杂志简介:《生物技术通讯》杂志经新闻出版总署批准,自1989年创刊,国内刊号为11-4226/Q,是一本综合性较强的生物期刊。该刊是一份双月刊,致力于发表生物领域的高质量原创研究成果、综述及快报。主要栏目:研究报告、综述、科研管理
作者:郑伟; 郭晓华; 董洁; 李少华; 丁红梅; 李慧; 黄皑雪; 夏伟; 白琛俊; 李达; 耿介; 李洁; 邵宁生 刊期:2017年第03期
目的:探讨长非编码RNA(1ncRNA)UCA1作为miR216b的“分子海绵”结合miR-216b后的命运变化。方法:提取人HEK293T细胞基因组,以特异性引物PCR扩增UCA1基因并克隆至pcDNA6.0b载体,用氨苄西林抗性筛选阳性克隆,重组质粒pcDNA6-UCA1转染HEK293T和HeLa细胞并鉴定其表达水平。向HEK293T和HeLa细胞转染miR-216b类似物,同时用放线菌素D抑制细胞转...
作者:张路遥; 王丽丽; 杨金刚; 邢思宁; 赵松; 于颖; 谢晓冬; 马东初 刊期:2017年第03期
目的:探讨JNK抑制剂SP600125诱导巨核细胞白血病系多倍体化的调控机制。方法:用SP600125和3种抑制剂(PD184352、U0126和LY294002)处理Dami和CMK细胞,用点突变技术对核糖体蛋白S6激酶1(S6K1)C端自抑制假底物结构域和疏水基序突变构建的S6K1质粒转染细胞,流式细胞术分析细胞的DNA倍性,Western印迹检测S6K1、MAPK和Akt蛋白的表达及磷酸化...
作者:侯小娟; 陈鸿斌; 袁旭东; 王双; 仇玮祎; 孙志伟 刊期:2017年第03期
目的:获得全人源抗人OX40特异性抗体候选株,为相关药物开发奠定基础。方法:依托本实验室构建的大容量全合成全人源噬菌体单链抗体库平台,以OX40为抗原进行固相筛选,经过3轮条件渐进严苛的筛选后,阳性克隆得到富集;将其中富集效果最好的一株单链抗体scFv-1改造成全抗体(IgG1)形式,改造成功的重组质粒按照一定比例转染HEK293-F细胞进行...
作者:刘坤; 殷瑛; 张军; 董大勇; 刘炬; 李汭桦; 麻浩; 单俊杰; 徐俊杰 刊期:2017年第03期
目的:以炭疽芽孢杆菌保护性抗原(PA)为模式抗原,对茯苓多糖PCP-Ⅰ作为疫苗佐剂增强抗原特异性体液免疫反应的机制进行研究。方法:PCP-Ⅰ混合PA免疫BALB/c小鼠,分别采用ELISA和毒素中和实验,检测免疫后小鼠血清中PA特异性(anti-PA)抗体和炭疽毒素中和抗体;采用流式细胞术检测树突状细胞(DC)经PCP-Ⅰ体外刺激后的成熟情况,及二免后7 ...
作者:刘慧莹; 李文斐; 张自丽; 郑敬; 衡芝芝; 李璞媛; 苑鑫; 牛文凯; 柏长青 刊期:2017年第03期
目的:探究间充质干细胞(MSC)与鞘氨醇-1-磷酸(S1P)联用对急性肺损伤发生过程中S1P代谢相关酶的表达调控作用。方法:构建脂多糖(LPS)刺激的急性损伤的肺内皮细胞模型,与MSC及S1P非接触共培养后,利用细胞实时无标记系统,考察MSC与S1P联用对损伤细胞微电子阻抗的增强保护作用,利用RT—PCR考察两者对损伤细胞中S1P代谢相关酶的表达调控...
作者:宋如昕; 王兰; 张左兵 刊期:2017年第03期
目的:从中华鳖脾脏、肝脏、肠道构建的SMART cDNA文库中克隆中华鳖gp130基因cDNA全长。方法:采用RACE法克隆中华鳖gp130基因全长cDNA,并对其进行生物信息学分析。结论:中华鳖gp130基因cDNA全长3806 bp,对应基因组全长73 252 bp,包含16个内含子及17个外显子。中华鳖gp130与鸟类、哺乳类相比均有保守的共线性关系。该基因编码由927个氨基酸...
作者:尹彦超; 张晓冬; 马永生; 周姗; 高智强; 胡婷; 刘颖 刊期:2017年第03期
目的:对胀果甘草甘草苷生物合成途径的关键酶查尔酮异构酶(CHI)进行基因克隆及序列分析。方法:根据乌拉尔甘草CHI基因cDNA序列设计引物,以胀果甘草主根总RNA为模板RT-PCR扩增CHI基因cDNA序列,并对其进行分析。结论:克隆得到20条胀果甘草CHI基因cDNA序列,开放读框全长690 bp,编码229个氨基酸残基。20条胀果甘草CHI基因的cDNA序列存在22...
作者:黄竞; 董岩; 潘超; 胡显文; 曾明; 吴军; 朱力; 王恒樑 刊期:2017年第03期
目的:霍乱是由霍乱弧菌引起的一种烈性传染病,其防治已成为一个全球性的公共卫生问题。其中1992年出现的O139血清群是除O1外另一种病原体,发病数日益增多。因此,有必要寻找一种安全有效适用于各种人群的疫苗。方法:敲除霍乱弧菌O139血清群93-3株脂多糖合成途径中O抗原连接酶基因waaL,在周间质产生游离的多糖,之后转入包含来自脑膜炎奈瑟...
作者:吕晓业; 王健; 李昕宇; 黄芳; 王芃; 周建光; 李山虎; 卫勃 刊期:2017年第03期
目的:初步探索EphA3与胃癌细胞BGC823增殖的关系。方法:用T4DNA连接酶将EphA3的全长eDN段连接到酶切后的慢病毒载体pCDH—EF1-MCS—T2A—Puro中制备慢病毒,感染胃癌BGC823细胞建立过表达EphA3细胞系,Western印迹检测目的蛋白的表达,CCK8细胞生长实验和裸鼠成瘤实验检测EphA3对BGC823细胞增殖的影响。结果:双酶切鉴定与基因测序表明过表达E...
作者:隋雨彤; 赵尊全; 王辉; 郑玉玲; 刘鹏; 姜永强 刊期:2017年第03期
目的:检测天然猪链球菌溶血素(nSLY)对人脑微血管内皮细胞凋亡的影响,从而探讨猪链球菌致宿主脑膜炎的发生机制。方法:使用猪链球菌野生株05ZYH33上清、sly基因敲除突变株ΔSLY上清、天然SLY蛋白分别与人脑微血管内皮细胞hCMEC/D3作用4 h后收集细胞,分别用流式细胞术和蛋白免疫印迹技术检测hCMEC/D3细胞凋亡的情况。结论:与对照组比较,天...
作者:冉云伟; 张改平; 刘运超; 陈玉梅; 王聚财; 孟凤丽; 王爱萍 刊期:2017年第03期
目的:采用分子伴侣pTf16共表达的形式促进截短型人乳头瘤病毒(HPV)58亚型L1蛋白在大肠杆菌中的可溶性表达。方法:将重组表达质粒pGEX-6P-HPV58-L1转入含有分子伴侣pTf16的大肠杆菌BL21感受态细胞中,在2.0 mg/mL L-阿拉伯糖诱导表达20 min之后加入1.0 mmol/L的IPTG,18℃诱导表达24 h,使目的蛋白与伴侣蛋白共表达;重组蛋白经GST亲和纯化后...
作者:刘洋; 王兰; 孙敏 刊期:2017年第03期
目的:采用半静态毒性实验方法,研究慢性镉暴露对性成熟斑马鱼卵巢组织抗氧化酶活性、脂质过氧化水平的影响及其母源传递毒性效应。方法:依据前期测定的96 hLC50,参考国家渔业标准,设置5个镉处理组(0.058、0.116、0.232、0.580、1.160 mg/L)和1个对照组,镉暴露21 d后,对卵巢组织超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧...
作者:常敏惠; 王兰; 张左兵 刊期:2017年第03期
目的:分析斑马鱼分化抑制因子1(ID1)启动子在体内、外的活性情况,为研究ID1基因表达调控奠定基础。方法:通过构建斑马鱼ID1启动子不同长度萤光素酶报告质粒,分别以鲤鱼上皮瘤细胞(EPC)和斑马鱼胚胎为材料进行体外转染和体内注射,并采用双萤光素酶报告系统对不同长度ID1启动子活性进行评估。结果:在体内、外实验中,不同长度ID1启动子...
作者:刘镇瑜; 刘子强; 蔡萌萌; 陈宁; 徐庆阳 刊期:2017年第03期
目的:将发酵过程与膜分离提取过程相偶联,解决现有产酸周期短、乙酸积累较为严重等问题,以提高目的产物的产量,降低代谢抑制物质的积累量。方法:将发酵罐与陶瓷膜分离装置相偶联,在发酵时长21h、乙酸积累量达到5g/L时开始膜过滤浓缩菌液,结束后补加透析培养基继续发酵。结果:采用膜偶联发酵技术,与传统发酵工艺相比,菌体生物量提高3...
作者:李静; 徐建余; 宁年智; 刘传杰; 黄洁; 刘雪超; 李涛; 王慧 刊期:2017年第03期
目的:产β-内酰胺酶是大肠杆菌、肺炎克雷伯菌等对β内酰胺类抗生素耐药的主要机制之一,该酶能水解青霉素、头孢菌素、碳青酶烯类等多种抗生素,其中TEM型是发现最早且种类最多的β内酰胺酶。探讨TEM-1型β内酰胺酶原核表达载体的构建、酶的纯化及活性验证。方法:利用PCR技术,以大肠杆菌全基因组为模板钓取TEM-1基因,构建pET22b(+)-TEM-1表...