中国预防兽医学报杂志 北大期刊 CSCD期刊 统计源期刊

鸡马立克氏病病毒感染对鸡神经系统损伤的研究

作者：周林宜; 张艳萍; 孙国荣; 张峰; 于正浩; 高玉龙; 祁小乐; 李凯; 王笑梅; 刘长军 刊期：2019年第02期

猪链球菌2型安徽分离株多位点序列分型与毒力特征研究

作者：张燎原; 陈章; 汪清峰; 王玮; 孙裴; 魏建忠; 李郁 刊期：2019年第02期

为了解安徽地区猪链球菌2型(SS2)临床分离株毒力基因分布、分子分型特征及其与致病性的相关性,本研究收集了58株源自临床患病猪的SS2,应用PCR技术检测其毒力基因:胞外蛋白因子基因(epf)、溶菌酶释放蛋白基因(mrp)和溶血素基因(sly),应用多位点序列分型方法(MLST)对其进行基因分型,并分析其与动物致病性之间的相关性。结果显示,58株分离菌,epf~+/...

利用信息肽诱导和Cre/LoxP系统构建猪链球菌基因缺失株

作者：刘冉; 陈福广; 陈平; 黄萌萌; 朱金鲁; 谢芳; 孟庆文; 刘思国; 刘建华; 张跃灵 刊期：2019年第02期

为建立一种高效的猪链球菌(Streptococcus suis)基因缺失方法,本研究利用信息肽诱导DN段转化和Cre/LoxP系统去除抗性基因这两种技术,通过在S.suis 05ZYH33的ssu051921基因上、下游片段和壮观霉素抗性基因(spc)片段之间引入LoxP位点,采用信息肽GE9诱导构建的DN段转化S.suis并发生重组,经抗性筛选快速获得spc替代ssu051921基因的缺失株;进一步引入...

江淮地区猪链球菌和肠球菌分离株的鉴定、分型及药物敏感性分析

作者：杨龙斌; 毛天骄; 吴华健; 焦安心; 孙裴; 魏建忠; 李郁 刊期：2019年第02期

为了解江淮地区猪链球菌(SS)和肠球菌分离株的血清型或基因型分布特征及临床耐药性,本研究对江淮地区临床病例196株分离菌进行SS与肠球菌的鉴定,采用PCR方法进行SS及其1、2、7、9血清型和mrp、ef、sly毒力基因型鉴定;脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析SS和肠球菌基因型;K-B法测定其药物敏感性。结果显示,在196株分离菌中,鉴定出112株SS,40株肠球菌。血清...

狐肺炎大肠杆菌毒力基因和耐药基因检测及药物敏感性分析

作者：朱利霞; 王洪彬; 赵希艳; 王双月; 史秋梅; 高光平 刊期：2019年第02期

为了解河北地区狐肺炎大肠杆菌毒力基因、耐药基因的分布及耐药性情况,本研究采用PCR技术对从狐肺炎病例分离的81株大肠杆菌的毒力基因和耐药基因进行检测,采用K-B法检测这些大肠杆菌对16种抗菌药物的敏感性,采用试管二倍稀释法检测中药对大肠杆菌的最小抑制浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC),采用腹腔注射法检测81株大肠杆菌对小白鼠的致病性。结果...

两株草鱼源维氏气单胞菌菌株的主要表型特征及致病力比较

作者：任燕; 高彩霞; 曾伟伟; 王庆; 王英英; 李莹莹; 尹纪元; 常藕琴; 石存斌 刊期：2019年第02期

中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽药评价中心

刊期：2019年第02期

中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽药评价中心成立于2017年3月,依托于哈尔滨兽医研究所黑龙江省实验动物质量监督检验站的资质条件、人员与硬件设施,由动物卫生检测中心、动物实验部(ABSL-2)、国家动物疫病防控高级别生物安全实验室(ABSL-3)、病理实验室的部分成员与硬件条件,并自哈尔滨兽医研究所15个研究创新团队中抽调具有兽药研发及临床评价...

猪圆环病毒3型TaqMan-MGB荧光定量PCR方法的建立及应用

作者：李晓菲; 陈婷; 孙爱荣; 葛晓杰; 黄艳; 徐婷; 王彩宏; 魏笑笑; 秦立廷 刊期：2019年第02期

为建立猪圆环病毒3型(PCV3)荧光定量PCR检测方法,本研究根据GenBank中PCV3基因序列设计特异性引物和探针,经过反应体系和条件优化,建立了特异性检测PCV3的TaqMan-MGB荧光定量PCR方法。该检测方法在4.78×10~1拷贝/μL~4.78×10~9拷贝/μL质粒标准品范围内均有良好的线性关系;该方法特异性试验结果显示,其与多种常见猪病病毒均无交叉反应,特异性良好;...

猪繁殖与呼吸综合征病毒与非典型瘟病毒双重RT-PCR检测方法的建立与应用

作者：冯宇; 杨晓宇; 赵军; 李雨濛; 徐志文; 朱玲 刊期：2019年第02期

为建立同时快速简便地检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)与非典型瘟病毒(APPV)两种病毒的方法,本研究根据GenBank中登录的PRRSV、APPV的基因序列,选取PRRSV的ORF2基因和APPV的NS2基因分别设计特异性引物,通过优化反应条件,建立了能够同时检测PRRSV与APPV的双重RT-PCR方法。利用该方法对PRRSV、APPV重组质粒、猪瘟病毒、乙型脑炎病毒、猪流行性...

猪猝死症4种重要病原多重连接探针扩增鉴别检测技术的建立与应用

作者：周莹珊; 陈琳; 孙静; 姜胜; 邵春艳; 周彬; 宋泉江; 黄保续; 王晓杜; 宋厚辉 刊期：2019年第02期

为了快速检测引起猪猝死的病原,本研究针对临床引起猪猝死症的4种疾病病原(猪尼帕病毒、非洲猪瘟病毒、猪产气荚膜梭菌和猪胸膜肺炎放线杆菌)分别设计特异性探针,建立了同时检测这4种病原的多重连接探针扩增技术(MLPA)。对扩增产物进行毛细管电泳分析,结果显示该方法,探针之间没有交叉反应,特异性强。对不同病原核酸的最低检测限可以达到140拷贝...

口蹄疫病毒实时荧光RT-RPA快速检测方法的建立

作者：刘立兵; 王金凤; 张若曦; 石蕊寒; 韩庆安; 李睿文; 王建昌; 袁万哲 刊期：2019年第02期

为建立一种简单、快速、特异的口蹄疫病毒(FMDV)分子检测方法,本研究基于FMDV的3D基因,设计特异性引物和exo探针,建立了用于FMDV快速检测的等温实时荧光反转录重组酶聚合酶(Real-time RT-RPA)方法。该方法采用便携式等温扩增仪-Genie Ⅲ实时监测扩增结果,40℃20 min即可完成检测。结果显示,FMDV RT-RPA方法能够特异性扩增FMDV 3D基因,而对水泡性...

猪圆环病毒3型Cap蛋白单克隆抗体的制备及其在免疫组化试验中的初步应用

作者：赵冬; 王小波; 高清清; 郇长超; 王万彬; 高崧; 刘秀梵 刊期：2019年第02期

为制备猪圆环病毒3型(PCV3)Cap蛋白单克隆抗体(MAb),并初步应用于感染细胞或组织样品中PCV3抗原的间接免疫荧光试验(IFA)或免疫组化(IHC)检测,本研究将PCV3 Cap蛋白的去核定位信号肽基因克隆于原核表达载体pET-28a中,经IPTG诱导表达了具有免疫原性的融合蛋白。以表达的重组蛋白免疫BALB/c小鼠,共获得8株能够稳定分泌针对PCV3 Cap蛋白的MAb杂交瘤...

猪PBD1成熟肽基因在干酪乳酸杆菌中的表达及其抑菌活性的检测

作者：杨兴武; 郭奎; 韩昊莹; 赵宇; 郑慧华; 杨明凡; 陈红英 刊期：2019年第02期

为获得一株能够稳定表达猪β防御素-1 (PBD1)成熟肽蛋白的重组干酪乳酸杆菌,本研究将PBD1成熟肽基因克隆至含有短小干酪乳酸杆菌信号肽的pUCK-SP载体中,再将SP-PBD1亚克隆到干酪乳酸杆菌整合性表达质粒pMJ67的Lac启动子下游,获得重组质粒pMJ67-SP-PBD1,电转化入干酪乳酸杆菌,经红霉素抗性筛选和基因组DNA PCR测序鉴定,证实猪PBD1基因整合到了干酪...

牛多杀性巴氏杆菌znuA基因的原核表达及其免疫保护作用的研究

作者：嵇少泽; 高云航; 勾长龙; 张喜庆; 田佳琪; 李晨; 王思月 刊期：2019年第02期

为研究牛多杀性巴氏杆菌(P.multocida)高亲和力锌吸收蛋白znuA的免疫学活性及其免疫保护作用,本研究利用PCR方法扩增了P.multocida znuA基因,构建表达载体pET-28a-znuA,将其转化E.coli BL21后经诱导表达。表达产物经SDS-PAGE和western blot分析显示,重组蛋白约40 ku;以重组znuA蛋白免疫小鼠后用P.multocida菌株Y-1攻毒,结果显示重组znuA蛋白对免...

产气荚膜梭菌β毒素蛋白抗原表位预测及CPB-N蛋白免疫原性分析

作者：王玉建; 商红旗; 朱琳; 徐煜琳; 胡莉萍; 朱瑞良 刊期：2019年第02期

为获得具有与β毒素蛋白相同免疫原性的新蛋白,本研究对产气荚膜梭菌β毒素蛋白的氨基酸序列进行综合分析,预测其抗原表位并筛选出有效的新蛋白。采用生物信息学方法综合分析β毒素蛋白二级结构、亲水性、可塑性、抗原性、跨膜区域以及信号肽,同时参考ElliPro服务器在线预测。最终预测aa108~aa320区段为优势抗原表位,在此基础上建立β毒素蛋白三维结...