中国病原生物学杂志 北大期刊 CSCD期刊 统计源期刊

结核分枝杆菌pyrF基因的生物信息学分析

作者：黄劲; 王洁; 牛雪可; 邱文; 赵亮; 王梅竹; 康颖倩; 冯永红; 秦莲花 刊期：2019年第02期

目的应用生物信息学软件分析预测结核分枝杆菌乳清酸核苷-5’-磷酸脱羧酶(orotidine 5’-monophosphate decarboxylase,OMPdecase)的结构与生物学特性。方法采用ProtParam,ProtScale,TMPred,SignalP4.1,NetNGlyc1.0,Netphos3.1,SOPMA,SWISS-MODEL和STRING等生物信息学软件对结核分枝杆菌(Mycobacterium Tuberculosis)H37Rv的pyrF基因及其编码蛋...

结核分枝杆菌PPE32蛋白的生物信息学分析

作者：杨雨昕; 付玉荣; 伊正君 刊期：2019年第02期

目的应用生物学软件预测结核分枝杆菌PPE32基因编码蛋白的结构和功能。方法从NCBI中获得PPE32基因及其编码序列,通过ORF Finder、ProtParam、ProtScaleon Expasy、TMHMM Server v.2.0、SignalP 4.1 Server、TargetP 1.1 Server、NetPhos 3.1 Server、BLAST、SOPMA、SWISS-MODEL、ABCpred、SYFPEITHI、STRING等工具预测分析PPE32蛋白的相关生物学...

大肠埃希菌CRISPRs间隔序列的来源研究

作者：梁文娟; 崔聪聪; 段广才; 刘慧莹; 徐亚珂; 郗园林; 杨海燕; 陈帅印 刊期：2019年第02期

脑膜炎球菌fHBP的克隆表达与免疫原性研究

作者：张赛; 兰永发; 尹元 刊期：2019年第02期

目的选用pET蛋白表达系统重组表达A、B两个亚家族的fHBP蛋白(fHBP-A和fHBP-B),制备脑膜炎球菌蛋白疫苗,并对其进行免疫原性检测,评价该蛋白疫苗抵抗脑膜炎球菌感染的保护作用。方法以脑膜炎球菌Nm048(A家族)与Nm035(B家族)菌株裂解液为模版扩增目的基因fHBP-A与fHBP-B,与原核表达载体pET-24b连接,构建重组质粒pET-24b-fHBP-A和pET-24b-fHBP-B。...

鲍曼不动杆菌外膜蛋白A慢病毒载体的构建及其对RAW264.7细胞NLRP3炎症小体的激活

作者：安志远; 丁文一 刊期：2019年第02期

目的建立OmpA过表达慢病毒载体并观察其对RAW264.7细胞NLRP3炎症小体的激活。方法以鲍曼不动杆菌ATCC 19606为模板,设计引物扩增OmpA基因,将其克隆至慢病毒表达载体pCDH-MSCV-copGFP中。将此表达质粒和辅助质粒共转染HEK293T细胞包装病毒,浓缩病毒上清液并用GFP报告基因法测定病毒滴度;用包装病毒颗粒感染RAW264.7细胞48h,Real-time PCR法检测Om...

新孢子虫致密颗粒7和鼠白介素18融合蛋白的表达及鉴定

作者：李利山; 王晓岑; 杨升; 宫鹏涛; 李建华; 张西臣 刊期：2019年第02期

目的获取新孢子虫致密颗粒7和鼠白介素18(NcGRA7-MouseIL-18)重组基因,表达NcGRA7-MouseIL-18融合蛋白并进行纯化。方法以新孢子虫的cDNA和鼠巨噬细胞的cDNA为模板,采用PCR技术及无缝克隆技术(In-Fusion Cloning)扩增NcGRA7-MouseIL-18基因片段,构建pET-32a-NcGRA7-MouseIL-18重组表达质粒,转入E.coli BL21(DE3)感受态细胞中,诱导表达目的蛋白Nc...

TgMIC6的优化表达及其多克隆抗体的制备

作者：李婧旸; 韩成建; 刘志远; 张德然; 余莉 刊期：2019年第02期

目的原核表达弓形虫微线体蛋白6(TgMIC6)结构功能域,并制备其多克隆抗体。方法运用Optigene TM密码子优化分析平台对弓形虫MIC6(TgMIC6)功能区的编码序列进行密码子优化,合成优化后的编码基因,并将其克隆入pET30a原核表达载体,构建pET30a-MIC6重组质粒;重组质粒转化入大肠埃希菌BL21(DE3),IPTG诱导重组蛋白表达,经His亲和层析纯化后以His单克隆...

猪囊尾蚴排泄分泌抗原Ts8B2基因的原核表达、纯化以及免疫反应性分析

作者：陈静梅; 李瑾; 孙慧; 肖婷; 魏庆宽; 贾凤菊; 黄炳成 刊期：2019年第02期

目的原核表达猪囊尾蚴排泄分泌抗原Ts8B2基因,分析重组蛋白的免疫反应性。方法参照GenBank中Ts8B2基因序列设计引物,以合成基因为模板获得预期DN段,双酶切后连接至原核表达载体pGEX-4T-1。将重组质粒转化入大肠埃希菌DH5α(E.coli DH5α),PCR、双酶切筛选阳性质粒,测序确认后转化至E.coli Rosstea,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,十二烷...

多房棘球蚴四跨膜蛋白的生物信息学分析

作者：杨宇; 张耀刚; 张灵强; 任利; 樊海宁 刊期：2019年第02期

目的采用生物信息学方法分析多房棘球蚴四跨膜蛋白(EmTspan)的结构与抗原表位。方法从NCBI数据库中下载EmTspan蛋白的氨基酸序列,运用ProtParam、ProtScale、SOSUI、DNASTAR、SignalP、Cell-PLoc、SOMPA、NetPhos、Motif Scan、Phyre 2、TMHMM等生物信息学软件分析蛋白质的理化性质、亚细胞定位、跨膜区域、磷酸化和翻译后修饰位点及二、三级结...

多房棘球绦虫SEVERIN蛋白基因的克隆及T、B细胞表位预测

作者：王芬; 赵明才; 胡容; 王洁; 王明霞; 叶彬; 刘家瑞 刊期：2019年第02期

目的采用RT-PCR方法克隆多房棘球绦虫SEVERIN蛋白基因(EmSEVERIN),并进行T、B细胞表位等生物信息学分析。方法根据细粒棘球绦虫SEVERIN基因序列设计特异引物,以多房棘球绦虫原头蚴cDNA为模板扩增目的基因并测序。利用ProtParam、SMART、MotifScan、SWISS-MODEL等在线分析程序,结合DNAStar、DNAMAN等生物信息学软件分析、预测Emseverin基因编码蛋...

艰难梭菌快速分子诊断方法的建立

作者：于翔; 把美丽; 毛小琴 刊期：2019年第02期

目的建立用于快速检测艰难梭菌感染的聚合酶链式反应(PCR)和环介导等温扩增(LAMP)方法。方法收集有艰难杆菌感染症状患者的粪便样品,经CCFA选择性培养基筛选和VITEK MS飞行时间质谱仪分析获得艰难梭菌菌株;利用BLAST分析得到艰难梭菌特异性基因,以此为模板建立、优化并验证艰难梭菌PCR检测和LAMP检测方法。结果筛选得到3株产毒艰难梭菌,经数据分...

家蝇天蚕素Cec4的原核表达与纯化

作者：彭建; 刘巍巍; 吴兆颖; 杨燕琴; 尚小丽; 吴建伟 刊期：2019年第02期

目的构建家蝇天蚕素(Cecropin)Cec4原核表达质粒,表达及纯化Cec4蛋白。方法从家蝇cDNA文库中筛选家蝇天蚕素基因Cec4,设计并合成特异性引物,PCR扩增Cec4基因,连接克隆载体后转入DH5α感受态细胞,通过重组子鉴定及测序完成目的基因的克隆。用限制性内切酶BamHI和HindⅢ双酶切目的基因和质粒,构建GST表达载体pGEX 4T-1-Cec4,转化到大肠埃希菌BL-21...

2009-2015年贵州省致病性钩端螺旋体分离株PFGE分型分析

作者：刘英; 王铭; 李世军; 姚光海; 黄荷; 陈旭; 王斌; 唐光鹏; 王定明 刊期：2019年第02期

目的了解贵州省2009-2015年分离自鼠类宿主动物的钩端螺旋体(简称钩体)PFGE带型特征,为当地钩体病的预防和控制提供科学依据。方法对贵州省近年分离自鼠类宿主动物的56株钩体采用致病性钩体特异引物进行PCR扩增鉴定,应用血清分群PCR对其进行血清群鉴定,采用包埋法提取钩体染色体DNA,利用核酸内切酶NotI对DNA进行酶切,酶切片段经PFGE电泳后采用凝...

结膜吸吮线虫显微结构描述与子宫蒂功能分析

作者：石娇; 李爽; 李晋川 刊期：2019年第02期

目的通过光学显微镜观察结膜吸吮线虫(Thelazia callipaeda,T. cp)雌雄成虫标本,分析雌虫'子宫蒂'特殊结构与功能的关系,为寄生虫形态学研究和虫种鉴定积累资料。方法翻开结膜吸吮线虫患者眼睑,用棉签粘取活动虫体,置生理盐水载玻片上,光学显微镜下观察虫体形态。然后用酒精固定虫体,分段定位拍照,采用Adobe Photoshop软件拼接处理,得到完整虫体...

马鞍山市2016-2017年流感病原学监测结果分析

作者：张云霞; 江良梁; 赵志荣 刊期：2019年第02期