生物技术通讯杂志 省级期刊

布鲁菌外膜蛋白Omp19突变体的构建及免疫原性研究

作者：郭凤羽; 殷瑛; 宰晓东; 李汭桦; 王美荣; 李耀辉; 胡凯; 李玉杰; 徐俊杰; 陈薇 刊期：2019年第05期

目的:构建Omp19突变体,分析突变体与Omp19在理化性质和免疫原性上的异同,初步探究Omp19序列3个半胱氨酸残基(Cys)对原蛋白的影响,为以Omp19为组分的布鲁菌亚单位疫苗研究提供依据。方法:以前期构建的含有Omp19核酸序列的质粒为模板,分别缺失或替换序列中编码Cys的碱基,并连接至原核表达载体pET32a,IPTG诱导表达并利用SPXL柱进行纯化,SDS-PAGE鉴...

SXT/R391元件核心基因的生物信息学分析

作者：张琪; 周静; 周江林; 孔娜; 胡明达; 彭小川; 李北平; 梁龙; 靳远; 任洪广; 岳俊杰 刊期：2019年第05期

目的:SXT/R391元件是革兰阴性菌中研究最充分、已知成员最多的整合性接合元件家族,本研究的主要目的是探讨SXT/R391元件核心基因组的适应性进化规律。方法:收集数据库中及文献报道的SXT/R391家族元件数据,并利用已测序的细菌基因组序列预测该家族元件,分析元件核心基因的进化特性。结果:通过文献搜集和预测,共获得83个SXT/R391元件的基因组序列...

裂谷热病毒截短型Gc蛋白的真核表达与纯化

作者：郝勐; 张胜男; 李建民; 夏咸柱 刊期：2019年第05期

目的:对裂谷热病毒截短型Gc蛋白进行真核表达与纯化,并鉴定其免疫反应性。方法:在截短型Gc蛋白的基因5'和3'端分别添加tPA信号肽和StrepⅡ-tag,再将其克隆到真核表达载体pCAGGs中,转染Expi293F细胞进行真核表达;用StrepTrap亲和层析柱纯化,ELISA检测该蛋白与特异抗体的免疫反应性。结果:截短型Gc蛋白在Ex⁃pi293F细胞培养上清中获得表达,经纯化...

通过突变甲醇脱氢酶启动子提高甲基营养菌吡咯喹啉醌产量

作者：孙晓宇; 薄明井; 杨亚欣; 张惟材; 葛欣; 熊向华 刊期：2019年第05期

目的:考察甲基营养菌J1-1甲醇脱氢酶启动子活性与吡咯喹啉醌(PQQ)产量的相关性。方法:通过定点突变甲醇脱氢酶P0771启动子,利用lacZ作为报告基因检测突变启动子的转录水平,筛选出活性下降的突变启动子在J1-1中替换天然启动子获得突变菌株,检测突变菌株甲醇脱氢酶表达、酶活以及菌体生长和PQQ产量。结果:定点突变了7个P0771启动子,利用lacZ作为报...

尼帕病毒融合蛋白的真核表达及其特异性血清的制备

作者：刘渝娇; 李耀辉; 张冠英; 范鹏飞; 迟象阳; 房婷; 刘树玲; 陈旖; 宋小红; 于长明 刊期：2019年第05期

目的:用真核细胞表达可溶性尼帕病毒融合蛋白(sF),通过免疫小鼠获得抗F蛋白的特异性血清。方法:设计构建重组质粒pcDNA-sF,在哺乳动物表达系统中进行表达,通过Strep柱亲和层析纯化目的蛋白,Western印迹检测目的蛋白,免疫小鼠后制备抗F蛋白的特异性血清,并通过ELISA鉴定抗血清的结合活性。结果:尼帕病毒F蛋白在哺乳动物细胞中获得可溶性表达,纯化...

4-羟基他莫昔芬依赖的内含肽调控绿色荧光蛋白功能研究

作者：赵拯浩; 王步森; 王玉东; 朱丹妮; 董铭心; 侯利华; 陈薇 刊期：2019年第05期

目的:验证小分子4-羟基他莫昔芬(4-HT)依赖的内含肽调控绿色荧光蛋白(eGFP)功能的可行性。方法:根据eGFP的结构与功能,在蛋白上选取7个氨基酸位点,通过同源重组方式将内含肽序列插入不同位点,转染293T细胞系后通过流式细胞术检测eGFP的表达情况,分析4-HT依赖的内含肽调控剪接效率。结果:在选取的7个氨基酸位点中,有5个具有调控效果,其中S148位点...

桦褐孔菌水提物体外抗HIV-1研究

作者：郭婷婷; 齐婷娟; 岳成; 周玉柏; 李霄 刊期：2019年第05期

人5型腺病毒结合抗体检测方法的建立和应用

作者：王玉东; 赵拯浩; 宋小红; 陈旖; 王步森; 吴诗坡; 侯利华 刊期：2019年第05期

目的:建立人5型腺病毒(HAdv5)结合抗体检测方法,用于检测动物实验中血清的抗HAdv5结合抗体水平。方法:将复制缺陷型HAdv5感染293F细胞,大量表达HAdv5抗原蛋白,经Source 30Q和Sepharose 4FF两步柱层析,获得高纯度的HAdv5抗原蛋白,分别采用SDS-PAGE、HPLC和Western印迹对纯化的抗原进行鉴定,并与市售的HAdv5-Hexon进行对比分析。用纯化的HAdv5抗原...

实时荧光定量PCR检测工程酵母制备重组单克隆抗体原液中的宿主DNA残余

作者：鲁仕豪; 石萍萍; 王甜甜; 吴军; 刘波 刊期：2019年第05期

目的:建立实时荧光定量PCR法检测基于新型工程化酵母制备的重组单克隆抗体原液中残留DNA的含量,完善临床前质量控制研究资料。方法:以毕赤酵母工程菌的基因组DNA作为标准品,选择在毕赤酵母中基因拷贝数高的5S rRNA基因作为检测基因,合成特异性引物;通过优化反应体系、加样回收方法,建立实时荧光定量PCR检测糖基工程酵母宿主DNA残余的方法。结果:...

序贯放疗和巩固放疗对广泛期小细胞肺癌患者无进展生存期影响的对比研究

作者：俞邓枝; 付文华; 田洁; 张媛 刊期：2019年第05期

陆地棉种质资源的表型及SSR遗传多样性分析

作者：贾子昉; 王清连; 董娜 刊期：2019年第05期

目的:了解实验室保存的300份棉花种质资源的遗传背景,为棉花育种提供理论基础。方法:从372对简单重复序列(SSR)引物中筛选出38对稳定且扩增效果好的引物,从表型性状和分子标记两方面研究300份种质资源的遗传多样性。结果:共检测出126个片段,平均每对引物为3.66个,其中多态性片段为90个,每对引物的多态性条带数为1~6,平均2.42,多态性比较低。遗传...

不同物理处理方法对新疆紫草种子萌发特性的影响

作者：丁晓霞; 马生军; 杨建波; 马留纯; 李淑珍; 范金蕾; 宋婷婷 刊期：2019年第05期

目的:探讨3种不同物理处理方法对新疆紫草种子萌发过程中过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)活力的影响。方法:以新疆紫草种子为实验材料,分别选择不同贮藏时间、不同光照、不同温度处理并测定其发芽率、日均发芽率、根长,同时用紫外吸收法测定CAT活力、愈创木酚法测定POD活力、氮蓝四唑光化还原法测定SOD活力。结果:贮藏1...

更正启事

作者：《生物技术通讯》编辑部 刊期：2019年第05期

应作者请求,本刊2019年第30卷第4期553~559页刊发的文稿《血红素加氧酶1及其代谢产物在心血管系统病变中的保护作用》(作者:徐欢,宋伦),应补充基金项目信息如下:基金项目:国家自然科学基金重大研究计划培育项目(91743115).

利用研磨仪快速提取基因组DNA用于PCR

作者：荣飞; 陈璐瑶; 张小妮; 吴均坚; 何文锦; 陈由强; 薛婷 刊期：2019年第05期

目的:采用机械法破碎细胞壁释放DNA,以达到快速用于PCR的目的。方法:用全自动研磨仪破碎细胞,设计16个频率和时间的组合,探究不同研磨频率和研磨时间的组合对DNA提取的影响,并将每个组合提取的DNA进行PCR。同时,利用研磨仪结合液氮进行研磨,以此来提取完整的基因组DNA。结果:不同的研磨频率和研磨时间的组合提取的DNA经PCR扩增后,均能得到目的条...

嗜黏蛋白阿克曼菌——一种潜在的益生菌

作者：宾蕾; 邓仲良; 毕玉晶; 杨瑞馥 刊期：2019年第05期

肠道微生物群在宿主代谢和低度炎症的调节中发挥重要作用,许多疾病的发生与肠道菌群紊乱密切相关。因此,以肠道原籍菌为基础的益生菌有望成为许多疾病新的治疗方法。嗜黏蛋白阿克曼菌是人体正常肠道菌群的重要成员,占菌群的1%~3%,是一种可降解黏蛋白的细菌,与肥胖、糖尿病、炎症和代谢紊乱呈负相关,近年来成为肠道微生态和益生菌的研究热点。本...