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硒对金黄色葡萄球菌感染的奶牛乳腺上皮细胞Nod2/MAPK/mTORs信号通路中关键因子mRNA转录水平的影响

作者：关立增; 王亨; 刘俊俊; 王娟; 韩照清; 毕崇亮 刊期：2019年第09期

致蛋鸡卵黄性腹膜炎大肠杆菌分子分群、耐药表型及耐药基因型检测与分析

作者：张召兴; 李佩国; 李蕴玉; 贾青辉; 张香斋; 吴同垒; 张志强 刊期：2019年第09期

为分析邢台和秦皇岛地区致蛋鸡卵黄性腹膜炎大肠杆菌(E.coli)分离株的分子分群情况及耐药表型和耐药基因型之间的相关性,本研究采用PCR法和96孔板微量肉汤稀释法分别对临床分离的42株致鸡卵黄性腹膜炎E.coli的系统进化分群、耐药基因和12种抗菌药物耐药表型进行检测。结果显示,42株分离菌株中属于A、B1、B2、D群的分别有7株、9株、14株、12株,以...

鱼源鲁氏耶尔森菌mobBC基因无痕缺失株的构建及其毒性研究

作者：刘韬; 魏文燕; 刘家星; 汪开毓 刊期：2019年第09期

为探究鲁氏耶尔森菌(Yersinia ruckeri)的四型分泌系统(T4SS)中mobBC基因的作用,本研究构建了强毒力Y.ruckeri SC09菌株mobBC基因的无痕缺失株并研究了其生理变化和毒性影响。将mobBC基因上、下游同源臂克隆入自杀载体pLP12并转化供体菌β2163,得到pLP12-mobBC/β2163,进一步通过接合转移,将pLP12-mobBC导入受体菌株SC09中。利用抗性筛选和vmi480...

生鲜牛乳中金黄色葡萄球菌的鉴定及耐药分子特征研究

作者：张玲; 常江; 吴俐勤; 裘罕琦; 周沁怡; 戴贤君; 杨华; 夏效东; 唐标 刊期：2019年第09期

为了解生鲜牛乳中金黄色葡萄球菌(S.aureus)的污染及耐药情况,研究其耐药的分子特征,本研究利用国标法分离了来自浙江杭州市某奶牛场99份生鲜乳中的S.aureus,通过基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)进行鉴定,对其进行质谱聚类分析和16S r DNA系统发育分析,采用微量肉汤稀释法测定其最小抑菌浓度(MIC),利用Illlumina Hi Seq 4000平...

湘华鲮一种急性细菌性肠炎的病原分离及组织病理研究

作者：蒋国民; 邓时铭; 邹利; 程小飞; 李传武; 刘丽 刊期：2019年第09期

为鉴定人工养殖的湘华鲮出现大量由急性肠炎引起死亡的病原,本研究取病鱼腹水和肠道粘液进行病原菌分离纯化,获得菌株XHL-03。经人工感染试验验证,人工感染的湘华鲮出现与自然发病相同的症状,初步确定其为该病致病菌株。经细菌形态学、生理生化特征、16S r DNA序列分析及系统发育树聚类和血清凝集试验检测,结果显示致病菌株XHL-03为非O1/非O139...

H5和H7亚型高致病性禽流感病毒新型冻干微芯片双重荧光定量RT-PCR方法的建立和初步应用

作者：高晓艺; 韩焘; 王乃迪; 王传彬; 杨林; 王新杰; 高姗姗; 孙晓明; 胡祥钰; 石玉祥; 刘玉良 刊期：2019年第09期

猪流行性腹泻病毒IgA抗体间接ELISA方法的建立

作者：刘烨; 张家林; 王潇博; 石达; 时洪艳; 陈建飞; 张鑫; 冯力 刊期：2019年第09期

为建立检测猪流行性腹泻病毒(PEDV)血清特异性IgA抗体的间接ELISA方法,本研究利用融合PCR的方法,将PEDV G2型LNct2a株S蛋白的S1基因片段与人源IgG分子的Fc基因片段融合,克隆于真核表达质粒pAAV-IRES-hr GFP中,构建真核表达质粒pAAV-LNCT2-S1-Fc并转染293T细胞,表达并纯化了S1蛋白。以纯化的S1蛋白作为包被抗原,以羊抗猪IgA-HRP为二抗,通过优化反...

猪流行性腹泻病毒单克隆抗体的制备及胶体金免疫层析检测方法的建立

作者：贾宇旻; 徐飞; 边洪芬; 王娟; 贾爱卿; 唐勇; 贾杏林 刊期：2019年第09期

为了建立快速检测猪流行性腹泻病毒(PEDV)的胶体金免疫层析方法(GICA),本研究用PEDV免疫BALB/c小鼠,制备杂交瘤细胞。分别采用间接ELISA和表面荧光吸附法(CSFIA)筛选,共得到33株能够稳定分泌抗PEDV单克隆抗体(MAb)的杂交瘤细胞株。通过制备小鼠腹水并纯化后测得其中21株细胞分泌的MAb的ELISA效价在1∶1.6×104以上,且均仅与PEDV反应,不与TGEV和PR...

鳜弹状病毒TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立及应用

作者：梁红茹; 蔡秀珠; 范芷仪; 林强; 付小哲; 刘礼辉; 黄志斌; 牛银杰; 林蠡; 李宁求 刊期：2019年第09期

为建立快速、准确检测鳜弹状病毒(SCRV)的TaqMan荧光定量PCR方法,本实验根据弹状病毒N基因中的保守序列,设计合成了一对特异性引物和TaqMan探针,以构建的标准质粒为模板,经条件优化后建立了SCRV的TaqMan荧光定量PCR检测方法,并对该方法的特异性、敏感性和重复性进行试验。结果显示,建立的TaqMan荧光定量PCR检测方法标准曲线的相关系数为0.999,质...

H7N9禽流感DNA疫苗的免疫保护效力研究

作者：梁真洁; 潘俊慧; 于晓菲; 陈普成; 曾显营; 柳金雄; 施建忠; 邓国华; 姜永萍; 陈化兰 刊期：2019年第09期

为检测H7N9禽流感病毒(AIV) DNA疫苗的免疫保护效力,本研究将H7N9禽流感疫苗株A/Chicken/Guangxi/SD098/2017 (H7N9)[CK/GX/SD098/17 (H7N9)]的HA基因密码子优化后,定向克隆至载体pCAGGS中构建重组质粒pCA-SD098。将pCA-SD098转染至293T细胞后,采用间接免疫荧光(IFA)和western blot检测,结果显示,HA蛋白可以在293T细胞中正确表达。分别利用15μg...

DENND1B蛋白对AP2B1蛋白细胞中表达及分布影响的研究

作者：李奇兵; 赵玉辉; 王广文; 温霞; 梁立滨; 李俊平; 黄山雨; 孙楠; 姜丽; 陈化兰; 李呈军 刊期：2019年第09期

重组优势T、B细胞表位的猪圆环病毒2型Cap蛋白的原核表达及免疫原性研究

作者：聂恺阳; 吴云燕; 易琳; 吴祖雄; 陈金顶; 赵明秋 刊期：2019年第09期

新RGD嵌合体肽对黑色素瘤细胞B16增殖及其黑色素合成的影响

作者：姜轩; 付超; 赵瑞利; 金天明; 马吉飞; 孙英峰; 于晓雪; 张欣; 刘梦月; 潘晨浩 刊期：2019年第09期

为研究新合成的靶向抗肿瘤肽RGD-T-La(S)、RGD-T-La(FS)对小鼠黑色素瘤B16细胞增殖及其黑色素合成的影响,本研究将T-La (S)、T-La (FS)与RGD (精氨酸-谷氨酸-天冬氨酸)小分子蛋白质偶联,合成新的靶向抗肿瘤肽RGD-T-La (S)、RGD-T-La (FS)。通过CCK8法检测多肽对B16细胞增殖的影响;微量酶标法检测多肽作用于B16细胞后乳酸脱氢酶(LDH)含量变化;透...

2016年~2018年山东地区25株H9N2亚型禽流感病毒分子分析

作者：陈照坤; 鲁梅; 黄小莹; 马鑫鑫; 朱凤珠; 黄庆华; 古曙光; 杨少华; 许传田; 崔宁 刊期：2019年第09期

H9N2亚型禽流感(AI)持续在我国鸡群中广泛流行,为了明确山东及周边养殖场H9N2亚型禽流感病毒(AIV)的分子进化情况,本研究对2016年~2018年间从山东及周边养殖场病鸡中分离鉴定得到的25株H9N2亚型AIV分别纯化后进行全基因组测序和遗传演化分析,并分析序列中重要氨基酸位点的变异情况。全基因组序列分析显示:25株H9N2 AIV 8个基因节段均属于欧亚谱...

福建省14株PRRSV-2全基因组特性分析

作者：魏春华; 夏伟; 马英; 李娜; 吴熠丹; 勾明郗; 林志峰; 戴爱玲; 杨小燕; 刘建奎 刊期：2019年第09期

为了解福建省PRRSV的流行情况及分子特征,本研究选取14株不同年份不同谱系的PRRSV-2(lineage 3、lineage 8.7、lineage 5.1和lineage 1)进行全基因组扩增并测序分析。结果显示,福建省14株PRRSV-2基因组全长为15 016 bp~15 407 bp,与VR-2332、CH-1a、JXA1和NADC30的核苷酸序列同源性为82.9%~99.4%,14株PRRSV-2之间核苷酸序列同源性为82.1%~99.3%,...