基化位点的功能,利用流感病毒8质粒反向遗传系统拯救出重组病毒r-WZP株(缺失HA基因第200位N-糖基化位点)和r-WZP200株(含有HA基因第200位N-糖基化位点)。两株病毒的内部基因来自病毒株A/PuertoRico/8/34(H1N1),HA基因与NA基因均来自H9N2AIV流行毒株。结果表明,两株病毒均能够在SPF鸡胚中稳定增殖...

迟缓爱德华菌鞭毛蛋白FliC原核表达及免疫试验

作者：张志强; 杨楠; 李永慧; 王洪彬; 吴同垒; 康元环; 莘余; 史秋梅; 高桂生; 王春凤 刊期：2018年第07期

为了解迟缓爱德华菌鞭毛蛋白FliC的免疫特性,从迟缓爱德华菌基因组中克隆出鞭毛基因fliC,并将其构建到原核表达载体上,用原核表达的方法获得大量重组蛋白,将蛋白纯化后,通过动物模型确定该蛋白的免疫特性。结果表明,迟缓爱德华菌鞭毛蛋白FliC具有较强的免疫原性,对免疫动物应对强毒株感染具有一定保护效果。将FliC与牛血清白蛋白(BSA)混合免疫小...

犬圆环病毒Rep蛋白的原核表达

作者：汪伟; 孙文超; 曹亮; 易驰喆; 郑敏; 鲁会军; 金宁一 刊期：2018年第07期

犬圆环病毒(CanineCV)是一种新发现的圆环病毒。制备针对CaineCVRep的抗体,为建立CaineCVELISA检测方法及研究Rep蛋白的功能奠定基础。以CaineCV基因组作为模板,扩增出Rep基因序列。PCR产物克隆至pET-28a原核表达载体上,获得了重组质粒pET(28a)-Rep。将重组质粒转入大肠埃希菌BL21感受态细胞后进行诱导表达,SDS-PAGE分析表明重组Rep蛋白在大肠埃...

Hsp90AA1识别狂犬病病毒磷蛋白截短体及磷酸化位点突变体的研究

作者：许运斌; 孙玉章; 刘娟; 颜焰; 高兴红; 罗果; 王欢 刊期：2018年第07期

为了探究热休克蛋白90AA1(Hsp90AA1)识别狂犬病病毒(RV)磷蛋白(P)截短体及磷酸化位点突变体的能力,构建RVP蛋白多种截短体和磷酸化位点突变体,分别与Hsp90AA1真核表达载体共转染于鼠神经瘤母细胞(N2a)。免疫共沉淀分析显示Hsp90AA1能够广泛识别RVP蛋白的多种截短体和不同的磷酸化突变体。结果提示,Hsp90AA1在RABV感染过程中有着广泛的作用,这对...

实验性自身免疫性脑脊髓炎模型小鼠脾和中枢神经系统中CD4+T细胞的动态变化

作者：罗会; 郭晴晴; 吕爱平; 何小鹃; 马超英 刊期：2018年第07期

利用MOG35-55多肽的抗原乳剂和百日咳毒素诱导C57BL/6小鼠EAE模型,分别于发病初期S1(Day17)、发病高峰期S2(Day25)、平台初期S3(Day40)、平台后期S4(Day52)取材。采用流式细胞仪检测4个时间点EAE小鼠脾单个核细胞中CD4+T细胞的比例,采用免疫组化法观察4个时间点中枢神经系统各部位CD4+T细胞的浸润情况。结果显示,在EAE小鼠的发病过程中,脾中的CD...

猪源大肠埃希菌药敏试验及耐药基因检测

作者：晏云涛; 赵汝; 苗淑淑; 高洪; 俸江琴 刊期：2018年第07期

为调查云南省某规模化猪场大肠埃希菌(E.coli)对氨基糖苷类药物的耐药性及耐药基因aadA1和aph(3′)的携带情况,采用K-B(Kirby-Bauer)法检测51株E.coli对6种氨基糖苷类抗生素的耐药性,同时对2个目的基因片段aph(3′)和aadA1进行PCR扩增。结果显示,51株猪E.coli对链霉素、新霉素、妥布霉素、庆大霉素、阿米卡星、卡那霉素的耐药率分别为49.0%、35....

新疆昭苏县马感染嗜吞噬细胞无浆体血清学与分子生物学调查

作者：李烛南; 卢怡竹; 王振国; 刘志杰; 殷宏; 曾巧英 刊期：2018年第07期

马属动物是嗜吞噬细胞无浆体的重要天然宿主,旨在弄清新疆昭苏县马感染嗜吞噬细胞无浆体情况和病原特征。对采集的100份马血清进行间接免疫荧光(IFA)检测嗜吞噬细胞无浆体抗体,对阳性样品相对应的DNA样品通过PCR扩增、16SrRNA基因测序、序列比对、完成了分子分型分析。间接免疫荧光法(IFA)检出率为8%(8/100),通过对阳性样品的基因组进行16SrRNA...

复方中草药添加剂对牛乳体细胞数和乳品质的影响

作者：梁涛; 杨峰; 卢明; 崔武君; 崔武超; 逄国梁; 郭抗抗; 赵明哲; 卿素珠; 张为民 刊期：2018年第07期

乌龙茶多糖和多酚对肝癌细胞HepG2的协同抑制作用

作者：姚莉; 蒋爱民; 杨承鸿; 李淑红 刊期：2018年第07期

为了探讨乌龙茶多糖、多酚对肝癌细胞HepG2细胞增殖及细胞周期的影响,以及两者联合使用对肝癌细胞HepG2协同杀伤抑制作用,通过四氮甲唑蓝(MTT)试验检测细胞的增殖抑制率,以观察乌龙茶多糖、多酚对肝癌细胞HepG2的增殖抑制作用;应用流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果表明,乌龙茶多糖、多酚可以抑制肝癌细胞HepG2的生长、增殖;二者联合应用对肝癌细...

柴胡疏肝散对代谢综合征大鼠血脂、胰岛素及葡萄糖转运蛋白4的影响

作者：黄玉萍; 王家乐; 魏爱生; 林旋; 刘天; 卢昉; 刘晓霞; 梁佩玲 刊期：2018年第07期

双合汤对膝骨性关节炎大鼠关节液中PGE 2、MDA、SOD及MMP-3的影响

作者：杨康栋; 李发炘; 梁延昌; 陈延锋; 林志豪; 赵晓勤 刊期：2018年第07期

双载药静电纺丝膜的制备及抑菌效果观察

作者：杜凤霞; 王月飞; 姚淑娟; 吕丽艳; 刘秀财; 张凤娇; 郭俊杰; 蒋丽艳; 王慧; 张浩 刊期：2018年第07期

以聚乙烯醇(PVA)和海藻酸钠(SA)为载体,万古霉素和头孢吡肟作为模型药物,制备具有可吸收性能的抗菌静电纺丝膜。以静电纺丝膜的抑菌效果作为指标,结果表明,制备的双载药静电纺丝膜载药均匀,可纺性好,具有良好的抑菌性能。