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口蹄疫病毒O型OHM/02株全长cDNA感染性克隆的构建

作者：苗书魁; 魏玉荣; 魏婕; 米晓云; 汪萍; 马文戈; 王延; 薛英; 易忠; 黄炯 刊期：2018年第01期

为构建O型口蹄疫病毒(FMDV)的感染性克隆,采用RT-PCR将O型FMDV OHM/02株全长基因组分为5个重叠的片段进行扩增,克隆至载体pUC57中,获得全长cDNA克隆pPO-1。将线性化的pPO-1与含有编码T7 RNA聚合酶的真核表达重组质粒共转染BHK-21细胞,出现致细胞病变效应(CPE)。对拯救的病毒进行RT-PCR扩增、酶切、测序,表明人工设计的分子标记Bam HⅠ酶切位点消...

人工感染细粒棘球蚴犬粪中蛋白质组的分析

作者：李双男; 闫鸿斌; 李立; 姚刚; 田文俊; 李文卉; 张念章; 吴燕涛; 付宝权; 贾万忠 刊期：2018年第01期

收集感染细粒棘绦虫原头蚴后不同时间的犬粪,分离和提取蛋白质,对蛋白质在胶内酶切后,依次进行质谱分析、生物信息学和蛋白质功能富集分析。结果发现,在犬粪中共鉴定出蛋白质3 242个,其中宿主(犬)蛋白有3 107个、细粒棘球绦虫蛋白有135个。蛋白质功能富集结果显示,犬感染细粒棘球绦虫后,寄生虫与宿主相互作用,虫体在不同时间分泌特定蛋白,而蛋白...

副猪嗜血杆菌的分离鉴定及其OmpP5基因序列分析

作者：王超; 陈欣; 张梦南; 黄晨; 李睿; 刘梦志; 刘宝山; 姚龙泉; 陈新亮; 尹荣焕 刊期：2018年第01期

为研究辽宁省副猪嗜血杆菌(Hps)OmpP5基因的遗传变异规律,从辽宁省阜新市某猪场疑似患有副猪嗜血杆菌病的患猪肺部采取组织病料进行细菌分离,通过革兰染色、生化鉴定、卫星现象及Hps 16 S rRNA PCR检测,鉴定为副猪嗜血杆菌。根据已发表的Hps OmpP5基因设计1对特异性引物,对分离株OmpP5基因进行扩增、克隆及测序,得到长度为1 116 bp的OmpP5基因序...

不同CpG ONDs对猪源细胞免疫分子转录水平的影响

作者：邓慧; 张丽琳; 黎瑞巧; 张蕾; 黄金海 刊期：2018年第01期

为了探究不同CpG ODNs对猪免疫调节作用,设计合成了7条包含CpG单元的寡聚核苷酸。通过体外刺激3种猪源细胞,包括猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)、猪肺泡巨噬细胞(3D4/21)和猪外周血单核细胞(PBMCs),用荧光定量PCR检测细胞因子转录水平的变化。同时探究了不同CpG ODNs处理过的IPEC-J2的抗病毒能力。不同CpG ODNs都能够使种猪源细胞TLR9和TLR3相关信号通...

禽呼肠病毒在鸡胚成纤维细胞系中的增殖规律

作者：沈文康; 谢芝勋; 王盛; 黄莉; 谢丽基; 黄娇玲; 曾婷婷; 张艳芳; 张民秀; 罗思思; 范晴; 谢志勤; 邓显文 刊期：2018年第01期

为研究禽呼肠病毒(ARV)在鸡胚成纤维细胞(DF1)上的增殖规律,将ARV S1133株接种至DF1细胞,连续传代3次后观察细胞病变(CPE),RT-PCR检测病毒核酸。结果显示,ARV S1133株对DF1细胞有很好的亲嗜性,并出现典型的CPE。按照Reed-Meunch方法测量7个时间点的TCID 50,并绘制生长曲线。结果显示,ARV感染DF1细胞后的0 h~12 h为静止期,12 h~48 h为快速增长期,...

伊犁地区牛源大肠埃希菌血清分型和ERIC-PCR分型研究

作者：刘英玉; 张妍; 刘俊飞; 吾买尔江·牙合甫; 张晓红; 姚刚 刊期：2018年第01期

调查某肉牛养殖场和其定点屠宰加工场中牛源大肠埃希菌的表型和基因型,为产业链中大肠埃希菌的污染情况提供科学依据。对分离鉴定的牛源大肠埃希菌采用O抗原多价血清进行检测,选取其中多价4和多价5的菌株进行单价PCR(O7、O39、O5、O114、O116、O6、O9、O30、O55)的扩增,同时进行ERIC-PCR的基因分型。结果表明,牛源大肠埃希菌分离株以多价4、多价...

鱼源嗜水气单胞菌和维氏气单胞菌PCR-RFLP鉴别方法的建立

作者：郭睿 刊期：2018年第01期

嗜水气单胞菌和维氏气单胞菌是鱼类常见条件致病菌,采用传统的形态分类和生理生化反应进行鉴别费时费力,有时还会错误判断,为了提高鉴别效率和准确率,有必要建立一种快速鉴别两种细菌的分子生物学方法。选取12株鱼源致病气单胞菌使用细菌16 S rDNA通用引物扩增细菌目的片段,将所测得序列校正后构建系统发育树以明确菌种,并依据种间序列差异筛选...

副鸡禽杆菌LAMP检测方法的建立

作者：梅晨; 李淑芳; 徐玉智; 张培君; 龚玉梅; 王宏俊 刊期：2018年第01期

应用环介导等温扩增(LAMP)技术建立了快速特异的检测副鸡禽杆菌的方法。利用在线引物设计软件Primer Explorer Version 4.0,针对副鸡禽杆菌16 S RNA基因序列设计两组LAMP引物,并对副鸡禽杆菌特异性DNA的扩增条件进行优化,评价所建立LAMP的特异性和灵敏性。结果显示,优化后的反应条件为65℃恒温反应60 min,内引物1.60 pmol/μL、外引物0.20 pmol/μ...

浒苔多糖对鸡免疫增强效果的研究

作者：孙秋艳; 沈美艳; 朱明恩; 李舫 刊期：2018年第01期

FGF4在牛早期胚胎发育过程中的表达

作者：刘瑞琪; 王玮玮; 屈鹏祥; 马晓楠; 王勇胜; 卿素珠 刊期：2018年第01期

应用实时荧光定量PCR和免疫荧光染色技术对成纤维生长因子4(FGF4)在牛早期胚胎发育各个阶段的表达和定位规律进行研究。结果表明,FGF4 mRNA及蛋白在牛MⅡ期卵母细胞及各阶段早期胚胎均有表达,其表达量由强到弱依次为桑椹胚、囊胚、8-细胞胚、MⅡ期卵母细胞、4-细胞胚、2-细胞胚;从定位来看,FGF4在MⅡ期卵母细胞及8-细胞期前的各阶段早期胚胎的细...

骆驼天然单域重链抗体库的构建与鉴定

作者：周景明; 翟圆君; 耿玥; 祁艳华; 刘红亮; 王爱萍 刊期：2018年第01期

构建骆驼非免疫噬菌体抗体库,完成抗体库的鉴定。从未经免疫的健康骆驼的外周血淋巴细胞中提取总RNA后,特异性扩增骆驼重链抗体可变区(VHH)片段,将其与噬菌粒载体pCANTAB5E连接获得重组子,多次电转感受态大肠埃希菌TG1后获得VHH抗体基因库,并分析其库容量及多样性。结果表明,经过吸附-洗脱的淘选过程筛选出能够与莱克多巴胺人工抗原特异性结合的...

伊维菌素微乳的研制及质量评价

作者：朱庆贺; 陈曦; 王丽坤; 王爽; 骆宏伟; 张莹; 金振华; 史同瑞 刊期：2018年第01期

研制伊维菌素微乳剂,并对其特性、稳定性进行评定。依据伊维菌素的溶解度,选择适宜的油相和表面活性剂;依据维持微乳体系稳定性的能力,筛选助表面活性剂;利用伪三元相图,确定表面活性剂与助表面活性剂的质量比(Km值),筛选伊维菌素微乳剂的配方,并进行微乳的特性和稳定性分析。结果表明,伊维菌素微乳剂各组分质量分数为伊维菌素5%(50 mg/mL)、油6...

防霉剂脱氢醋酸钠致大鼠出血试验

作者：余峥嵘; 吴银超; 谢佳玉; 谢阳; 李楠; 鲁倩倩; 张雨梅 刊期：2018年第01期

云南红河州小反刍兽疫的血清学及分子流行病学调查

作者：张容萍; 王薇; 刘佳升; 李晓红; 段锐锐; 郑玉芳; 陈培富 刊期：2018年第01期

为掌握小反刍兽疫在云南省红河州的流行情况及疫苗防控效果,应用竞争酶联免疫吸附试验(ELISA),对该州13个县市采集自人工免疫山羊的920份血清进行抗体检测,同时应用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)对215份山羊组织样品检测小反刍兽疫病毒(PPRV)核衣壳蛋白(N)基因小片段,并取PCR扩增呈阳性的组织样品进一步做N基因大片段的克隆与测序,最后与国内外参...

犬血型系统研究进展

作者：王雪; 姜忠玲; 丛霞; 曹荣峰; 田文儒; 李华涛 刊期：2018年第01期

输血疗法在兽医临床的使用范围和数量不断扩大,已经发展成为一种抢救重症犬和治疗病犬的重要手段。输血疗法可以迅速补充患病犬的循环血量和体液量,维持血压,起到补血、止血、解毒、提高机体耐受力的作用。犬输血疗法在提供生命保障的同时,也会带来危险与伤害,异体输血时,血型不符可能产生输血反应,严重时可以致死患犬。论文主要对犬血型的发现...