摘要:目的探讨高血脂、肝素对乙型肝炎病毒基因实时荧光定量PCR(HBVDNA—FQ—PCR)测定的干扰机制。方法将己经确诊的乙肝大三阳志愿者的高脂血和非脂血、肝素抗凝血和未抗凝血用实时荧光定量PCR做HBVDNA定量测定并同时做定性测定,另外将同一份乙肝大三阳标本五种不同浓度肝素抗凝,另一份不抗凝,然后分别用HBVDNA—FQ—PCR和琼脂糖凝胶电泳-溴乙锭显色法做HBVDNA定量和定性测定。结果5份非脂血和相应的高脂血HBVDNA定量结果有非常显著性差异(P〈0.01),定性结果两者没有差异全部为阳性(5/5)。5份用1500U/ml肝素抗凝血HBVDNA定量结果都为0,定性结果都为阴性,而相应未抗凝血定量结果分别为6.35E±8,5.21E±6,7.05E+8,2.98E±7,6.33E±6,定性结果肝素抗凝和未抗凝标本都为阳性(5/5)。五种不同浓度肝素抗凝标本的HBVDNA定量结果,当肝素浓度大于1000U/m1时定量结果为0,肝素浓度小于100U/ml对HBVDNA—FQ—PCR测定结果影响不大,相应的对照HBVDNA拷贝数为7.32+8E,不同浓度肝素抗凝标本的HBVDNA定性结果,当肝素浓度大于500U/ml为阴性,小于100U/ml为阳性。结论高血脂对HBVDNA实时荧光定量PCR的干扰机制主要是血液中的低密度脂肪(乳糜微粒等)对荧光的屏蔽或吸收作用,肝素对HBVDNA实时荧光定量PCR的干扰机制是肝素对Taq酶的抑制作用。
注:因版权方要求,不能公开全文,如需全文,请咨询杂志社