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G1-like与F/98-like进化谱系的P B2、M基因在H5N6亚型禽流感病毒重配中的竞争优势研究

作者：刘娇; 郝小利; 李秀丽; 刘东; 石磊; 陈凯彪; 刘开拓; 王晓泉; 顾敏; 刘秀梵 刊期：2019年第11期

为评价不同H9N2亚型病毒供体在H5N6亚型禽流感病毒(AIV)重配中的作用,本研究选取全套内部基因与S基因型H9N2 AIV高度同源的3株H5N6 AIV流行株MZ34、YB0597和JT131,利用反向遗传学技术在MZ34的8基因重组质粒基础上另外添加F/98-like来源的PB2和M质粒,即以MZ34(8)+F/98(PB2+M)的10质粒组合(Group 1)共转染细胞进行重组H5N6病毒的竞争性拯救;PCR扩...

利用CRISPR/Cas9技术构建OAS2敲除的PK-15细胞系及敲除OAS2对CSFV复制的影响

作者：张越秀; 张华伟; 李连峰; 仇华吉 刊期：2019年第11期

为研究猪源2’-5’寡腺苷酸合成酶2(OAS2)对CSFV复制的影响,本研究利用CRISPR/Cas9系统构建敲除OAS2的PK-15细胞系(PK-OAS2-KO)。在构建PK-OAS2-KO细胞系时,设计2条分别靶向OAS2基因第1和第2外显子的特异性sg RNAs,将sg RNA插入LentiCRISPRv2载体获得重组质粒plentiCRISPRv2-sgRNA;将重组质粒与辅助质粒共转染HEK293T细胞,包装获得携带sg RNA的...

鸭源鸡杆菌gtxA/flfA基因双缺失株的构建及其生物学特性分析

作者：刘盼盼; 王继洋; 杨霞; 刘红英; 李永涛; 常洪涛; 王新卫; 夏银河; 陈陆; 赵军; 王川庆 刊期：2019年第11期

OmpD对肠炎沙门菌生物学特性影响的研究

作者：张志强; 苏硕青; 杜万年; 李永慧; 刘勃兴; 吴同垒; 朱国强; 史秋梅 刊期：2019年第11期

为研究外膜孔蛋白Omp D在肠炎沙门菌致病中的作用,本研究利用λ-Red同源重组技术构建了肠炎沙门菌(C50336)omp D基因缺失突变株(C50336Δomp D)。测定了C50336,缺失株C50336Δomp D,回补株p BR322-omp D/C50336Δomp D各菌株在LB和M9培养基中的生长情况,结果显示,缺失株C50336Δomp D与野生型菌株和回补菌株相比,其生长速度无明显差异。利用结晶紫染...

血清6型流行性出血病病毒在我国云南的首次分离与鉴定

作者：杨振兴; 寇美玲; 李占鸿; 廖德芳; 肖雷; 朱建波; 高林; 李华春; 杨恒 刊期：2019年第11期

为对流行于我国云南省的流行性出血病病毒(EHDV)进行分离与鉴定,以掌握我国流行EHDV的遗传特征与感染特性,本研究将2012年8月采集于哨兵牛的EHDV核酸阳性血液接种BHK-21细胞以分离病毒;通过血清中和试验与分离病毒的Seg-2、Seg-3基因测序分析,确定病毒的血清型与遗传特征;采用C-ELISA和荧光定量RT-PCR(qRT-PCR)方法对EHDV感染哨兵牛血清中的抗体...

10种药物对结肠小袋纤毛虫抑杀效果研究

作者：孙晨阳; 闫文朝; 何凯; 王天奇 刊期：2019年第11期

为筛选有效的抗结肠小袋纤毛虫药物,本研究选取替硝唑、阿奇霉素等10种广谱抗细菌、真菌和原虫药物,体外检测了这些药物对小袋虫滋养体抑杀效果。参考这些药物对细菌、真菌或原虫的治疗剂量,设置高、中、低剂量来确定药物是否有效,然后用不同浓度的急性毒性试验来筛选有效药物的半数致死浓度(LC50)和最小杀虫浓度(MIC)。结果显示,10种药物中有6...

基于牛呼吸道合胞体病毒融合前F蛋白的间接ELISA方法的建立与应用

作者：王磊; 常继涛; 于力 刊期：2019年第11期

为确定牛呼吸道合胞体病毒(BRSV)在我国的流行情况,本研究以BRSV融合前F蛋白作为包被抗原,经各项条件优化后建立了检测BRSV抗体的间接ELISA方法:确定抗原最佳包被浓度为2 mg/L、待检血清的最佳稀释度为1∶100、最佳封闭液为3%明胶、羊抗牛Ig G-HRP的稀释度为1:8000,抗体阴阳性临界值为0.204。特异性试验结果显示,该ELISA方法与阿卡斑病毒(AKAV)...

牛结核分枝杆菌MPB70+83MAb的制备及胶体金免疫层析试纸条的初步研制

作者：叶俊; 布日额; 吴金花; 锡林高娃; 陈金龙; 王金良; 刘思国; 崔子寅; 王思珍 刊期：2019年第11期

为制备牛结核分枝杆菌(MB)感染早期分泌性蛋白MPB70+83的胶体金标记免疫层析试剂条,本研究将构建的重组大肠杆菌p ET30a(+)-MPB70+83/BL21诱导表达,经纯化后免疫小鼠,制备MPB70+83融合蛋白的单克隆抗体(MAb),对MAb标记胶体金后制备检测试纸,并确定其特异性、灵敏度等技术指标。结果显示,获得分子量为39 ku的MPB70+83融合蛋白,经纯化后重组蛋白的...

鹅星状病毒LAMP快速检测方法的建立与应用

作者：张玉霞; 杨金兴; 孟凯; 蔡李萌; 袁小远; 王友令 刊期：2019年第11期

鹅星状病毒是一种新发的可导致雏鹅以痛风为主要特征的传染性病原。为建立鹅星状病毒(AstV)的快速检测方法,本研究根据鹅Ast V ORF1b基因的保守序列设计了一组特异性的LAMP引物,建立鹅AstV的LAMP快速检测方法,并检测其特异性和灵敏度。结果显示:建立的LAMP方法的最佳反应温度为64℃;仅能扩增鹅Ast V,而对鹅细小病毒、鹅副黏病毒、鸭坦布苏病毒及...

鸡源致病性大肠杆菌地方流行株外膜蛋白的制备及其免疫原性研究

作者：张艳英; 张召兴; 郭家媚; 李蕴玉; 李佩国; 索勋 刊期：2019年第11期

为了分析鸡源致病性大肠杆菌地方流行株外膜蛋白(OMPs)免疫保护性,本研究采用Sarkosyl法提取10株鸡源致病性大肠杆菌地方流行株的OMPs,进行浓度测定和超微结构观察,经SDS-PAGE和western blot分析其免疫原性。结果显示,制备的OMPs浓度为1026.632μg/mL~1715.589μg/m L;电镜结果显示其超微结构呈双层泡状的C形或O形;SDS-PAGE分析显示其大小集中在25...

山羊副流感病毒3型感染MDBK细胞和BECs后7种ISGs mRNA变化分析

作者：肖芳; 嵇辛勤; 李基棕; 廖政; 毛立; 李文良; 孙敏; 刘茂军 刊期：2019年第11期

为探究山羊副流感病毒3型(CPIV3)感染MDBK细胞和气管上皮细胞(BECs)后的抗病毒免疫应答,本研究针对7种干扰素刺激基因(ISGs):IFI6、ISG15、OAS1Y、OAS1Z、Mx1、Mx2及RSAD2的基因序列设计特异性引物,经优化建立了检测7种ISGs的SYBR Green I荧光定量PCR方法。利用所建立的方法检测CPIV3JS2013株感染MDBK细胞和BECs 24 h、48 h和72 h后7种ISGs的m R...

耻垢分枝杆菌诱导中性粒细胞胞外诱捕网形成的研究

作者：臧鑫鑫; 党光辉; 王忠星; 刘虹秀; 崔子寅; 崔莹莹; 宋宁宁; 刘思国 刊期：2019年第11期

免疫蛋白酶体亚基LMP7在弓形虫脑炎中的作用研究

作者：张永莉; 胡薇; 刘强; 马泽林; 胡守萍; 张卓; 张险峰; 贾洪林; 何希君 刊期：2019年第11期

免疫蛋白酶体在炎症性疾病模型中发挥重要作用。为研究免疫蛋白酶体亚基LMP7在弓形虫感染引起小鼠脑部炎症过程中的作用,本研究将36只BALB/c小鼠随机分为3组,每组12只:对照组小鼠腹腔注射PBS,实验组小鼠腹腔注射弓形虫RH强毒株,于人工感染第2 d分别对实验组小鼠腹腔注射PBS(RH+PBS组)和PR-957(RH+PR-957组,免疫蛋白酶体亚基LMP7特异性抑制剂),分...

我国传染性法氏囊病病毒新型变异株分析研究

作者：范林进; 王雨龙; 吴甜甜; 李凯; 姜楠; 高玉龙; 高立; 刘长军; 崔红玉; 潘青; 张艳萍; 刘玉凤; 孙先本; 刘俊启; 王笑梅; 祁小乐 刊期：2019年第11期

近期非典型传染性法氏囊病(IBD)给养禽业带来了新的威胁,本研究团队率先鉴定发现其病原为IBDV新型变异株。为了解该IBDV新型变异株流行规律和致病特点,本研究对2018年9月~2019年6月分离自黑龙江、辽宁、河北、山东、江苏、浙江、云南7个省的32个IBDV代表株的VP2基因高变区进行了遗传演化分析,结果显示,IBDV新型变异株虽然属于变异株分支,但却不...

猪A群轮状病毒RVA/Pig-tc/CHN/SWU-1C/2018/G9P[13]株的分离与鉴定

作者：李玉; 穷达; 张敏; 阚蕊慈; 汤承; 岳华; 张斌 刊期：2019年第11期

为分离并鉴定A群猪轮状病毒(PoRV),本研究通过MA-104细胞分离培养、间接免疫荧光鉴定、RT-PCR鉴定以及序列分析对一份疑似Po RV感染的小肠样本进行了病毒的分离与鉴定。结果显示,分离到一株Po RV,其基因型为G9-P[13]-I5-R1-C1-M1-A8-NI-T7-E1-H1,命名为RVA/Pig-tc/CHN/SWU-1C/2018/G9P[13]。经序列分析显示,该病毒的VP7、VP4、VP6、NSP1、NSP2、...